Onkológia hal teszt érzékeny gén. A hal a differenciáldiagnosztika tanulmánya. Hogyan működik a hal teszt

Modern citogenetikai analízis módszere, amely lehetővé teszi a kromoszómák magas színvonalú és mennyiségi változásainak meghatározását, valamint a malignus vérbetegségek differenciáldiagnosztizálásához és tömör tumorok.

Orosz szinonimák

Fluoreszkáló hibridizáció in situ

Halelemzés

Szinonimák angolul

Fluoreszkelés in situ.hibridizáció

Kutatási módszer

Fluoreszkáló hibridizáció in situ.

Milyen biomatériát lehet használni a kutatáshoz?

Szövet minta, szövetminta paraffinblokkban.

Hogyan készülj fel a kutatásra?

Az előkészítés nem szükséges.

Általános kutatási információk

Fluoreszkáló hibridizáció in situ (hal, angol nyelven. Fluoreszcencia bAN BEN.- situ.hibridizáció) az egyik leginkább modern módszerek A kromoszómális anomáliák diagnosztizálása. A fluoreszkáló címkével ellátott DNS-minták használatán alapul. A DNS-minták speciálisan szintetizált DNS-fragmensek, amelyek szekvenciája kiegészíti a vizsgált rendellenes kromoszómák DNS-szekvenciáját. Így a DNS-minták összetételben különböznek egymástól: Különböző, specifikus DNS-mintákat alkalmaznak a különböző kromoszómális anomáliák meghatározására. A DNS-minták mérete is különböznek: egyesek az egész kromoszóma felé irányulhatnak, mások egy adott lokuszba.

A hibridizációs folyamat során egy aberráns kromoszóma jelenlétében a vizsgálatban kötődnek a DNS-mintához való kötődés, amely a vizsgálat során fluoreszcens mikroszkóppal fluoreszcens jelként (a hal-teszt pozitív eredménye) van meghatározva. Aberráns kromoszómák hiányában a "mosott" reakció során nem kapcsolódó DNS-minták, amelyek a fluoreszcens mikroszkóp alkalmazásával a vizsgálat során fluoreszcens jel (a hal-teszt negatív eredménye) hiányzik. A módszer lehetővé teszi számunkra, hogy nemcsak fluoreszcens jel jelenlétét, hanem intenzitását és lokalizációját értékeljük. Így a hal-teszt nemcsak jó minőségű, hanem mennyiségi módszer is.

A hales tesztnek számos előnye van más citogenetikai módszerekhez képest. Először is, a halak vizsgálata mind metafázisra, mind az interfázis magokra, azaz nem deklaratív sejtekre vonatkozik. Ez a halak legfontosabb előnye a kariotipizálás klasszikus módjaihoz képest (például a Romanovsky-Gymlettemben lévő kromoszómák), amelyeket csak a metafázis magokhoz használnak. Ennek következtében a haltudomány pontosabb módszer a kromoszómális anomáliák alacsony proliferatív szövetekben történő meghatározására, beleértve a szilárd tumorokat is.

Mivel a hales teszt egy stabil DNS-t használ az interphase magok, a biotívumok széles választékát felhasználhatják a finomszögű törekvésű biopszia, stroke, csontvelő, bioptats, és fontos, megőrzött szövetfragmensek, például a biopled aspirációs biopszia, ütemek, aspirátumok, mint például szövettani blokkok. Például a hal-tesztet sikeresen elvégezhetjük az emlő biopultáció szövettani blokkjából kapott ismételt készítményeknél, amikor megerősítik a "mell adenokarcinóma" diagnosztizálását, és a tumor her2 / neu-státuszának meghatározásának szükségességét. Különösen hangsúlyozni kell ebben a pillanatban A tanulmányi halak javítóvizsgálatként ajánlottak, ha egy daganat immunhisztokémiai vizsgálatának meghatározatlan eredményét kapják a THER2 / Neu (Igh 2+) monmunohisztokémiai vizsgálatának meghatározására.

A hal egy másik előnye a mikror azonosításának képessége, amelyet klasszikus karyotipszel vagy PCR-vel nem észlelnek. Ez különösen fontos a gyanús szindróma di George és a Cycardiofacial-szindróma szempontjából.

A hal-tesztet széles körben használják a rosszindulatú betegségek differenciáldiagnózisában, elsősorban az oncoématológiában. Kromoszómális anomáliák kombinálva klinikai kép És az immunhisztokémiai kutatások adatai a besorolás alapja, meghatározzák a nyirok és a myeloproliferatív betegségek kezelésének és előrejelzésének taktikáját. A klasszikus példák a krónikus myelolomicosis - T (9; 22), akut beszéd leukémia - t (15; 17), krónikus limfoloikózis - Trisomy 12 és mások. Ami a szilárd tumorokat illeti, a leggyakrabban a haltudományt a mellrák diagnosztizálásában használják, hólyag, Vastagbél, neuroblasztóma, retinoblastoma és mások.

A tanulmányi halak a prenatális és preimplantáló diagnosztikában is használhatók.

A haltesztet gyakran a molekuláris és citogenetikai diagnosztika egyéb módszereiben végezzük. A tanulmány eredményét a komplexum becslése további laboratóriumi és szerszámadatok eredményével.

Mi a tanulmány?

• A rosszindulatú betegségek differenciáldiagnózisához (vér és szilárd szervek).

Mikor van hozzárendelt tanulmány?

• Ha gyanítja a rosszindulatú vérsejt vagy a szilárd daganatok, a kezelés taktikáját és az előrejelzést, amely a tumor klón kromoszómális összetételétől függ.

Mit jelentenek az eredmények?

Pozitív eredmény:

• A vizsgált minta jelenléte az aberráns kromoszómáknál.

Negatív eredmény:

• Az aberráns kromoszómák hiánya a vizsgált mintában.

Mi befolyásolhatja az eredményt?

• Az aberráns kromoszómák száma.



• A klinikai anyagok immunhisztokémiai vizsgálata (1 antitest alkalmazásával)
• A klinikai anyag immunhisztokémiai vizsgálata (4 vagy több antitest használata)
• HER2 tumor állapotának meghatározása halak által
• A her2 tumor státuszának meghatározása sish

Ki nevez egy tanulmányt?

Onkológus, gyermekorvos, szülésznői nőgyógyász, genetikai orvos.

Irodalom

• WAN TS, MA ES. Molekuláris citogenetika: elengedhetetlen eszköz a rák diagnózisához. Anticancer res. 2005 Jul-Aug, 25 (4): 2979-83.
• Kolialexi A, Tsangaris GT, Kitsiou S, Kanavakis E, Mavrou A. hatása citogenetikai és molekuláris citogenetikai vizsgálatok hematológiai rosszindulatú betegségek. Chang Gung Med J. 2012 Mar-Apr; 35 (2): 96-110.
• Mühlmann M. Molekuláris citogenetika metafázisban és interfázisos sejtekben rákos és genetikai kutatás, diagnózis és prognózis. Alkalmazás szöveti szakaszokban és sejtszuszpenziókban. GENET MOL RES. 2002 június 30, 1 (2): 117-27.

Fish-színezés módszer (fluoreszcens in situ hibridizáció) van kialakítva, a Livemore National Laboratory (USA) 1986-ban Ez alapvetően Új módszer A tanulmány a kromoszómák a módszer fluoroin-mentes DNS kimutatását hibridizáció in situ, specifikus molekuláris próbák. Az eljárás a kromoszómális DNS-re történő képességén alapul, hogy bizonyos körülmények között kötődjön DNS-fragmensekkel (DNS-próbák), amely magában foglalja a nukleotidszekvenciákat komplementer kromoszómális DNS. A DNS-próbák speciális anyagokkal (például biotin vagy digoxigenin) készülnek. A metafázis-kromoszómák hibridizációjára előállított citogenetikai készítményekre forgatható DNS-próbákat alkalmazunk. A hibridizáció bekövetkeztése után a gyógyszereket speciális fluorcetikus színezékekkel kezeljük, amelyek olyan anyagokkal vannak konjugálva, amelyek szelektíven kapcsolódnak a biotinhoz vagy a digoxigeninhez. Minden kromoszóma speciális színű. A hibridizáció a radioaktív címkével ellátott próbákkal is elvégezhető. A citogenetikai analízist egy lumineszcens mikroszkóp alatt végezzük ultraibolya fényben.

A hal módszert a kis küldöttségek és a transzkációk azonosítására használják. A kromoszómális csere (transzlokációk és dikentrigs) a szilárd kromoszómák között könnyen meghatározható többszínű szerkezetekként.

Munka vége -

Ez a téma a szakaszhoz tartozik:

Képzési modul. Biológiai sejtek

Magasabb szakmai oktatás .. Bashkir Állami Orvosi Egyetem .. Az Egészségügyi és Szociális Minisztérium ..

Ha további anyagokra van szüksége ezen a témában, vagy nem találta meg, amit keresett, javasoljuk, hogy a munkalapunk keresését használják:

Mit fogunk tenni a kapott anyaggal:

Ha ez az anyag hasznos lehet az Ön számára, akkor mentheti el a közösségi hálózati oldalra:

Csipog

E szakasz összes témája:

Képzési modul. Az általános és orvosi genetika alapjai
(A diákok módszeres utasításai) Oktatási fegyelmi biológia a terápiás eset előkészítésének irányába

Laboratóriumi munka szabályok
Az objektum mikroszkópos vizsgálatának szükséges eleme az albumban található vázlat. A vázlatok célja jobb megérteni és megszilárdítani az objektum szerkezetét, az egyéni struktúrát

Praktikus munka
1. A "Lukácsfilm" ideiglenes gyógyszer előkészítése annak érdekében, hogy ideiglenes készítményt készítsen egy hagymával, eltávolítva

Citoplazmatikus membránok szerkezete. Membránszállítási funkció
2. Képzési célok: tudni: - egy univerzális biológiai membrán szerkezete - a passzív anyagok mintái a membránokon keresztül

Az eukarióta sejtek szerkezete. Citoplazma és alkatrészei
2. Oktatási célok: Tudni: - Az eukarióta sejtek szervezésének jellemzői - a citoplazma szervoid szerkezete és működése

Az anyagok szintézisében részt vevő szervek
Bármely cellában, amely jellemzően jellemző anyagok szintézise, \u200b\u200bamelyek az újonnan kialakuló struktúrák helyett az újonnan kialakuló struktúrák helyett, vagy a biokémiai okokból vett enzimek

Szervezőgépek védő- és emésztési funkcióval
Lisoszómák Ezek a szervesoidok a 20. század 50-es évek óta ismertek, amikor a belga biokémista de DUV kis granulátumot talált, amely hidrolitikus májsejteket tartalmazott

A sejtek energiaellátásában részt vevő organoisok
A sejtfunkciók túlnyomó többsége az energia szempontjából társul. Az élő sejtek az állandó redox folyamatok eredményeként alkotják

A sejtek divíziójában és mozgásában részt vevő organomok
Ezek közé tartozik a cellás központ és származékai - a Cilia és a Flagella. A Cell Center Cell Center állati sejtekben és néhányban kapható

Gyakorlati munka száma 1
1. Mikroszkópos analízis az állandó gyógyszer "Golgi komplex gerinc ganglion sejtekben" a gyógyszeres idegsejteken

Riboszómák
Az elektronmikroszkóppal az összes pro- és eukarióta sejtek sejtjeiben detektálják, méretük 8-35 nm, az endoplazmatikus hálózat külső membránjával szomszédos. Riboszómákon történik

Granulált endoplazmatikus hálózat
Tekintsük egy durva endoplazmatikus hálózat szubszkoszkópiai struktúráját az elektronikus mikrográfiákon. Az éhező illékony egér hasnyálmirigyének három területe kiderül. Előtt

Citoplazmatikus mikrotubulusok
A citoplazmatikus csöveket minden állat és növényi organizmus sejtjei tartalmazzák. Ezek hengeres, fonalas képződés 20-30 mikron hosszú, átmérője 1

Mitotikus aktivitás szövetekben és sejtekben
Jelenleg a mitotikus ciklusokat és az állatok és növények sok szövetének mitotikus aktivitásának módját tanulmányozzák. Kiderült, hogy minden szövet egy bizonyos szintű mitotikus aktivitásban rejlik. M. M.

Mitózis (közvetett divízió) a roaster sejtjeiben
Egy kis növekedés a mikroszkóp, meg a reprodukciós zóna a csúcsa az íj, tedd a közepén a látómező egy telek jól észrevehető aktívan osztva sejtekben. Ezután hozzon létre egy kábítószert egy nagy növekedéshez

AMitózis (közvetlen részleg) az egér májsejtekben
Tekintsük az egérmájsejteket a mikroszkóp nagy növekedésével. A gyógyszersejteken sokoldalú formában van. A nukleáris üzemanyaggal lekerekített földrészekben. A megkezdett sejtek elválasztásában

Sinkarion Eggs Askarida
A mikroszkóp kis növekedésével találja meg az Asciles templomokkal töltött méh vágását tojással. Tekintsük a kábítószert nagyméretű nagyítással. A tojássejtekben a citoplazma összenyomódik és hámozott

A DNS és az RNS szerkezete és funkciói. A gének szerkezete és a pro- és eukarióták gének kifejeződésének szabályozása. A fehérje bioszintézis szakaszai
2. Képzési célok: Tudja: - kémiai összetétel és a nukleinsavak szervezésének jellemzői; - a DNS és az RNS közötti különbségek;

A mono-librid átkelésben lévő jelek örökségének mintái. Az allélikus gének kölcsönhatásának típusai
2. Képzési célok: tudni: - mono-librid átkelés mintái; - Mendel I és II törvényei; - A kölcsönhatás típusai

A jelek független örökségének törvénye. A nonallei gének kölcsönhatásának típusai
2. Képzési célok: tudni: - a di- és poligibrid kereszteződés mintái; - III törvény Mendel; - A kölcsönös típusai

Változékonyság, mint az élet tulajdonsága, alakja. Fenotípusos (módosítás vagy nem kezelő) változékonyság. Genotipikus változékonyság
2. Képzési célok: Tudja: - a változékonyság fő formái; - Szerezd meg az ötleteket a penetrációról és az expressziós díjról

A hallgatók önálló munkája a tanár ellenőrzése alatt
Gyakorlati munka, amely meghatározza a változékonyság mértékét és a variációs arányt a környezeti feltételektől függően.

A törzskönyv elemzése
Nem minden genetikai módszer alkalmazható az egyes jelek örökségének elemzésére az emberekben. Azonban a rokonok több generációjának fenotípusainak vizsgálatánál megteremtheti az öröklés jellegét

Genetikai módszer az emberi genetika tanulmányozására
Az iker-módszer lehetővé teszi, hogy megbecsülje a genetikai és a mediális tényezők relatív szerepét egy adott jellemző vagy betegség kialakulásában. Az ikrek monostigitók (egysoros) és a dializálás (idők)

Dermatoglifikus módszer az emberi genetika tanulmányozására
Bőrlécrendszeri elemzés a tanulmány papilláris minták ujjak, a tenyér és a stop. A bőr ezen területeiben nagy dermális mellbimbók és az epidermisz, amely lefedi őket

Cytogenetikai módszer az emberi genetikai vizsgálatban
A személy örökletes patológiájának tanulmányozásának számos módszere között a citogenetikai módszer jelentős helyen alapul. A citogenetikai módszer segítségével az örökletes anyag alapjainak elemzése

A kromoszómális készlet tanulmányozása
Kétféleképpen hajtható végre: 1) egy közvetlen módszer - a metafázis kromoszómák vizsgálata a sejtek elválasztásában, például csontvelő (IP)

Praktikus munka
1. A "Kariotype of Man" bemutató előkészítése a citogenetikai laboratóriumban az X90 növekedésével a látványtervben a leukociták láthatóak

A kariotípus vizsgálata kromoszómális betegségekben szenvedő betegeknél (fényképek szerint)
1. Trisomy a 13 kromoszómán (Pataau-szindróma). Kariotype 47, +13. 2. Trisomy 18 kromoszóma (Edwards-szindróma). Kariotype 47, +18. 3. A 21 kromoszóma (Down-betegség) triszómiája.

Daktiloszkópos elemzés elvégzése
Saját ujjlenyomatok gyártásához a következő berendezés szükséges: fényképészeti henger, egy pohár 20x20 cm2, egy darab habos gumi, tipográfiai festék (vagy hasonló

Karyotípus citogenetikai analízise (metafázislemezek mikrografálja)
1. Rajzoljon metafázislemezt. 2. Számítsa ki a teljes kromoszóma. 3. A kromoszóma csoportok azonosítása (3 pár nagy meticenter kromoszómák), (két nagy pár)

Expressz módszer az X-SEX kromatin vizsgálatára az orális nyálkahártya magjaiban
Mielőtt bevenné a páciens hatókörét, megkérdezik a pormot a fogakkal, az arc és az arc belső felületének nyálkahártyájával. Ez az eljárás szükséges az elpusztított sejtek eltávolításához,

Népesség statisztikai módszer
A lakosság egy faj egyének kombinációja, amely egy területet lakik hosszú ideig, viszonylag izolálva az egyének más csoportjaiból, szabadon átkelve és adva

Biokémiai módszer
A biokémiai módszerek az enzimrendszerek (vagy az enzim aktivitása vagy az enzim által katalizált végső reakciótermékek) vizsgálatán alapulnak. Biochimikus

Molekuláris genetikai módszer
Az összes molekuláris genetikai módszer alapja a DNS-szerkezet vizsgálata. A DNS-analízis szakaszai: 1. A kerneleket tartalmazó sejtek DNS-felszabadulása (vér)

A DNS szintézis polimeráz láncreakciója
Polimeráz láncreakció (PCR) - amplifikáció módszere (reprodukció) in vitro DNS, amellyel néhány órán belül feltárhatja és terjesztheti a 80-as DNS-fragmenst

Nem. P / N Teljes név Genotip Ivanov Aa Petrov AA

A genotípusok és allélok megfigyelt frekvenciái
Genotípusok, allélok Az esetek száma frekvencia (frakciókban) AA 1/5 \u003d 0,2 AA

A genotípusok és az allelek várható frekvenciái
A megfigyelt esetek száma A megfigyelt frekvencia várható frekvenciája AA (P2)

A genotípusok és allélok megfigyelt frekvenciái
Nem. P / n készség, hogy a nyelvet a cső genotípusokba vigye (igen) a__

Technika hal - fluoreszcens in situ hibridizáció, amelyet az 1980-as évek közepén fejlesztettek ki, és felismeri a kromoszómákon lévő specifikus DNS-szekvenciák jelenlétét vagy hiányát, valamint a 6, CEP6 kromoszóma közepén található DNS-alfa-műholdat (6p11.1 -Q11. Egy).

Ez jelentős változást adott a diagnózisban onkológiai betegségek A melanocitikus gének a tumor antigének kimutatásával kapcsolatban jelentkeztek. A malignus háttérrel szemben a mutáció három antigénben van meghatározva: CDK2NA (9P21), CDK4 (12Q14) és CMM1 (1P). E tekintetben nagy jelentőséggel bír az objektív differenciáldiagnózis lehetősége a melanocita bőr daganata genetikai jellemzői alapján korai diagnózis Melanómák és elődei. A rendszermagban normál vizsgált génekkel és a 6 kromoszómával rendelkezik, két rreb1 gén van festve piros, két myb gén festett sárga, két CCND1 gén, elszigetelt zöld színű, és két kromoszóma centrers 6 kék. A diagnosztikai céllal fluoreszkáló mintákat használnak.

A reakció eredményeinek értékelése: A piros, a sárga, a zöld és kék jelek számát az egyes minták 30 magjában számolják ki, a genetikai rendellenességek különböző variánsainak négy paraméterét kimutatják, amelyben a minta genetikailag megfelel a melanomának. Például a minta megfelel a melanomának, ha a CCND1 gén átlagos mennyisége a kernel ≥2.5. Ezen elv szerint más gének másolatát értékelik. A gyógyszert halak pozitívnak kell tekinteni, ha a négy feltétel közül legalább az egyiket elvégzik. Azok a minták, amelyekben a négy paraméter a határértékek alatt van, hal-negatívnak tekintik.

A kromoszómákon végzett konkrét DNS-szekvenciák meghatározását a bioptatok vagy a működési anyagok szakaszaiban végzik. A gyakorlati végrehajtás során a hal reakció a következő: a melanocita nuklei DNS-t tartalmazó vizsgálatot tartalmazó anyagot a molekulák részleges megsemmisítéséhez kell alávetni a kétláncú szerkezet megszakítása érdekében, és ezáltal megkönnyítik a hozzáférést a gén. A mintákat a DNS-molekulához való csatlakozás helyére osztályozzák. A klinikai gyakorlatban a hal reakció anyaga a szövetek, a stroke és a nyomatok paraffin szakaszai.

A hal reakció lehetővé teszi, hogy a DNS-molekulában bekövetkezett változásokat a gén másolatainak számának növekedése, a súlycsökkenés, a kromoszómák számának változásai és a kromoszómák száma - a géntartalmak mozgása mindkettőben kromoszóma és a két kromoszómák között.

A kapott adatok feldolgozása során a hal reakció, és vizsgálja meg a három vizsgálat gének másolatának függését, a spirális korrelációs együtthatóját használják.

A melanoma esetében a másolás növekedését a Neva és a Dysplic Neva-hoz képest jellemzi.

Egy egyszerű Nevus a dysplasci Neva-hoz képest kevesebb megsértése van a másolásban (azaz több normál példányban).

A döntő szabályok megteremtése annak megjósolása érdekében, hogy a minta egy vagy egy másik osztályba tartozik-e (az egyszerű és diszplasztikus nem felfedezés differenciáldiagnózisa), a matematikai berendezést "döntési fák) használják. Ez a megközelítés A gyakorlatban jól megalapozott, és a meghatározott módszer alkalmazásának eredményei (ellentétben sok más módszerrel ellentétben, például a neurális hálózatokkal szemben) egyértelműen értelmezhetők az egyszerű, diszplasztikus Nevids és Melanoma differenciálódására vonatkozó döntő szabályok megteremtésére. A forrásadatok minden esetben négy gén másolatai voltak.

A differenciáldiagnosztika meghatározó szabályának felépítésének feladata több szakaszra oszlik. Az első szakaszban a melanoma és a nem-neust differenciálódnak, anélkül, hogy figyelembe veszik a Nevus típusát. A következő szakaszban döntő szabályt építenek az egyszerű és diszplasztikus Nevids elválasztására. Végül, az utolsó szakaszban lehetőség van egy "megoldások" létrehozására, hogy meghatározzák a diszplasztikus Nevus diszplázia mértékét.

Hasonló elválasztás A nem eltávolítás nem-előrejelzések osztályozásának feladata, lehetővé teszi a magas előrejelzési pontosság elérését az egyes lépéseken. A "Wood Solutions" épület bemeneti adatai a melanoma diagnosztizálásával rendelkező betegek és a nem melanoma diagnosztizálásában szenvedő betegek (különböző Nevus-típusú betegek - egyszerű és diszplasztikus betegek). Minden beteg esetében 30 sejtes gének másolatai vannak.

Így a diagnózis előrejelzésének problémája több lépésbe való szétválasztása lehetővé teszi a nagy pontosságú döntő szabályok kiépítését, nem csak a melanoma és a nemululák közötti differenciálódáshoz, hanem a diszplázia mértékének nem nyilvánosságra hozatalának és előrejelzésének meghatározására is A diszplasztikus Nevus. A "Solutions fák" vizuális módja annak, hogy megjósolhassák a diagnózist a gének másolatairól szóló információkról, és könnyen alkalmazhatók a jóindulatú, az olvasható és rosszindulatú melanocytás bőr neoplazsinak differenciálódásában klinikai gyakorlatban. Felajánlott további módszer Különösen fontos a differenciáldiagnózis, ha elpusztult gigantikus veleszületett pigment, nem-felelősség kizárása és diszplasztikus Nevids betegeknél gyermekkorMert a betegek esetében egészségügyi intézmények A diagnosztikai hibák nagy aránya van. A leírt módszer használatának eredményei nagyon hatékonyak, célszerű a bőr pigment tumorainak diagnosztizálásában, különösen a famm-sinderben szenvedő betegeknél.

A prenatális diagnosztika invazív módszerei lehetővé teszik, hogy ne csak a jövőbe nézzen, és megbízhatóan megjósolhassa, hogy egy akár nem született csecsemő várhatóan várható-e a fejlődés intrauterin hibáival kapcsolatos betegség, hanem a veleszületett jellegének és okainak megismerése is patológiák.

Azonban az információ csak akkor értékes, ha időszerű. Ha a magzat fejlődésének állapotáról beszélünk, az elemzések eredményeinek elérésének sebessége létfontosságú.

Ezért olyan hal módszer, amely lehetővé teszi az embriót leggyakoribb fejlesztési anomáliák jelenlétének becslését a lehető leghamarabb, nagyon kereslet a genetikai diagnosztikában.

A kromoszómális anomáliák - fluoreszcens in situ hibridizáció - fluoreszcens hibridizáció - fluoreszcens hibridizáció - fluoreszcens hibridizáció - fluoreszcens hibridizáció.

Ez a technika, amelyet a múlt század 70-es évek végén javasoltak, J. Golle és M.-L. Vitorla, amely a nukleinsavfragmensek (DNS vagy RNS) szekvenciájának visszaállításának lehetőségétől függően denaturálva.

A szerzők olyan módszert dolgoztak ki, amely lehetővé teszi, hogy a hibridizáció in situ mesterségesen létrehozott DNS-mintákat (próbákat) és a kromoszómák mennyiségi és kvalitatív eltéréseit lehetővé tegye.

A múlt század végén a fluoreszkáló festékek DNS-próbájának sikeres használata után a hal-módszer megkapta a nevét, és azóta intenzíven javult és változatokat kapott.

A halalapú módszerek modern módszerei arra törekszenek, hogy a maximális teljes információ képes legyen egy hibridizációs eljáráshoz tartozó genetikai anyagot szerezni.

Az a tény, hogy a hibridizáció után csak korlátozott számú azonos citogenetikai anyag kromoszómát becsülhetünk. A DNS-láncok újrahibridálásának képessége egyszerre csökken.

Ezért abban a pillanatban genetikai diagnosztika, az in situ hibridizáció módszert leggyakrabban használt gyorsan válaszoljon a kérdésekre a rendelkezésre álló, a leggyakoribb Aneuploids 21, 13, 18 kromoszómák, valamint a nemi kromoszómák X, Y.

A hal-módszer elemzéséhez minden szövet vagy sejtminta alkalmas.

A prenatális diagnózisban vérminták lehetnek, ejakulátum vagy.

Az eredmények megszerzésének sebességét az a tény biztosítja, hogy az anyagból előállított sejtek az analízishez nem kell táptalajban tenyészteni, a klasszikus módszerrel a karyotipizálás klasszikus módszerével.

A kiválasztott anyag speciális képzést ad, hogy koncentrált tiszta sejtszuszpenziót kapjunk. Ezután a DNS-minták denatronizálásának és a mintában vizsgált minta natív DNS-denatizálásának folyamata egyszálú állapotba és hibridizációs eljárásra történik, amely során színes DNS-próbákat inkubálunk egy minta DNS-vel.

Így a sántőzött (festett) kromoszómák a sejtben láthatóak, a számuk, a genetikai szerkezetek szerkezete stb. Fontolja meg, hogy a ragyogó DNS-láncok lehetővé teszik a speciális fluoreszcens mikroszkóp szemét.

Jelenleg a hal-módszert széles körben használják a diagnosztikai célokra a genetikai betegségek, a kromoszómális rendellenességek azonosítására a reprodukciós gyógyszer, onkológia, hematológia, biológiai dozimetriás stb.

Hogyan alkalmazzák a fetus haldiagnosztikáját?

A reprodukciós gyógyszer területén a hal módszert, mint a molekuláris citogenetikai diagnosztikai technikák egyikét, minden szakaszban használják.

• pár.

A jövőbeli szülők karyotípusainak meghatározásához egyszer elvégezhető, mivel az emberi genom változatlanul az egész életen át.

Karotiping Egy pár, mielőtt elképzelné a gyermeket, segít azonosítani, hogy a szülők az örökölt genetikai patológiák hordozói, beleértve a rejtetteket is. Továbbá általános állam A jövőbeni anyák és apák genomja, amely befolyásolhatja a baba koncepciójának sikerét és a terhességet.

A halászati \u200b\u200bmódszer diagnózisa ebben az esetben gyakran a klasszikus karyotipizálás további vizsgálata, a kromoszómális patológiák kimutatása során a vizsgált anyagban (a vénás vért a szülők), ha van gyanúja a mozaikizmus.

A hales módszerek betétei jelentősen megerősítik vagy megakadályozzák a gyanús anomália jelenlétét a jövőbeli szülő sejtjeiben.

• Kutatás ejakuláció.

A "férfi tényező" reprodukciójával nehézségekbe ütközik. A hal-módszer Spermanalízis lehetővé teszi a spermium kromoszómális készletének anomális szintjének értékelését, valamint annak megállapítását, hogy egy ember a padlóhoz kapcsolódó genetikai betegségek hordozója.

Ha a pár az ECO-val való elképzeléshez továbbra is fennáll, az ejakulatika halelemzésének lehetővé teszi a legmagasabb minőségű spermiumok kiválasztását a tojás megtermékenyítéséhez.

• ECO-val.

Pre-impuláns genetikai diagnosztika (PGD). A szülők kariotípusának vizsgálatainak eredményei szerint meghatározzák az embrióba átvitt kromoszómális, genetikai abrázisokat.

A haldiagnosztika lehetőségeinek köszönhetően az ebből eredő embriók genetikai egészségének vizsgálata órákban végezhető el a méh átadása előtt, hogy biztosítsa a terhesség előfordulását, nyilvánvalóan egészséges krumplit.

Ezenkívül a PGD lehetősége lehetővé teszi az embriók szexualitásának meghatározását, és következésképpen a jövőbeli gyermek nemét, ha szükséges.

• A terhesség ideje alatt.

A prenatális diagnózis: Elemzés a gyümölcs sejtek alkalmazásával kapott biopsziás a chorion gőz, amniocente vagy cordo-beeroicle, a FISH módszerrel, egészségügyi központok általában kínált mellett a klasszikus genetikai vizsgálata magzati sejtek (kariotipizálással).

Ez a módszer elengedhetetlen, ha a leggyakoribb kromoszomális hibák magzatának jelenlétére vonatkozó válasz jelenlétére szükség van: 21, 18, 13 kromoszómák, X és Y kromoszómák, néha aneuploidium (vagy 17) triszómiája , 15, 16 kromoszómák.

A hal módszerének elemzésének előnyei

A hal módszer genetikai analízisének végzése, bár ma továbbra is kiegészítő módszer a kromoszómális patológiák diagnózisára, azonban a magatartás célszerűségét vitathatatlan előnyökkel határozzák meg:

• a vizsgált kromoszómákkal kapcsolatos eredmények megszerzésének mértéke néhány órán belül - legfeljebb 72.

Ez fontos lehet, ha a terhesség sorsa a genetika diagnózisától függ;

• a módszer magas érzékenysége és megbízhatósága A hal-sikeres elemzés elhanyagolható mennyiségű biomáter - elég ugyanazon cella, az eredmények hibája egyszerre, legfeljebb 0,5%.

Ez fontos lehet a kezdeti mintában bekövetkező korlátozott számú sejtben, például rossz osztályukkal.

• a halászati \u200b\u200bmódszer diagnosztizálása bármely terhességi időszakra (a 7. héttől) és bármely biológiai modell szerint: Chorion fragmensek, amniotikus folyadék, gyümölcsvért stb.

Ahol meg tudod csinálni a halászati \u200b\u200bmódszer diagnosztizálását

Moszkvában a fetus kromoszómális eltérések prenatális diagnózisára szolgáló hal módszert alkalmazzák a következő orvosi központokban:

Általános szabályként a klinikák haldiagnosztikai szolgáltatást nyújtanak a magzat teljes körű karyotipizálásának keretében, az invazív interferenciával a felár ellenében. És általában a jövőbeni szülők egyetértenek abban, hogy extra fizetnek, mert a hal módszernek köszönhetően néhány nap múlva megtudhatja a bébi a legfontosabb

A hal-teszt az egyik legmodernebb módszer a kromoszómális készlet elemzéséhez. A "Fish" rövidítés a technika angolul - fluoreszkáló hibridizációjának angol nyelven alakult ki in situ. Ez a teszt lehetővé teszi a nagy pontosságot (beleértve a speciális géneket és szegmenseiket) a sejt genetikai anyagainak vizsgálatához.

Ezt a módszert használják egyes típusú rákos daganatok diagnosztizálására, mivel a sejt rosszindulatú újjászületése a genom változásai miatt következik be. Ennek megfelelően a gének jellegzetes rendellenességeinek megkeresése, ez a sejt nagy pontossággal rendelkezik a rákra. Ezenkívül a hal-teszt a már meghatározott diagnózis megerősítésére is vonatkozik, valamint további adatokat szerezhet a specifikus kemoterápiás termékek felhasználásának lehetőségéről a kemoterápiás eljárások elvégzéséhez az emlőrákra és a betegség előrejelzésére.

A hales teszt használatának jó példája szolgálhat a betegeknél rákos daganat Mell. Ennek a szöveti technikának a segítségével, amelyet a biopszia során kaptunk, a Gene nevű gén másolatára vizsgálták. Ha ez a gén jelen van, akkor ez azt jelenti, hogy nagyszámú her2 receptor található a sejtfelszínen. Érzékenyek a tumorelemek fejlesztésére és reprodukálására ösztönző jelekre. Ebben az esetben megnyitja a trastuzumab hatásos felhasználását - ez a gyógyszer blokkolja a HER2 receptorok aktivitását, ami azt jelenti, hogy a tumor növekedése gátolható.

Hogyan történik a hal teszt?

A betegből nyert biomoldali felmérés során a fluoreszkáló címkéket tartalmazó speciális festéket vezetjük be. Kémiai szerkezete olyan, hogy kizárólag a cella kromoszómális készletének egyértelműen meghatározott területeivel köthetők. Ezt követően a festett szövetmintát fluoreszkáló mikroszkóp alá helyezzük. Ha a kutató észleli a kromoszómákkal ellátott kromoszómákkal, akkor ez egy olyan eltérések mutatója, amelyek az onkológiai típusú genomban bekövetkezett változások jelenlétét jelzik.

Ezek a kromoszómák szerkezetének eltérései több faj:
transzlokáció - a kromoszómális anyag egy része egy új pozícióba ugyanazon vagy más kromoszóma;
Inverzió - az 1800-as kromoszóma fordulója a fő testétől való elválasztás nélkül;
törlés - bármely kromoszómális szakasz elvesztése;
A duplikáció a kromoszóma rész egy példánya, amely a sejtben lévő gén másolatának számának növekedését eredményezi.

Mindegyik ilyen megsértése bizonyos diagnosztikai jeleket és információkat hordoz. Például a transzlokációk jelezhetik a leukémia, a limfóma vagy a SARCOM jelenlétét, és a génszűrések jelenléte segít a legtöbbet hozzárendelni hatékony terápia.

Mi a hal teszt előnye?

A sejtek sejtjeinek hagyományos elemzésével összehasonlítva a halvizsgálatnak sokkal nagyobb érzékenysége van. Lehetővé teszi, hogy azonosítsa a genom legkisebb változásait is, amelyek más módon nem észlelhetők.

A halgyártás másik előnye, hogy a közelmúltban beérkezett anyagon használható. A standard citogenetikai analízis esetében elő kell termeszteni a sejtkultúrát, vagyis a betegsejtek laboratóriumi körülmények között történő megszorítását. Ez a folyamat körülbelül 2 hétig tart, és egy másik hét normális vizsgálatot végez, míg a halvizsgálat eredményét csak néhány nap alatt kapja meg.

Folyamatos fejlődés orvostudomány Fokozatosan a halgyártás olcsóbbá válik, és egyre szélesebb körű belépést jelent az onkológusok napi gyakorlatába.

Facebook.

Twitter.

Kapcsolatban áll

Odnoklassniki.

Google+