Laboratóriumi módszerek az AIDS diagnosztizálására. A HIV diagnosztizálása: kutatási módszerek, határidők a HIV-fertőzés diagnózisának elemzéséhez

Fertőzés "humán immunhiányos vírus - Hev, képviseli vírusos betegség. Fokozatosan megsemmisíti bizonyos leukocitákat, és megszerzett immunhiányos szindrómát - AIDS-t.

Az emberi immunhiányos vírus (HIV) a retrovírusok típusára utal.

  • Mi a retrovírus?
  • A HIV laboratóriumi diagnózisa
    • Tünetmentes fázis
    • Az AIDS kezdete szakasza
  • HIV diagnosztikai módszerek
  • PCR (polimeráz reakció)
  • Expressz tesztelés
  • Dátumok és árdiagnosztika HIV

Mi a retrovírus?

A genomiális DNS és a genetikai információt nemcsak DNS-ként tárolja (a legtöbb organizmus csak DNS-t használ), hanem RNS-ként (ribonukleinsav) is.

Ma szokásos megosztani a következő HIV-fertőzéseket:

  • szexuális érintkezés védőfelszerelés nélkül
  • a fertőzés perinatális útja (a gyermekeknél megfigyelt)
  • a hemotranszfúzió során (vér transzfúzió)
  • a fertőzött fecskendők (gyakrabban injektálható drogfüggők) használata esetén

Amikor a HIV az emberi sejtekbe behatol, ribonukleinsavat ad ki, és replikálja a DNS-t a HIV RNS-ről a Reverse transzkriptáz nevű enzimmel.

A kapott DNS-t a fertőzött sejtek DNS-ben tartalmazza. Ez a folyamat inverz, mivel az emberi sejtek részt vesznek az RNS és a DNS replikációjának.

Más RNS vírusok (fertőzések), mint például a poliivírus, az influenza vírus, a kanyaró vírus, a retrovírussal ellentétben nem termel DNS-replikációt a cellába való behatolás után. Ezek a vírusok ribonukleinsavforrás RNS-t termelnek.

A HIV-fertőzött sejtekben minden egyes cellás sejttartomány történik, az integrált HIV DNS-je is replikálódik a sejt saját DNS mellett.

A HIV DNS-replikáció az alábbi állapotok egyikében van:

  • Inaktív (rejtett) állapot: A vírus létezik, de nincs hátrányos hatása az emberi testre
  • Aktiválási állapot: A vírus uralja a fertőzött sejtek funkcióját, nagyszámú új HIV-replikációt termel, amelyek befolyásolják a test más sejtjeit, amelyek a tartós megszerzett immunhiány állapotát provokálják

A terápiás hatás fontos aspektusa továbbra is a betegség pontos és időszerű diagnosztizálása marad.

A HIV-betegségek első laboratóriumi tanulmányait több mint harmincöt évvel ezelőtt hajtották végre.

A modern diagnózis magában foglalja az immunológiai, hematológiai és molekuláris módszerek alkalmazását vírus kórokozó kimutatására. A múlt században használt teszt-rendszerek kellően korlátozott képességekkel rendelkeztek, és meghatározták az első típusú retrovírust.

Őket műszaki képességek nem ment túl az immunglobulin G. definíciójával.

Mint a laboratóriumi diagnosztika és a kutatási technikák javítása lehetőséget biztosít mindkét típusú vírus felismerésére.
A harmadik generációs vizsgálati rendszerek megjelenése jelentősen bővítette a diagnosztikai képességeket.

Most az 1-2 típusú vírusérzékelés néhány héttel a fertőzés után lehetséges. Ilyen modern diagnózis Lehetővé teszi az antiretrovirális kezelés gyors kinevezését.

Több tízszer csökkenti a vírus - AIDS súlyosabb szakaszának kialakulásának kockázatát. A legfrissebb találmányok közé tartozik a 4 generációs tesztrendszer. Ezek kombinált kutatási módszerek.

A rendszert az antitestek kimutatására használják az antigén P24 antigén (fehérjefalának a retrovírus-éter fehérje falának). A 4 generációs vizsgálati rendszerek ilyen képességei csökkentik a "szerológiai ablak" idejét legalább hetente. (Ez egy olyan időszak, amely a szervezetben a testben van az antitestek megjelenése nélkül).

A HIV laboratóriumi diagnózisa

A laboratóriumi vizsgálatok lebonyolítása a HIV-betegség diagnosztizálásának főbb aspektusa és a megfelelő terápia kinevezése. Ezenkívül a diagnózis figyeli a beteg kezelési és egészségi állapotának minőségét.

A rendszeres laboratóriumi tesztelés lehetővé teszi:

  • ellenőrizze a fertőző folyamat menetét
  • Állítsa be a terápiás rendszert
  • monitor mellékhatások a gyógyszer bevételétől

A szabványos HIV analízis a beteg vérvizsgálatát jelenti.

A fő biológiai anyag a vénás vér, amelynek kerítése reggel, evés előtt történik.
Előzetes, különleges készítmény a betegből nem szükséges.

A fő előkészítés néhány nap alatt az alkoholfogadás kiküszöbölése. Ha lehetséges, megállítja az antibiotikumok és a vírusellenes szerek vételét 5-7 nappal az elemzés előtt.

Klinikai és immunológiai vizsgálatot végezhetünk az állami poliklinikában. De ebben az esetben az orvos vagy a családi orvos iránya szükséges.

Ma, a diagnózis a HIV, AIDS és STD-k független laboratóriumban központok inkább gyakorolják, ahol lehetőség van, hogy adja át egy névtelenül elemzést.

A diagnózis során a páciens egy speciális számot ad ki, amelyet csak az ő és az intézmény munkatársai ismertek. Ebben az esetben azonban van egy bizonyos mínusz.

A vizsgálati eredmények nem kerülnek át a klinikára a páciens későbbi kórházi kezeléséhez. Nem rendelkeznek nőgyógyászral / gynecológussal / fertőző háttérrel, nem lehet felsorolni a fertőző patológiák (fegyverek) nyilvántartásában.

A betegség klinikája: Hogyan jelenik meg Retrovírus

A HIV-betegség továbbításának fő módja:

  • szexuális kapcsolat
  • anyától a gyermekig (transzfésztáros, a generikus ösvényen keresztül, az anyatej)
  • a vérátömlesztési eljárás során szervátültetés
  • intravénás gyógyszerek bevezetésekor, nem steril fecskendő

Más szóval, mindaddig, amíg nincs kapcsolat a vérrel vagy a testfolyadékkal, a HIV-fertőzés valószínűsége a mindennapi életben szinte nulla.

A szekréciós folyadékban található vírus mennyisége, mint például a nyál vagy könnyek, nagyon kicsi. Még akkor is, ha a vírus ezekben a kibocsátásban van, még nem jelentették be a fertőzésről egy megosztott fürdő vagy törölköző használatakor.

A HIV egy "törékeny" vírus, amelyet inaktiválunk, amint a testet külső környezetbe találja. A patológiai folyamat klinikai megnyilvánulása a fertőzés szakaszától függ.

A fertőzés kezdete (akut fázis)

A fertőzés első megnyilvánulása a fertőzés után 2-3 héttel figyelhető meg.

Ebben az időszakban a HIV tünetei: láz, torokfájás, izomfájdalom, kiütés, lymphadenopathia, fejfájás, fáradtság stb. Az influenza vagy angina tünetei jelennek meg (általában monocita típusú).

A betegség korai jelei több napig vagy annál hosszabb ideig kísérhetik a beteget, sok esetben spontán eltűnnek.
A betegség diagnosztizálása ebben az időszakban a beteg számára nyereségesnek tekinthető. Antiretrovirális kezelés kezdeti szakasz A fertőzés a leginkább pozitív eredményeket mutatja.

Fontos! A szexuális eszközökkel (szifilisz, gonorrhoea, HPV, Chlamydia stb.) Bármely fertőzésben szenvedő betegek igényelhetők, a HIV-analízis beállítása ajánlott. Retrovírusban szenvedő betegeknél az STD párhuzamos áramlását gyakran észlelték.

Tünetmentes fázis

A vérvírus mennyisége, amely az immunválasz (a CTL indukciója vagy az antitestek előállítása) miatt elérte a fertőzés után, 6-8 hónap után bizonyos szintre csökken, és megszerzi az aszimptomatikus áramlás fázisát . Ez a fázis több évig tarthat.

Ezután váltotta fel az exacerbációs periódusokat: az influenza tünetek, a rossz közérzet, a nyirokcsomók növelése. Ebben az időszakban a betegnek mindkettő sebezhető másoknak fertőző patológiák: STD, hepatitis, herpesz, tuberkulózis.

Az AIDS kezdete szakasza

A fertőzés utáni HIV-os terápia nélkül a fertőzés előrehaladása és a CD4-pozitív T-sejtek gyorsan csökkennek. Ha a CD4-limfociták száma 200 / mm 3 vagy kevesebb, opportunista fertőző betegségek, például tüdőgyulladás, tuberkulózis, 90% -os valószínűséggel fejlődik ki.

Ezen túlmenően, ha a szám a CD4 limfocitaszám alatt van 50 / mm 3 - nagy esélye, hogy a fejlődése citomegalovírus fertőzés, atipikus mycobacteriosis (93% -ában), primer Lymph CNS, rosszindulatú képződmények. A betegeknél az étvágytalanság csökkenése, a testsúly elvesztése az anorexiaig, a hasmenés, a gyengeség és hasonlók dominanciájával való folyamatos megzavarás.

Etiológia, patogenezis, epidemiológia: az RNS-tartalmú kórokozó családokból származó HIV-vírus, a sejtek befolyásolják immunrendszer, provokálja az AIDS fejlesztését, az opportunista fertőzéseket, az onkológiát. A 2011-es statisztikák szerint 62 millió HIV-t szenvednek be a világban.

Míg a páciens antiretrovirális terápiára helyezkedik el, nagymértékben elnyomhatja a vírus terhelését.
De sajnos, lehetetlen teljesen kiküszöbölni a vírust a testből. Ezért rendkívül fontos, hogy a lehető leghamarabb diagnosztizálják a betegséget, és megkezdjük a megfelelő kezelést.

HIV diagnosztikai módszerek

A HIV-fertőzés azonosítására szolgáló diagnosztikai intézkedések közé tartoznak két szakasz:

  • a fertőzés tényének kimutatása (a testben lévő retrovírus jelenléte)
  • a folyamat szakaszának meghatározása (mindaddig, amíg a fertőzés megtörtént, és mennyire befolyásolta az immunrendszer sejtjeit)

A diagnosztikai eredmények lehetővé teszik a terápiás taktikák döntését, és megjósolhatja a betegség további menetét.

A fertőző, vírusos és bakteriális patológiák azonosítására különböző szerológiai technikák léteznek. A HIV diagnosztizálásakor a következő szerológiai elemzéseket alkalmazzuk.

Elisa (immunferendeléselemzés)

A leggyakrabban kinevezett elemzés, ha szükséges, hogy megerősítse / megcáfolja a retrovírus jelenlétét a szervezetben.

Az elemzés a vírus elleni antitestek meghatározásán alapul, amelyek az emberi testben lévő kórokozó alatt vannak kialakítva. A diagnosztikai módszer informativitása eléri a 96% -ot.

Ha azonban a vizsgálatot az antitestek távollétének szakaszában végzik, hamis pozitív eredményt kaphat. Ebben az esetben az IFA újbóli vizsgálata 2-3 hónapig van hozzárendelve.
De sokkal jobban megfeleljen a PCR-elemzés elvégzéséhez, amely képes a fertőzés azonosítására korai időzítés.

A hamis pozitív eredményt is kaphat egy beteg jelenlétében:

  • az autoimmun karakterek patológiái
  • a krónikus formában előforduló fertőzések
  • onkológiai típusú betegségek

Másképp, ez az eredmény Korai terhességi feltételek jelenlétében lehet beszerezni.

Immun blot (Western blot)

Az elemzés sajátossága célja a HIV-fertőzés fehérjéinek azonosítása.

Általános szabályként a diagnózist megerősítő tesztként végzik. Pozitív eredmény esetén lehetővé teszi az "humán immunhiány vírus" végső diagnózisa elhelyezését.

Standard immunoblotting kérdések három lehetőség: pozitív, negatív, kétséges. Az első két esetben a dekódolás egyszerű - HIV hiányzik / jelen.

A kétes lehetőség, mint általában a HIV jelenlétét jelenti a testben. De a fertőzés nem több, mint három hónappal ezelőtt, amikor a testnek nincs ideje az antitestek teljes spektrumának fejlesztésére.

A kétes eredmény megszerzése is különös a tuberkulózisú betegek, malignus patológiák, amelyek több vérátömlesztési manipulációt adtak át.

PCR (polimeráz reakció)

A módszer lényege a vírus és az RNS DNS meghatározása. Ez a kórokozó észlelésének leginkább informatív és pontos útja.

Megmutathatja a HIV-t a korai fertőzésben, még a retrovírus elleni antitestek kialakulása előtt is. A PCR érzékenysége 99%, szinte lehetetlen hamis eredményt kapni.

A polimeráz reakciót a páciensnek a céllal írjuk elő:

  • adja meg a HIV vírus jelenlétét vagy hiányát az emberi testben a más laboratóriumi vizsgálatok során megkérdőjelezhető eredményekben
  • retrovírus típusú azonosítás (HIV-1, HIV-2), valamint a vírus által kiváltott test terhelésének kialakítása
  • a születésű gyermek állapotának megállapítása egy betegséggel rendelkező anya
  • a patogén azonosítása a vérben, amelyet a transzfúzára használnak

A PCR a legpontosabb elemzés, amely 7-10 nappal a test belépése után feltárhatja a retrovírust.
Ebben az esetben az eredmény pontossága ebben az időszakban 98-99% lesz.

Azonban a PCR-nek néhány funkciója többször is rendelhető. A nagy érzékenység miatt az elemzés nemcsak a retrovírushoz reagálhat. De a leginkább kisebb fertőző folyamatoka testben előfordul. Ezért a polimeráz reakció egyszeri lejátszásának végső diagnózisa nem helyezkedik el.

A PCR következő funkciója a modern és drága felszerelés szükségessége. Ezért az elemzést nem végzik el az állami klinikákban. A modern laboratóriumok vizsgálatát elvégzik, ahol az elemzés költsége 1000 rubelből indulhat.

Expressz tesztelés

Sürgősségi helyzetekben, amikor a műtét sürgősen szükséges.

A kutatáshoz tartozó biológiai anyag vizelet. Az expressz teszt egyes szakemberek szerint 96% -os pontossággal rendelkezik, de mindazonáltal további tesztelés. A kapott eredmények alapján ez a tanulmányA diagnózis nem történik.

A kötelező esetben az IFA végrehajtása vagy PCR.

Dátumok és árdiagnosztika HIV

Mennyi időre készülhet-e kész elemzést?

Az elemzés eredményeire vonatkozó laboratóriumi központ válasza több nappal később, az intézmény munkaterhelésétől függően.

Sok központban is van egy további szolgáltatás "sürgős tesztelés", amely lehetővé teszi, hogy az eredmény néhány óra múlva megkapja az eredményt.

Az árpolitikát illetően a költségek a választott laboratóriumtól és a kutatási módszertantól függenek.
Tehát a költségek 500 rubelből indulhatnak, és elérhetik a 10.000-15 000-et.

A Western Blot ára 2500 rubelből indul, és elérheti a 3000-4000-et. Kaphat egy kész eredményt 2-5 napig.

Ha valós idejű PCR-t tartanak mindkét típusú retrovírus, valamint az RNS és a DNS meghatározásával, a költségek elérhetik az 5000 rubelt és magasabbra. A diagnózis időtartama 5-10 napig.

Az Orosz Föderáció szerint a kormányzati szervekben végzett immunológiai vizsgálatok ingyenesek. A HIV-elemzés kötelező a terhesség alatti betegeknek, a betegek preoperatív periódusban, a szervek adományozói vagy a szövet részei.

/ 16
Legrosszabb Legjobb

A HIV-fertőzésre vonatkozó felmérés:

2. A gyanúval vagy megerősített diagnózissal rendelkező személyek: 13 évesnél fiatalabb gyermekek bakteriális fertőzése, többszörös és ismétlődő; A nyelőcső, a légcső, a bronchi vagy a tüdő jelölése; Cervical invazív rák; terjesztett vagy kitermelő kokcidomycosis; extrapulikus cryptoxococcosis; Cryptosporidiosis hasmenéssel 1 hónapig; Cytomegalovírus más szervek, kivéve a májat, a lépt, a nyirokcsomóakat, 1 hónapnál régebbi betegeknél; cytomegalovírus retinitis látás elvesztésével; Herpetikus fertőzés, amely több, többfokozatú fekélyeket okozott, amelyek 1 hónapra vagy hörghurutra, tüdőgyulladásra, nyelőcsőre vonatkoznak; hystoplazmosis terjesztett vagy extrapilence; Isospace hasmenésnél 1 hónap alatt; Tuberkulózis gyakori vagy extrapulmonáris; tüdő tuberkulózis a 13 évesnél idősebb felnőtteknél vagy serdülőknél; tuberkulózis extrapulikus; Mycobacteriums által okozott egyéb betegség, kivéve az M. tuberkulózist terjesztett vagy extrapulosy; pneumonia által okozott pneumatikusok; progresszív multifoxi leuoentefalopátia; Salmonellus (kivéve a Salmonella Typhi) a septikémia ismétlődő; Toxoylase Mosa agy az 1 hónapnál régebbi gyermekeknél; Caposhi Sarcoma; 13 évesnél fiatalabb gyermekeknél a limfoid interstitialis tüdőgyulladás; Berkitta limfóma; Immunoblasztikus limfóma; Elsődleges agy limfóma; Kimerült szindróma, hepatitis B, HBsAg kocsi; fertőző mononukleózis; ismétlődő menedékhely herpesz a 60 feletti személyeken; szexuális úton terjedő betegségek.

Egy magasan szakosodott laboratóriumban végezzük el:

a) a vérben, antigénben és immun komplexekben keringő antitestek meghatározása; a vírus termesztése, genomiális anyag és enzimek kimutatása;

b) A celluláris immunrendszer funkcióinak értékelése. A fő szerep a szerológiai diagnosztika módszereihez tartozik, amelyek az antitestek meghatározására irányulnak, valamint a test vér és más biológiai folyadékainak kórokozói antigének.

A HIV-hez való antitestek vizsgálata az alábbiak szerint történik:

a) a hemotranszfusz és transzplantáció biztonsága;

b) Felügyelet, tesztelés a HIV-fertőzés meghaladása és az egyes lakosság gyakorlása dinamikájának vizsgálata;

c) A HIV-fertőzés diagnosztizálása, azaz a vérszérum önkéntes vizsgálata gyakorlatilag egészséges emberek vagy különböző klinikai tünetek és tünetek, amelyek hasonló a HIV-fertőzéshez vagy az AIDS-hez hasonlóan.

A HIV-fertőzés laboratóriumi diagnosztikájának rendszere háromlépcsős elv szerint épül fel. Az első szakasz szűrés, amelynek célja az elsődleges vérvizsgálatok elvégzése az antitestek HIV-fehérjéhez való jelenlétére. A referencia második szakasza - lehetővé teszi a speciális módszertani technikák használatát a szűrési szakaszban kapott elsődleges pozitív eredményt. A harmadik Ethan szakértő, amelyet a Laboratóriumi diagnosztika korábbi szakaszaiban azonosított HIV-jelölők jelenlétének és specifitásának végső ellenőrzésére szántak. A laboratóriumi diagnosztika számos szakaszának szükségessége elsősorban a gazdasági megfontolásoknak felel meg.

A gyakorlatban több tesztet használnak, amely elegendő mértékű pontossággal rendelkezik a HIV-fertőzött emberek azonosítására:

Elisa (Elisa) -Tecte (szilárd fázisú immunoassay analízis), amely az első szintet észleli, nagy érzékenység jellemzi, bár a következőkben kevesebb specifikusság;

Immunrendszer (Western-blot), nagyon specifikus és leginkább használt teszt, amely lehetővé teszi a HIV-1 és a HIV-2 differenciálódását;

Antigenemia P25-teszt hatásos kezdeti szakaszok fertőzés;

Polimeráz láncreakció (PCR).

A vérminták tömeges szűrése esetén ajánlott vizsgálni a szérumkeverékeket a vizsgált csoportból, amely ilyen számítással rendelkezik, így az egyes minták végső hígítása nem haladja meg az 1: 100 értéket. Ha a szérum keveréke pozitív, akkor a pozitív keverék minden egyes szérumának vizsgálatát elvégezzük. Ez a módszer nem vezet az érzékenységvesztéshez mind az ELISA-ban, mind az immunoblotban, de csökkenti a munkaerőköltségeket és az elsődleges felmérések költségeit 60-80% -kal.

A HIV-fertőzés elsődleges serodiagnózisában a teljes antitestet szűrő kvalifikációs tesztekkel - IFA és agglutination reakciók segítségével határozzák meg. A második (arbitral) szakaszban egy bonyolultabb vizsgálati - immunoblotot használ, amely nemcsak a kezdeti következtetést megerősíti vagy elutasítja, hanem ezt az antitestek definíciójának szintjén az egyes vírusfehérjékre vonatkozóan.

Kapcsolódó immunszorbent vizsgálat (IFA) a fő és legelterjedtebb módszer a HIV elleni antitestek meghatározására. De az ELISA használatának hátrányait a HIV-fertőzés Serodiagnózisában gyakori hamis pozitív eredményeket kell tulajdonítani. E tekintetben az ELISA eredménye nem alapul szolgál a megkérdezett HIV-szeropozíciós életre vonatkozó következtetéshez. Ez annak köszönhető, hogy az immunoszorbensnek az előtéti fehérjékből származó elégtelen tisztításának köszönhető; Spontán kötődés a szérum antitestek műanyaggal, ha az immunoszorbens által elfoglalt parcellákat nem eléggé blokkolja, vagy egy nagyon különleges semleges fehérje blokkolja; a különböző fehérjék immunszotorbens HIV-fehérjével való kölcsönhatás, amely a szklerózis, az SLE, a tuberkulózis típusának bizonyos, gyakrabban autoimmun patológiás eljárásaival rendelkezik. gyakori adományozással, fertőző és rák, égési, terhesség, ismétlődő hemotranszphus, szervek, szövetek, szövetek, valamint hemodialízisek átültetése; a vérben lévő reumatoid tényező jelenlétével, gyakran HIV-hamis-pozitív reakciókat provokálnak; A vérben vizsgált HIV-fehérjéhez tartozó antitestek jelenléte és elsősorban a P24 fehérjéhez (nyilvánvalóan az antitestek exo vagy endogén nem azonosított retrovírushoz képest alakulnak ki. Mivel az anti-P24-et kötelező a HIV-szerokonverzió korai szakaszában, a HIV GAG fehérjékkel szembeni antitestekkel ellátott személyek további immunológiai ellenőrzése, valamint az adományozásból való eltávolítás.

Az immunszféra analízis érzékenysége és specifikussága folyamatosan növekszik. Ennek eredményeképpen a negyedik generációs IFA nem rosszabb az immunrendszer diagnosztikai képességeikben, és nem csak a szűrésen, hanem a HIV-fertőzés diagnosztizálásának megerősítési szakaszában is felhasználható [Soltakya T., 1997].

Immunoblotting Ez a szerológiai diagnosztika végső módszere, amely lehetővé teszi a végső következtetést a felmérés HIV-pozitivitásáról vagy negativitásáról.

Nyilvánvaló összefüggés van a szérum vizsgálata az immunoblot és az ELISA-ban - kétszer pozitív az ELISA-ban, a szérum különböző vizsgálati rendszerei 97-98% -ában az Immunoblotty HIV pozitív. Ha a szérum csak az IFA-ban pozitívnak bizonyult, csak a két használt vizsgálati rendszer egyikében, akkor azokat az immunoblot pozitívak az esetek 4% -ában. Az esetek 5% -ában, az IFA-Immunoblot által végzett kutatások megerősítésénél, az IFA-immunoblot "meghatározatlan" eredményeket adhat, és közülük az esetek körülbelül 20% -át "meghatározatlan" eredmények okozzák az antitesteket a HIV-1 gag fehérjéhez (P55, P25, P18). Az antitestek jelenléte csak a GAG fehérjéhez, a HIV-1 egy oka annak, hogy további vizsgálat A vér szérum a HIV-2 fertőzésére.

Az immunoblotási eredmények értékelése szigorúan a vizsgálati rendszerhez csatolt utasításoknak megfelelően történik. Az eredmények értelmezésére vonatkozó utasítások hiányában a kritériumokat kell használni.

A HIV-fertőzés Laboratóriumi diagnosztizálásának és a vizsgálatnak az immunblotta módszerével történő pozitív kutatási eredmények megszerzésénél pozitív kutatási eredményeket kapunk, amely az első felmérés után kötelező újbóli szakértői diagnózist végeznek.

Ha az első vizsgálati vizsgálat után 12 hónappal az immunoblottálás eredményei negatívak vagy bizonytalanok maradnak, akkor a kockázati tényezők hiányában, klinikai tünetek Vagy a HIV-fertőzéssel kapcsolatos egyéb tényezők eltávolítására alkalmasak a szennyezett megfigyelésből.

A bizonytalan immunbot eredmények esetében a szakértői diagnosztika során használt szerológiai módszerek között Radioimmunprecipitáció (NYUGODJ BÉKÉBEN). A radioaktív jóddal ellátott vírusfehérjék használatán alapul, és a kicsapódások béta számlálók alkalmazásával kimutathatók. A módszer hátrányai a berendezések magas költségeit, a speciális helyiségek e céljainak felszerelését igénylik.

A HIV-fertőzéssel diagnosztizált személyek állandó dinamikus megfigyelésnek vannak kitéve 6 hónaponként kötelező laboratóriumi felméréssel.

A polimeráz láncreakció (PCR) is felfedi a korábban szorozva nukleotidszekvenciák, specifikus genom ezen kórokozó. A gén vagy fragmense izolált szorzása, amplifikáció, PCR lehetővé teszi a csőben a hő stabil DNS-polimeráz enzimmel. 2-3 órán keresztül a PCR lehetővé teszi, hogy több millió példányt kapjon a vírus meghatározott szegmensének. Amikor a Cell RNS-ről származó HIV-fertőzést, beleértve a vírus RNS-t is, ha egy sejtben reprodukáljuk, vagy integráltuk a genomba, fordított transzkripcióval és hibridizációval jelzett oligonukleotid "próbákkal", elegendő mennyiségű shisklusive DNS-t kapunk, amelyet kimutatunk és a HIV génhez való tartozás tekintetében kvantitatív módon, radioaktív vagy más szonda címkén, a DNS-homológiát és a vírusspecifikus aminosavszekvenciákat hozva. A PCR érzékenysége a vírusgének kimutatása ötezer sejtben.

PCR, beleértve a kvantitatív, csak a plazma vírus terhelésének meghatározásához használható a kezdet elején orvosi kezelés Beteg vagy eltolódás antiretroviral gyógyszerkészítmények. A PCR nem ajánlott a HIV-fertőzés diagnosztizálására, mivel még a készítmény és reagensek leginkább ultra-modern módszerei lehetővé teszik, hogy legalább egy bizonyos szinten - 50 példányt / ml-et meghatározzák a vírus terhelésének meghatározására. És a PCR-termelés összetettsége és magas költsége (kb. 200 dollár) csökkenti nagyszabású felhasználását a HIV-fertőzés mindennapi laboratóriumi diagnózisának módszereként. Így a PCR továbbra is elengedhetetlen marad csak a plazma vírus terhelésének becsléséhez a HIV-fertőzés már meghatározott diagnosztizálásában szenvedő betegeknél a betegterápia problémájának megoldása érdekében.

Vázlatosan a HIV-fertőzés laboratóriumi diagnosztikájának szakaszait mutatják be. egy.

Ábra. 1. A HIV-fertőzés laboratóriumi diagnosztikájának szakaszai

A HIV-fertőzés során a "sötét laboratóriumi ablak" időszak alatt van, ha a HIV antitestek száma nem elegendő a vizsgálati rendszerek érzékenységéhez. Ez az időszak egy héttől három hónapig változik a HIV fertőzésének pillanatától a vizsgálati rendszer érzékenységi szintjétől függően. Ezzel a jelenséggel nehézségek merülnek fel az említett HIV-fertőzési időszakban lévő személyekből származó donor vért vizsgálatában. Ezért a világ legtöbb országában a vérhasználati rendszert csak a tárolása után vezették be 3-6 hónapig annak érdekében, hogy végrehajtsák a HIV-tárcsázási adagok és az összetevők HIV-tárcsázási adagjainak kötelező felülvizsgálatát.

Az elsődleges megnyilvánulások színpadát a replikatív folyamat aktivitása jellemzi. A viremia és az antigénémia korrekciója specifikus IgM osztályú antitestek képződését okozza: anti-P24, Anti GP41, Anti GP120. Az antigén P24 a fertőzött részek részében az IFA módszer vérében 2 héttel a fertőzés után és a 8. héten határozható meg. További B. klinikai áramlás A HIV-fertőzés megjegyzi a P24 fehérje vértartalmának második emelését, az AIDS-fokozat kialakulásának időtartamára esik.

A teljes szerokonverzió megjelenése, amikor a perifériás vérben magas szintű specifikus IgG-osztályú antitesteket rögzítenek a HIV GP41, P24, GPL20 szerkezeti fehérjéhez, jelentősen megkönnyítik a HIV-fertőzés diagnosztizálását. A legtöbb kereskedelmi készletet úgy tervezték, hogy pontosan jelezze az ilyen antitesteket.

A HIV-fertőzésben szenvedő betegek elleni antitestek kimutatásának nehézségei előfordulhatnak a masszív viremia és az antigénémia időszakában, amikor a vérben rendelkezésre álló specifikus antitestek fogyaszthatók a vírusos részecskék kötődéséhez, és a replikatív folyamat az új vírusellenes művelet előtt áll antitestek.

A szoptatott immunrendszerrel rendelkező embereknél a viremia és az antigénémia korábban jelennek meg, és a betegség előtt magas szinten tartják fenn. Ugyanakkor ezek a betegek alacsony a szabad antitestek alacsony tartalma a HIV-hez, két okból - a limfocitákban és a virionok és az oldható HIV-fehérjékben lévő antitestek elégtelen termékei, ezért a vizsgálati rendszerek fokozott érzékenységgel vagy az elemzés módosításával A fertőzés meghatározásához szükséges módszerek szükségesek. Az immun komplexek elleni antitestek színpadi felszabadulása.

Annak ellenére, hogy a rengeteg egyedi HIV markerek, a leggyakrabban határoztuk jelenléte a teljes antitestek a HIV-fehérjékre. A "teljes" kifejezés két osztályú antitest (IgG és IgM) jelenlétét jelenti széles spektrum Különböző antitestek, elsősorban a szerkezeti, HIV-fehérjékhez.

A CD4 sejtek meghatározása. A HIV-fertőzési szakasz diagnosztizálásának fő klinikai és laboratóriumi mutatója, az immunrendszer megsemmisítésének mértéke a mindennapi életben a CD4 + limpocyták tartalmának meghatározása volt: a 200 sejt / mm3 alatti szint csökkenése az AIDS diagnózisának fő kritériuma. Úgy véljük, hogy minden HIV-fertőzött személy a CD4 + -limphocytes 200 sejt / mm3 és az alatta lévő, mind a vírusellenes terápiában, mind a pneumatikus tüdőgyulladás megelőzésére van szükség. És bár a HIV-fertőzött HIV-fertőzött 1/3-a, a C04 + -limphocytes mennyiségével kevesebb, mint 200 sejt / mm3 hiányzik klinikai megnyilvánulásokA tapasztalat kimutatta, hogy a következő 2 hónapban tünetei vannak, ezért mindegyikük az AIDS szakaszában betegnek tekinthető.

1. Serológiai módszerek A HIV-fertőzés diagnosztizálásában a HIV-fertőzés diagnosztizálásához (ITA-vizsgálati rendszer - szinte 100% -os érzékenység és specifitás). Az ELISA lehetővé teszi az AG HIV azonosítását, amely lehet a korai fertőzés mutatói, vagy a HIV-fertőzés késői fejlett fejlesztésének ellentéte (P24 AG)

2. A tesztek megerősítése - immunoblotting (ib), közvetett immunfluoreszcencia (NIF) és radioimmunoprecipitáció (RIP).

a) aki azt javasolja, figyelembe véve a pozitív szérumot, amelynek ellenanyaga két héjfehérjéhez és a HIV egyik belső fehérjéhez tartozik. Az IFA-ban pozitív betegeket, de az ib bizonytalan eredményeket klinikailag meg kell vizsgálni, és más módszerekkel, orvosi vizsgálattal, immunológiailag és 3-6 hónap elteltével vizsgálni kell a szérumot a HIV elleni antitesteken.

b) közvetett immunfluoreszcens módszer (NIF) - számos laboratóriumban vagy szűrővizsgálatként megerősítő tesztként használják.

c) A radioimmunprecipitáció rendkívül érzékeny és specifikus módszer, amely az aminosav által jelzett radioaktív izotópok alkalmazásán alapul. Az eljárás nagyon érzékeny a felszíni fehérjékre való antitestek kimutatására, ezért nagyon specifikus, mivel a vírus ezen komponensei szinte minden HIV-fertőzöttek a szerokurák után.

3. Molekuláris biológiai módszerek: A nukleinsavak molekuláris hibridizációjának módja, PCR

PCR-felhasználások:

1) alternatívaként és további megerősítő módszerként a vírus jelenlétének kimutatására a szervezetben a laboratóriumi diagnosztika szerológiai módszerei tekintetében;

2), mint az első módszer konkrét elemzés a diagnózis korai HIV-fertőzés, ha nincsenek specifikus antivirális ellenanyagok;

3) a HIV-fertőzött anyák újszülöttei HIV-fertőzésének diagnosztizálása;

4) meghatározza a vírus terhelését és a konkrét antiretrovirális terápiát és felügyeletét;

5) a tisztázatlan szerológiai eredményekkel és a szerológiai és kultúra elemzések eltérő módszereivel;

6) a HIV-fertőzött személyek szexuális partnereiről;

7) a HIV-1 és a HIV-2 differenciáldiagnózisának módjaként;

4. Virológiai módszer.

HIV-fertőzés kezelése:

1. Az antiretrovirális terápia elvei: A kezelésnek meg kell kezdenie az alapvető immunhiány fejlesztését; A kezdeti terápia legalább három gyógyszer kombinációját kell tartalmaznia; A terápia módosítását legalább két új gyógyszert kell helyettesíteni; Elengedhetetlen az SD4 + sejtek és a vírus terhelés szintjének méréséhez; A vírus terhelésének csökkentése az érzékeny technikák meghatározásának határértékének alapjául szolgáló szintre, tükrözi a kezelés optimális hatását.


2. A modern antiretrovirális gyógyszerek három csoportja megkülönböztethető:

a) nukleozid reverz transzkriptáz inhibitorok (NIOT):zidovudin (azidotimidin, retrovir); Didanosin (DDI, vízum); Salcitabin (DDC, Hiquid); staudine (zerit, d4t); Lamivudin (3TS, Epivir); Abakavir; Adeopovir; Combivir (zidovudin + Abacavir); Trizivir (zidovudin + lamivudin + Abacavir); Adeopovir (reverz transzkriptáz nukleotid inhibitorai).

b) A reverz transzkriptáz nenukleozid inhibitorai (NNIOT):deverdine (Rescipster); Neusaarapin (Viramun); Ipavirenz.

c) Proteáz inhibitorok (IP):savinavir; Ritonavir (Norvir); Indinavir (cryxivan); nem elphinavir (viraspt); Amprenavir (ageneza); Lopinavir (Alvira); CALETRA (LOPINAVIR + RITONAVIR).

3. A monoterápia bármilyen gyógyszerrel nem tud meglehetősen kifejezett és hosszú szuppressziót biztosítani a HIV-replikációnak. Ezenkívül a monoterápia alatt a rezisztens törzsek kockázata és az ugyanazon csoport készítményeihez való keresztrezisztencia kialakulása növekszik. Az egyetlen kivétel, hogy a zidovudint monoterápiát alkalmazzák, hogy csökkentsék a perinatális HIV-átvitel kockázatát.

4. A terápia hatékonyságának legfontosabb kritériuma a vírus terhelés dinamikája, amelyet meg kell határozni: kezelés nélkül - 6-12 hónaponként, a kezelés hátterében - 3-6 hónaponként, valamint 4 -8 héttel az antivirális terápia kezdete után.

Az antiretrovirális terápia mellett terápia szükséges a válaszadó betegségekhez.

34.3 AIDS (klinikai lehetőségek, opportunista betegségek).

Referenciabetegség - nehéz, progresszív betegségek, amelyek a növekvő immunszuppresszió hátterében alakulnak ki, és nem találhatók egy normálisan működő immunrendszerrel rendelkező személyben (AIDS-jelző betegségek).

a) első csoport - ezek olyan betegségek, amelyek csak súlyos immunhiány (SD4 + szint) származnak< 200 кл/мкл) и поэтому определяют клинический диагноз: 1. Кандидоз пищевода, трахеи, бронхов. 2. Внелегочный криптококкоз. 3. Криптоспоридиоз с диареей более 1 месяца. 4. Цитомегаловирусная инфекция с поражением различных органов, помимо печени, селезенки или лимфоузлов. 5. Инфекции, обусловленные вирусом простого герпеса, проявляющиеся язвами на коже и слизистых оболочках. 6. Саркома Капоши у лиц, моложе 60 лет. 7. Первичная лимфома мозга у лиц, моложе 60 лет. 8. Лимфоцитарная интерстициальная пневмония и/или легочная лимфоидная гиперплазия у детей в возрасте до 12 лет. 9. Диссеминированная инфекция, вызванная атипичными микобактериями с внелегочной локализацией. 10. Пневмоцистная пневмония. 11. Прогрессирующая многоочаговая лейкоэнцефалопатия. 12. Токсоплазмоз с поражением головного мозга, легких, глаз у больного старше 1 месяца.

b) a második csoport - olyan betegségek, amelyek mind a súlyos immunhiány hátterében is fejlődhetnek, és bizonyos esetekben nélkül: 1. Bakteriális fertőzésekKombinált vagy ismétlődő 13 év alatti gyermekeknél (több mint két esetben 2 év megfigyelés esetén): szeptikémia, tüdőgyulladás, meningitis, csontkárosodás vagy ízületek, hemofil stick, Streptococcusok tályogjai. 2. Coccidiomycosis disszemined (extrapilence lokalizáció). 3. HIV-encephalopathia 4. Histoplazmosis terjeszti extrapogén lokalizációval. 5. Az iSosport a hasmenéssel több mint 1 hónapig tart. 6. Sarcoma Caposhi bármilyen korú emberekben. 7. B-sejtes limfóma (a Hodgkin-kór kivételével) vagy egy ismeretlen immunfenotípus limfóma. 8. Fur tuberkulózis. 9. Salmonellic septicemia ismétlődő. 10. HIV-dystrophia.

Leggyakrabban vannak pneumatikus tüdőgyulladás, cryptococcus meningoencephalitis, általánosított citomegalovírus fertőzés (encephalitis, retinit, nyelőcső, hepatitis, colitis), hepatitis, vastagbélgyulladás), vegyes etiológia, a Caposhi Sarcoma általános alakja, pulmonalis tuberkulózis.

Mindezek a betegségek egy vagy több szerv és rendszer vereségével járnak el: agy, tüdő, máj, gyomor-bélrendszeri traktus és aggódj egy nehéz progresszív jelleggel. Az AIDS mutatóbetegségei különböző kombinációkban jelennek meg, sőt megfelelő terápia Nem hozítja a várható hatást.

Klinikai segédeszközök lehetőségek: Infekto-, Neuro, ONCO-AIDS A különböző klinikák túlsúlyától függően.

Az elsőnek célja, hogy azonosítsák a HIV-vel fertőzött összes személyt, a második - azonosítani a HIV-vel fertőzött személyeket, de akik pozitív reakciót adott a szűrés tesztelése során. Ezért a szűrővizsgálatok nagy érzékenységgel rendelkeznek, azaz szinte nem adnak hamis negatív eredményeket, és a tesztek megerősítése nagy specifitással rendelkezik, azaz szinte nem ad hamis pozitív eredményeket. A kombinációban ezek a tesztek pontos és megbízható eredményeket biztosítanak, amelyek lehetővé teszik a fertőzött vértermékek felderítését és a HIV-fertőzés diagnosztizálását. Vannak azonban olyan biológiai tényezők, amelyek csökkentik a tesztek pontosságát; Laboratóriumi hibák lehetségesek. Ezért a HIV antitestek esetében minden egyes laboratóriumi vizsgálat során kifogástalan minőségellenőrzési programot kell kidolgozni. Nem kell elfelejteni, hogy a laboratóriumi kutatás megbízhatósága soha nem száz százalék, és eredményüket mindig a klinikai diagnózis hozzáadásának kell tekinteni.

Az ablak időtartama és a HIV fertőzés kimutatása a fertőzés korai diagramjában:

A HIV antitestek hamarosan a fertőzés után kezdődnek, de a megjelenésük időpontja számos tényezőtől függ, különösen a beteg immunrendszerének állapotáról és a vírus tulajdonságairól. Fontos megjegyezni, hogy az antitestek a fertőzés után a korai határidőkben jelen lehetnek a vérben, de a koncentráció néhány módszer (ablakidőszak) érzékenységi határértéke alatt van. Az első vizsgálati rendszerek szinte minden HIV-fertőzött antitesteket mutattak be 6-12 hét után a fertőzés után. A legújabb vizsgálati rendszerek, beleértve a harmadik generációs csapdát, az IFA-t, az antitesteket 3-4 héttel a fertőzés után. A fertőzés és a HIV-fertőzés diagnózisa közötti időszak több napig csökkenthető, a HIV antigének kimutatására szolgáló eljárások alkalmazása, néhány napig, a HIV RNS kimutatására szolgáló eljárások alkalmazása. Ha az összes leírt módszert használja, a HIV-fertőzés diagnózisa a legtöbb betegben a fertőzés után 2-3 héten belül telepíthető. A rendelkezésre álló vizsgálati rendszerek a HIV-hez való antitestek szűrésére nagyon magas és megközelítőleg ugyanolyan érzékenységgel rendelkeznek, amelyek elegendőek a legtöbb HIV-fertőzött (úgynevezett epidemiológiai érzékenység) azonosításához. Azonban a különböző vizsgálati rendszerek különböznek az analitikai érzékenységben, azaz az azonosítási képességgel alacsony szinten Antitestek, amelyek a szerokonverzió befejezése előtt zajlanak.

Vannak olyan vizsgálati rendszerek, amelyek célja az IgM antitestek HIV-nak azonosítása, de nem találtak széles körben korai diagnózis HIV fertőzések, mert az IgM antitesteket nem mindig állítják elő a fertőzés utáni korai határidőkben. Néhány harmadik generációs vizsgálati rendszer egyszerre érzékeli az IgM és IgG antitesteket a HIV-hez, és magasabb analitikai érzékenységgel rendelkezik.

Lásd még:A HIV-helyzet nyilvánosságra hozatala, sajnálat nélkül, az orrpartíció görbülete, az érrendszeri aneurysma: az egészségre, a prenatális szűrésre való rejtett veszélye; Kromoszomális anomáliák, rejtett squint (Strabisus Latenta, heteroforia), rejtett kockázat: Nők és szívbetegségek, rejtett szifilisz (szifilisznapos) polimeráz láncreakció protokollja reverz transzkripcióval valós időben (a PCR RV, valós idejű RT-PCR) Az A (H1N1) influenza vírus (H1N1), őrlési fogak (bruxizmus) kimutatására és vizsgálatára gondosan: rejtett allergének

... bárki diagnózisa fertőző betegség Az epidemiológiai, klinikai és laboratóriumi adatok összehasonlítása alapján az ezen adatcsoportok egyikének értékének túlzását diagnosztikai hibákhoz vezethet.

A HIV-fertőzés diagnózisa két szakaszot tartalmaz:
ÉN. Színpad - meghatározza a HIV-fertőzés fertőzésének tényét;
II. Színpad - a betegség szakaszának meghatározása.

A fertőzés tényének megállapítása HIV-fertőzéssel

A fertőzés tényleges tényének létrehozása HIV-fertőzéssel (vagyis a HIV-fertőzöttek azonosítása) viszont két lépést tartalmaz:
I szakaszbankapcsolódó immunszorbent vizsgálat(IFA): Az IFA módszer a szűrés (minősítés) - feltételezhetően fertőzött személyek kiválasztása, azaz célja annak, hogy azonosítsák a gyanús személyeket és az egészséges személyek szitálását; HIV antitestek észlelnek más antitestekkel a mesterséges antitestek (más antitestek elleni antitestek).

Ezek az "segéd" antitestek enzimek lesznek. Minden szűrővizsgálatnak nagyon érzékenynek kell lennie, hogy ne hagyja ki a beteget. Emiatt a sajátosságuk nem túl magas, azaz ELISA pozitív választ adhat ("valószínűleg beteg") a fertőzött emberekben (például autoimmun betegségekben: reumatizmus, szisztémás vörös lupus stb.). A hamis pozitív eredmények gyakorisága, ha különböző vizsgálati rendszerek használata 0,02-0,5%. Ha az emberi ELISA pozitív eredményt adott, akkor meg kell erősíteni a HIV fertőzés tényét.

Az ELISA végrehajtása során az esetek 3-5% -ában a hamis-negatív eredmények lehetségesek - ha a fertőzés viszonylag nemrégiben történt, és az antitestek szintje még mindig nagyon alacsony, vagy a betegség terminális szakaszában, az immunrendszer súlyos károsodása jellemzi az antitest folyamat mély megsértésével. Ezért az adatok jelenlétében, a fertőzött HIV-vel való érintkezés igazolására általában 2-3 hónap elteltével ismétlődő vizsgálatok végeznek.
II. Szakaszimmunoblotting (A Western Blot, a Western Blot módosításában): Ez egy összetettebb módszer, és a fertőzés tényének megerősítésére szolgál.

Ez a módszer a nem komplex antitesteket mutatja a HIV-hez, de az antitest külön szerkezeti fehérjéhez (P24, GP120, GP41 stb.).

Az immunblotting eredményei pozitívnak tekintendők, ha az antitesteket legalább három fehérjéhez detektálják, amelyek közül az egyik az env, a másik - a GAG gének, a harmadik polén gének kódolása. Ha az antitesteket egy vagy két fehérjéig észlelik, az eredmény kétségesnek és megerősítést igényel.

A legtöbb laboratóriumban a HIV-fertőzés diagnózisa felemelkedik, ha az antitesteket a P24, P31, GP4L és GPL20 / GP160 fehérjék egyidejűleg mutatják be. A módszer lényege: a vírus megsemmisül az összetevőkre (antigének), amelyek ionizált aminosavmaradékokból állnak, ezért minden komponens hajnala különbözik egymástól; Ezután az elektroforézis (elektromos áram) segítségével az antigének a szalag felületén vannak elosztva - ha a vizsgálati szérumban a HIV elleni antitestek vannak, kölcsönhatásba lépnek az antigének minden csoportjával, és ez kiderülhet.

Emlékezni kellEz a HIV antitestek a fertőzéstől számított 3 hónapon belül 90-95% -ban fertőzöttek, a fertőzött antitestek 5-9% -ában a HIV-hez 6 hónap elteltével jelennek meg, és a fertőzött antitestek HIV-jének 0,5-1% -ában jelenik meg későbbi időpontokban.

Az AIDS-szakaszban az antitestek mennyisége csökkentheti az eltűnést.

Az immunológusban olyan dolog van "Szerológiai ablak" - a fertőzés időszakától kezdve az ilyen számos olyan antitestek megjelenése előtt, amelyek kiderülhetnek.

A HIV esetében ez az időszak általában 2-12 hétig tart, ritka esetekben hosszabb ideig tart. A "szerológiai ablak" időszakában az elemzések során egy személy egészséges, de valójában fertőzött HIV. Megállapították, hogy a DNS HIV lehet az emberi genomban legalább három év alatt, anélkül, hogy a tevékenység és az antitestek a HIV-hez (HIV-fertőzésjelzők) nem jelennek meg.

Ebben az időszakban ("szerológiai ablak") azonosítani a HIV-fertőzött és akár 1-2 héttel a fertőzés után polimeráz láncreakció(PCR).

Ez rendkívül érzékeny módszer - elméletileg, 1 DNS-t feltárhat 10 ml tápközegen. A módszer lényege a következő: polimeráz láncreakció segítségével, sok nukleinsavat kapunk (a vírus nukleinsav -funk vagy RNS - a fehérje burkolatában), amely ezután felismeri a jelzett enzimekkel vagy izotópok, valamint a jellemző struktúra szerint. A PCR költséges diagnosztikai módszer, ezért a szűrés nem használható ütemezett módon.

A betegség szakaszának meghatározása

Az AIDS fejlesztése elsősorban a monoklonális antitestekkel jelölt t-limfocita-segítők megsemmisítése - differenciálási klaszterek - mint CD4.

E tekintetben a betegség progressziójának diagnózisa és ellenőrzése lehetetlen a T-segítőinek alpopulációjának ellenőrzése nélkül, amelyet leginkább egy lézeres cellás sorter segítségével végeznek.

Gyengén kifejezett HIV-fertőzéssela T-limfociták száma rendkívül változó mutató. Általánosságban elmondható, hogy a CD4 sejtek számának csökkenése (abszolút és relatív) kimutatható a személyekben, a HIV-fertőzés legalább egy évvel ezelőtt történt.

Másrészt a fertőzés korai szakaszában gyakran élesen megnövekedett T-szuppresszorok (CD8) mind a perifériás vérben, mind a kibővített nyirokcsomókban.

Kifejezett segédeszközökkela betegek abszolút többsége csökkentette a teljes T-limfocitát (kevesebb mint 1000-t 1 μl vérben, beleértve a CD4 limfocitákat - 1 μl-nél kevesebb, mint 22 ° C-on, míg a CD8 tartalom abszolút értéke a normál tartományon belül marad.).

Ennek megfelelően a CD4 / CD8 arány drasztikusan csökken. In vitro T-limfociták válasza a standard antigénekre és a mitogének szigorúan csökkennek a viszonylag csökkentett CD4-es számmal.

-Ért késői szakaszok AIDS A lymphopia, a neutropenia, a thrombocytopenia (a limfociták, a neutrofilek és a vérlemezkék száma), a vérszegénység jellemző.

Ezek a változások a vérképződés központi elnyomásának következményei lehetnek a vírus általi vérképző szervek károsodásának köszönhetően, valamint a celluláris alpopulációk autoimmun pusztulása a periférián. Ezenkívül az AIDS esetében a gamma-globulinok számának mérsékelt növekedése jellemzi az IgG tartalmának domináns növekedését.

A súlyos segédbetegségekben szenvedő betegek gyakran vannak emelkedett szint IGA. A betegség egyes szakaszaiban az ilyen segédanyagok szintje szignifikánsan növekszik 1-mikroglobulin, sav-matrica-interferon, 1-timosin. Ugyanez történik az ingyenes neopterina - makrofág metabolit szekréciójával.

Nem lehet megbecsülni a felsorolt \u200b\u200bvizsgálatok mindegyikének relatív fontosságát, amelynek száma folyamatosan növekszik. Ezért figyelembe kell venni az immunvirológiai és citológiai jellegű HIV-markerekkel együttműködve.

A vér klinikai elemzéséhez a leukopenia, a limfopénia (a leukociták és a limfociták számának csökkenése) jellemezhető.

1 szakasz - " inkubálás szakasza"- A HIV elleni antitesteket még nem észlelték; A HIV-fertőzés diagnózisát ebben a szakaszban epidemiológiai adatok alapján emeljük, és laboratóriumot kell megerősíteni az emberi immunhiányos vírus, az antigének, a HIV nukleinsavak kimutatásával;
2 szakasz - " az elsődleges megnyilvánulások szakasza"- Ebben az időszakban már léteznek antitestek:;
2A szakasz - " tünetmentes"- A HIV-fertőzés csak antitestek előállításával jelenik meg;
2b szakasz - " akut HIV-fertőzés másodlagos betegségek nélkül"- A betegek vérében az e-mail limfociták -" mononukleáris ", és gyakran a CD4 limfociták szintjének tranziens csökkenése (akut klinikai fertőzés A fertőzött személyek 50-90% -át meg kell jegyezni a fertőzés utáni első 3 hónapban; Az akut fertőzés időtartamának kezdete általában a szerokonverzió előtt történik, azaz

az antitestek megjelenése a HIV-hez);
2b szakasz - " akut HIV-fertőzés másodlagos betegségekkel"- A CD4-limfociták szintjének csökkenése és a másodlagos betegségek csökkentése ennek az immunhiánynak köszönhetően jelenik meg különböző etiológia (angina, bakteriális és pneumatikus tüdőgyulladás, candidiasis, herpes fertőzés stb.);
3 szakasz - " rejtett"Az immunhiány progressziójára adott válaszként egy immunválasz módosítását módosították a CD4 sejtek túlzott reprodukciójának formájában, majd a CD4-limfocita szintek fokozatos csökkenése, átlagosan 0,05-0,07 × 109 / évente; A HIV elleni antitesteket a vérben kimutatják;
4 szakasz - " a másodlagos betegségek szakasza"- A CD4 populációs limfociták kimerülése, a vírus antitestek koncentrációja jelentősen csökken (a másodlagos betegségek súlyosságától függően, 4a, 4b, 4b szakaszok izolálva);
5 szakasz - " végállás"- jellemzően a CD4 sejtek mennyiségének csökkenése 0,05 × 109 / l alatt van; Az antitestek koncentrációja a vírusra szignifikánsan csökkent, vagy az antitestek nem határozhatók meg.

A HIV-fertőzés laboratóriumi diagnosztikája

A HIV-fertőzés diagnosztizálásában 4 módszercsoportot használnak:

1. A vírus jelenlétének meghatározása, annak antigénjei vagy RNS másolatai a beteg vagy a HIV-fertőzött szőnyegben

Serológiai diagnosztika, amely a felületre (GP 120 és GP 41) és belső (P 18 és P 24) HIV-fehérjékre vonatkoztatott specifikus antitestek azonosítására alapul.

3. A pathognomonikus (specifikus) kimutatása a HIV-fertőzéshez az immunrendszerben.

Az opportunista fertőzések laboratóriumi diagnosztikája (AIDS-társított betegségek).

1. Virológiai diagnosztika. A HIV felszabadulására szolgáló anyag a vér, a csontvelő leukociták t-limfocitái, a nyirokcsomók, agyszövetek, nyál, cum, gerincfolyadék, vérplazma.

A félközpontú anyag fertőzi a T-limfociták (H9) lefordított kultúráját. A HIV-t a sejttenyészetben a CPD (egy szimple-kályha képződése), valamint az immunfluoreszcencia módszereivel, az elektronmikroszkóppal, a kifejezett revedkriptáz aktivitás szerint végezzük.

A működési módszerek modern módszerei lehetővé teszik, hogy 1000 sejtenként egy fertőzött limfocitát érzékeljen.

A vírusantigének fertőzött T-limfocitákban történő észlelése monoklonális antitestek alkalmazásával történik

Az elmúlt években a polimeráz-láncreakció (TTCR) a HIV-plazmában a HIV RNS plazma plazmájának másolatának mennyiségének meghatározása határozza meg a HIV-fertőzés előrejelzését és csöpögését.

Ha olyan betegeknél, akik nem kapnak terápiákat, a vírusterhelés a meghatározási határ alatt van (az IL plazma HIV-RNS-nél kevesebb mint 5000 másolat), ez jelzi a progresszió vagy a lassú progresszió hiányát. A fertőző fokú minimális. Magas vírusos teher-ka (több mint 10 000 RNS-t 1 ml plazmában) több mint 300-nál alacsonyabb CO4-limfocitákban 1 μl-ben, mindig jelzi a betegség progresszióját.

Szerológiai diagnosztika. Jelenleg megkapta a legmagasabb terjesztést.

Az anyag felfedezéséhez: 5 ml. Heparinizált vér, amely a laboratóriumig történő szállításig 6-8 órát tárolhat hűtött, de nem fagyasztott állapotban.

Az AIDS szerológiai diagnosztizálása céljából elsősorban az immunmun-analízis módszereit alkalmazzák standard immunformális rendszerekkel (ELISA).

Ez egy szűrési módszer. A működés elve a közvetlen ELISA osztály-kék elve alapján történik. Az immunszorbens polisztirol tabletták, amelyek immobilizált inaktivált víruspecifikus antigént kapnak HIV-ből vagy szintetikus.

Ezután írja elő a tenyésztés tesztszérumát. Az antiszigi lyukakban való inkubáció. Miután megkötjük az AG-t, az AG-t a független fehérjék háromszoros mosását követi, majd az emberi immunglobulinok elleni antitestek etonátját az enzimcímkével ellátott kutakba vezetjük be.

Egy specifikus AG + komplexképződését az enzim hordozójának bevezetésével (ortofenilén-diamin és hidrogén-peroxid) bevezetésével detektálják.

Ennek eredményeképpen a közepes színe az antitestek együttes táplálásával arányos. A vizsgálat eredményeit figyelembe veszik a spektrofotométeren.

A szérum víruspecifikus antitestekkel az ELISA szerint, a jövőben meg kell vizsgálni az immunrendszert.

Az Immun Fleatpg egy megerősítő teszt, mivel lehetővé teszi a különböző HIV-fehérjék elleni antitestek azonosítását.

A HIV elektromos-FRZ fehérjék molekulatömegének (szétválasztásának) előzetes frakcionálásán alapul, majd az antigének transzferét a nitrocellulóz membránon. Ezután a membránt a teszttartályra alkalmazzák. Ugyanakkor a specifikus antitestek komplexet alkotnak egy specifikus AG-vel (GP.120, GP.41, P.41, 28. o.). A tanulmány végső szakasza a különböző HIV-fehérjéknek való azonosítása.

Ehhez antitesteket adunk hozzá az enzim vagy radioizotóp címkével jelölt humán fehérjék antitestjei.

Így a szérumban a beteg észleli (vagy nem érzékeli) víruspecifikus antitesteket az összes vagy a legtöbb HIV antigénhez.

3. Az immunrendszeri státusz vizsgálata. Célja:

1) A sejtek CD4 / CD8 arányának csökkentése (N 2 és\u003e, AIDS - 0,5 és<);

2) A CD4 sejtek tartalmának csökkentése (<200 клеток/мл.);

3) az egyik laboratóriumi jel jelenléte, beleértve az anémiát, leukope, thromboshifikációt, lymphoprod;

4) az IG A és IG G koncentrációjának növelése a vérszérumban;

5) a limfociták blaphocitákának a mitogénre történő reakciójának csökkentése;

6) az SHTZ bőrreakció hiánya több antigénbe;

7) A keringő immun komplexek szintjének növelése.

Előző1234567891011 Következő

Többet látni:

Antitestek a HIV 1/2 - alkatrészek vérplazma, fehérje jellegű, ami megakadályozza a szaporodási a HIV-fertőzés, és teljesen semlegesíti azok negatív hatást.

Mi az analízis az antitesteknél a HIV 1/2 (szűrés)

A HIV-antitestek 1.2 vizsgálati elemzésének vizsgálati elemzése olyan tesztrendszer, amely lehetővé teszi az immunhiányos vírussal fertőzött személyek azonosítását. Ezen túlmenően is vannak olyan nevű megerősítés (segéd) tesztek is, amelyek feladata azonosítani a vírussal nem fertőzött személyeket, de a vírus pozitív reakciójával a szűrés során.

A HIV-fertőzés szűrővizsgálatának lényege az immunhiányos vírus elleni antitestek meghatározása.

A nagy érzékenység megkülönböztető jellemzője több mint 99,5%. A vizsgálati specifitás az, hogy a szűrés hamis pozitív eredményt adhat, ha a beteg teste autoantile-t tartalmaz.

Azonos eredményt lehet azonosítani, és májbetegség esetén a beteg, az influenza elleni vakcinázás vagy az akut vírusos betegség jelenléte esetén. Ezen alapul, hogy pontos eredményeket kapjunk, a szűrés mellett, általában a vizsgálat és a fent említettek megerősítése.

Elemzési jelzések

Az orvosi gyakorlatban meglehetősen kiterjedt jelzi a szűrő felmérések áthaladását.

A beteg kapcsolatba léphet a laboratóriumban:

  • a fertőzés gyanújának kialakulása (ha szoros kapcsolatban van a HIV-fertőzés hordozójával);
  • fogyás, láz;
  • pneumonia, amely nem alkalmas a szokásos terápiára;
  • az érthetetlen okokból eredő krónikus jellegű betegségek;
  • a műtéti művelet előkészítésének folyamatában;
  • vérátömlesztés;
  • terhesség és család tervezése;
  • Gyulladt nyirokcsomókkal;
  • Véletlenszerű szexuális kapcsolatok.

Különleges kockázati csoportba tartozó személyek: kábítószerfüggők és az emberek vezetnek egy hibás szexuális életet.

Hogyan képernyők a HIV 1/2

Az eljárás a szükséges szabályok betartását jelenti:

  • a betegnek kizárólag üres gyomorra kell adnia vért (ivóvíz megengedett);
  • az utolsó étkezés óta az élelmiszernek legalább nyolc órát kell átadnia;
  • az orvost értesíteni kell arról, hogy milyen gyógyszer veszi a beteget, és ismeri az adagot (ha nincs lehetőség még rövid távú lemondásra);
  • ha a beteg képes elhalasztani a gyógyszerek használatát, ajánlott 10-15 nappal a manipuláció napja előtt megtenni;
  • a páciens tesztelésének kezdete előtt kívánatos elhagyni a sült vagy zsíros termékek vételét, az alkoholtartalmú italok, a dohányzás, a nehéz fizikai erőfeszítés korlátozására is használható.

Meg kell jegyezni, hogy az immunhiányos vírus anyákból származó gyermekek fertőzésének laboratóriumi tanulmányai saját sajátosságaikkal rendelkeznek.

Mivel a gyermek életének első hónapjaiban az anyai antitestek lehetnek a HIV-hez, majd az elemzés eredményei szerint lehetetlen objektív képet szerezni az újszülött egészségi állapotáról, sőt negatív eredményt is Nem jelenti azt, hogy a vírus nem tudott behatolni a placenta gátba.

A pontos tesztadatok beszerzése érdekében a gyermek születése után 36 hónapos időszakban kell elvégezni.

Szolgáltatások a "modern diagnosztika" irányban

Klinika a "modern diagnosztika" irányban

A HIV-hez való antitestek tesztelése vagy szűrése előtt két széles, de nagyon világosan meghatározott cél - azonosítja az eseteket és az epidemiológiai felügyeletet. Az esetek azonosítása során először is tisztázni kell az egyes személyek HIV-fertőzésének státuszát a megfelelő bánásmód kinevezésére, illetve a megfelelő intézkedések elfogadásával.

Az epidemiológiai megfigyelés célja a HIV előfordulási gyakoriságának felmérése, a fertőzés eseteinek eloszlása \u200b\u200bés trendjei egy csoportban vagy egy teljes népességben.

Az antitestvizsgálatnak a HIV-hez való érzékenysége mérő képességét jelenti, hogy pontosan azonosítja ezeket az antitesteket a mintában, és a vizsgálat sajátossága - annak mértéke, hogy pontosan megerősítse az antitestek hiányát, ha nincs a mintában .

Ideális esetben a vizsgálat érzékenysége és specifitása 100% -ot kell elérnie. A gyakorlatban a biológiai teszt nem felel meg ennek a követelménynek, és mindazonáltal a HIV antitesteken végzett vizsgálatok a jelenleg rendelkezésre álló legérzékenyebb és specifikus tesztek számához tartoznak

Az AIDS laboratóriumi diagnózisa az anyag virológiai, szerológiai, immunológiai vizsgálatainak elvégzése a beteg betegségének gyanúja miatt.

Amikor virológiai vizsgálatok, elsődleges vér mononukleáris vérsejt-kultúrák használhatók a vírus kiemelésére.

A vírus kiválasztása és azonosítása módszeresen összetett, és speciális laboratóriumokban is elvégezhető. A mindennapi tömeges felmérésekhez használt leghatékonyabb diagnosztikai módszer az emberi immunhiányos vírus elleni antitestek kimutatása. A HIV antitestek megjelenhetnek a fertőzés első hónapjának végére. Számos szerző által benyújtott, a fejlesztések szolgáltatása 4-7 hetes és 6 hónapig igényel. Az antitestek jelenléte diagnosztikai értékkel rendelkezik az AIDS-szel, vagy jelzi a fejlődés kockázatát.

Az antitestek nem csak az AIDS szerológiai markerei. A betegség előtti fázisban feltárva lehetővé teszik, hogy korai diagnózist hajtson végre. Különös jelentőséggel bír, a jelenlétük érzékeli a médiát.

Az antitesteket sok éven át észlelik, majdnem az egész életen keresztül. A kutatók párhuzamosságot hoztak létre a vírus és az antitestek azonosításában, azaz az antitestek jelenléte az immunhiányos vírushoz nagy valószínűséget jelez, hogy egy személy vírus monitor.

Az inkubációs periódusban megjelenő HIV-antigén elleni antitestek továbbra is intenzíven fejlődnek a betegség kialakulásával, mivel az antigén irritációt a fertőzött limfocitákból kiválasztott virionok stimulálják, és a fertőzött bomlás során a véráramba esnek a véráramba esedékes szub-demuron komponensek a limfocitákkal fertőzött sejtek.

Ugyanakkor a fertőzött sejtek genomába beágyazott provinus továbbra is elérhetetlen a specifikus antitestekhez. Ezt is megmagyarázzák, paradox módon tűnhet: minél több antitest a szérum humán immunhiányos vírusához, annál könnyebb a vírus a betegtől.

Ez történik, mert a vírus fertőzésére adott válaszként előállított antitestek nem semlegesítik, és ennek következtében nincs jelentősen befolyásolva a vírust, de egyszerűen a testben jelen van. Az AIDS-vírus elleni antitestek (AT) észlelése érdekében olyan tesztsorozatot fejlesztettek ki, amelyek lehetővé teszik a kutatásokat a megfelelő specifikus és érzékenységgel. Ezek a szilárd fázisú radioimmunológiai analízis, a radioimmunprekitáció, az immunfluoreszcencia, az immunferencia analízis és az immunblottálás módszerei.

A gyakorlatban a legelterjedtebb felhasználás az immunmunimenális analízis (ELISA) módszerei voltak, amelyet nagy érzékenység jellemez, a válasz eredmények mennyiségi és vizuális elszámolásának lehetősége, amely a módszer bármely szintű laboratórium számára elérhetővé teszi.

Az ELISA-ban idegen és hazai vizsgálati rendszereket használnak.

Klinikai áram HIV-fertőzés és segédeszközök

Szükség van a fertőzött anyáktól származó gyermekek elleni óvatosságra. Klinika hiányában a gyermeket fertőzöttnek tekintik, ha egy év után mentésre kerülnek. Az IFA pozitív eredményének beérkezése után meg kell fontolni a szérumokat, amelyek pozitív eredményeket adtak egyszer, és megerősítik a pozitív eredményt egy független rendszer - immunblott

Az ELISA válaszának észlelése nem nyújt elegendő információt, mivel nem tallítja a vizsgált állapotát, de csak az inkubálást jelzi a betegségről vagy az aszimptomatikus fertőzés jelenlétéről.

Az immunvágás nagyobb információt ad. De a HIV-antigének felhalmozódása egy kifejezett betegségre jellemző, míg az 1-2 antigének reakciója jellemzőbb az alacsony generált fertőző folyamatra.

Az informatív a t (segítők) és a T4 arányok számának számlálása a mono-vonális antitestek által meghatározott limfocitákhoz (szuppresszorok).

A betegség fontos kritériuma az immunglobulinok számának jelentős növekedése lehet, különösen A és V. A vér általános klinikai elemzésében a betegség jelezheti a limfpopiát, a leukopeniát, az erytroaktort, a thrombocytopenia-t, az eosinophiliát.

Az epidemiológiai felügyelethez használt HIV-tesztek nem rendelkezhetnek ugyanolyan pontossággal, amennyiben klinikai célokra van szükség.

Azonban a HIV-k alacsony károsodása a lakosságban, az összes pozitív mintát további vizsgálatokat kell vizsgálni.

A HIV-ellenes antitestek vagy a szűrés tesztjének vérszivattyúzása a vizsgált (megnevezett gyűjtemény) nevének nyilvántartásba vételével vagy a vezetéknevek vagy az egyedi azonosítási információk (névtelen díj) regisztrálása nélkül (névtelen díj) regisztrálásával járhat.

Névtelen szűrés esetén a következő pontokat a figyelembe vétel anélkül jellemzik, hogy figyelembe vesszük az azonosítási információkat: a más célokra összegyűjtött vérmintákat használják; Ez garantált anonimitás annak a ténynek köszönhetően, hogy az azonosító adatokat nem gyűjtik össze, vagy nem veszik figyelembe; Nincs szükség harmonizált beleegyezésre; Nincs szükség kapcsolattartással a tanácsadással és a szociális szolgáltatásokkal; Végül, ami a legfontosabb, minimálisra csökkenti a statisztikai becslések hibáinak minimalizálása, a népesség részvételének szintjétől függően.

Bár a HIV névtelen tanulmányozásával lehetséges, pontosabb adatok beszerzése, ez a módszer a következő hibákkal rendelkezik: a kiválasztás miatt nem tudja megszüntetni a lehetséges értékelési elmozdulást; A magas viselkedési kockázatokkal és más fontos változókkal kapcsolatos adatok nem állnak rendelkezésre, és nem lehet visszamenőlegesen összegyűjteni; Lehetetlen kapcsolatot létesíteni a HIV által érintett kapcsolatba, hogy tájékoztassa őket az állapotukról; A felmérés csak olyan személyek csoportjaiban végezhető el, akiknek más célokra vették.

Olyan területeken, ahol a HIV-fertőzések előfordulását nagyon alacsonynak tekintik, az egészségügyi rendszer felügyelete elsősorban a lakosság magánszemélyeire vagy csoportjaira kell irányulnia, amelyre a fertőzés legnagyobb kockázatával kapcsolatos viselkedése mindenhol tartalmazza a Nagyszámú szexuális partnerek

A HIV-tanulmány vért ilyen kockázati csoportban a legegyszerűbb a szexuális úton terjedő betegségek kezelésére szakosodott központok, vagy azok, mint azok.

Ha a gyógyszerek intravénás beadása is gyakori, a vérmintákat a fogyasztóktól speciális intézményekben kell elvégezni.

A földrajzi területek legnagyobb kockázatának legnagyobb kockázatának 3-as vagy 6 hónapos vérbe történő betakarítása, ahol ezek a csoportok leggyakrabban elegendőek. Kivétel lehet olyan kockázatok, mint a kábítószerfüggők, olyan gyógyszerek intravénás beadása, amelyekre több privát felmérés szükséges.

Most, aki részt vesz a betegség besorolási rendszerének (stadion) létrehozásával a klinikai vizsgálatokhoz, amelyek szintén felhasználhatók a kezelés módszereiben is, amelyek prognosztikai értékkel is rendelkezhetnek.

Az ilyen rendszer azonban nem célja az egészségügyi rendszer felügyeletében alkalmazott meglévő AIDS-meghatározásokat.

Jelenleg a tervezett (rutin) felügyeleti rendszerek általánosan kifejlesztettek.

Ezeket a rendszereket ki kell igazítani egy meglévő epidemiológiai helyzethez; Így a nagyon alacsony vírus előtti prevalenciájú populációkban lévő minták elkészítésének módszerei szükségszerűen eltérnek a felhasznált attól, ahol a prevalencia mérsékelt vagy magas.

Az ilyen felügyelet rutin felméréseket jelent, amelyek egyértelműen jellemzik és megfizethető populációkat.

Elsősorban azokat a csoportokat is tartalmazzák, amelyek a fertőzés legnagyobb kockázatának és mindegyik csoportjában vannak kitéve, és mindegyik csoportban meg kell választani a felmérés állandó előre meghatározott számát.

Az utóbbi években a megfigyelt csoportok névtelen szűrése, anélkül, hogy figyelembe venné a megfigyelt csoportok azonosítását, egyre gyakoribbá válik, mint a HIV-fertőzés epidemiológiai felügyeletének pontos és költséghatékony módszere az egészségügyi rendszerben.

HIV laboratóriumi diagnosztikai módszerek

Egy magasan szakosodott laboratóriumban végezzük el:

a) a vérben, antigénben és immun komplexekben keringő antitestek meghatározása; a vírus termesztése, genomiális anyag és enzimek kimutatása;

b) A celluláris immunrendszer funkcióinak értékelése.

A fő szerep a szerológiai diagnosztika módszereihez tartozik, amelyek az antitestek meghatározására irányulnak, valamint a test vér és más biológiai folyadékainak kórokozói antigének.

A HIV-hez való antitestek vizsgálata az alábbiak szerint történik:

a) a hemotranszfusz és transzplantáció biztonsága;

b) Felügyelet, tesztelés a HIV-fertőzés meghaladása és az egyes lakosság gyakorlása dinamikájának vizsgálata;

c) HIV-fertőzés diagnózisa, t.

e. Az önkéntes vizsgálati szérum gyakorlatilag egészséges emberek vagy betegek különböző klinikai jelek és tünetek hasonlóak a HIV-fertőzés és az AIDS.

A HIV-fertőzés laboratóriumi diagnosztikájának rendszere háromlépcsős elv szerint épül fel.

Az első szakasz szűrés, amelynek célja az elsődleges vérvizsgálatok elvégzése az antitestek HIV-fehérjéhez való jelenlétére. A referencia második szakasza - lehetővé teszi a speciális módszertani technikák használatát a szűrési szakaszban kapott elsődleges pozitív eredményt. A harmadik Ethan szakértő, amelyet a Laboratóriumi diagnosztika korábbi szakaszaiban azonosított HIV-jelölők jelenlétének és specifitásának végső ellenőrzésére szántak.

A laboratóriumi diagnosztika számos szakaszának szükségessége elsősorban a gazdasági megfontolásoknak felel meg.

A gyakorlatban több tesztet használnak, amely elegendő mértékű pontossággal rendelkezik a HIV-fertőzött emberek azonosítására:

Elisa (Elisa) -Tecte (szilárd fázisú immunoassay analízis), amely az első szintet észleli, nagy érzékenység jellemzi, bár a következőkben kevesebb specifikusság;

Immunrendszer (Western-blot), nagyon specifikus és leginkább használt teszt, amely lehetővé teszi a HIV-1 és a HIV-2 differenciálódását;

Antigenemia P25-teszt hatásos a fertőzés kezdeti szakaszában;

Polimeráz láncreakció (PCR).

A vérminták tömeges szűrése esetén ajánlott vizsgálni a szérumkeverékeket a vizsgált csoportból, amely ilyen számítással rendelkezik, így az egyes minták végső hígítása nem haladja meg az 1: 100 értéket.

Ha a szérum keveréke pozitív, akkor a pozitív keverék minden egyes szérumát vizsgáljuk. Ez a módszer nem vezet az érzékenységvesztéshez mind az ELISA-ban, mind az immunoblotban, de csökkenti a munkaerőköltségeket és az elsődleges felmérések költségeit 60-80% -kal.

Immunológiai módszerek

t segítők száma

2. A T4 IT8 aránya,

3. A túlérzékenység állapota,

4. A sejtrendszer kompenzációs funkciója.

Az immunglobulinok hiperprodukcióját mutatják, alacsony, affinitás és a test anyaga még többet költenek.

Hátrányok: későn jelennek meg, egyes immunológiai mutatók lehetnek más fertőzésekkel.

Klinikai módszerek - M.B. A többi betegséghez hasonlóan a leginkább tipikus megnyilvánulások a későbbi szakaszokban vannak bejegyezve, így a klinikai diagnosztika kevéssé hatékony

A fő módszer a szerológiai - 2 szakaszban valósul meg:

1 - Szűrésvizsgálat - A teljes antitestek mintavétele az összes immunelemző fehérjéhez.

Ez a szakasz az igazi eredmények 95% -át és a hamis pozitív 5% -át teszi ki.

2 - Megerősítési módszer - Minden mintát megerősítési módszerrel vizsgálunk. Ez a technika lehetővé teszi, hogy azonosítsák az antitesteket vírusfehérjéhez.

Pozitív eredmény, ha antitesteket találnak legalább 3 vírusfehérjék, ha 1 vagy 2-ig az eredmény kétséges és további vizsgálatot igényel.

A HIV-fertőzés elsődleges serodiagnózisában a teljes antitestet szűrő kvalifikációs tesztekkel - IFA és agglutination reakciók segítségével határozzák meg.

A második (arbitral) szakaszban egy bonyolultabb vizsgálati - immunoblotot használ, amely nemcsak a kezdeti következtetést megerősíti vagy elutasítja, hanem ezt az antitestek definíciójának szintjén az egyes vírusfehérjékre vonatkozóan.

A HIV antitestek elemzésének eredményei értelmezése

A különböző tényezők elég nagy száma befolyásolja a HIV antitestek elemzésének eredményét, és köztük az elemzés időpontja az esetleges fertőzés után fontos.

A legtöbb esetben a HIV elleni antitestek a fertőzés után 6-12 hét után észlelhetők.

Ezt az időszakot a vírus injekciójától a testre egy meghatározott mennyiségű antitestek megjelenésétől a pozitív szerokonverzió vagy az "ablak" időszaknak nevezik. A fertőzés után 6 hónappal ritka antitestek vannak, és az antitestek kimutatásának jelentései csak 1 év után nincs bizonyíték. Jelenleg a diagnosztikai szolgáltatás az IFA módszerek új generációját használja, amely lehetővé teszi az antitestek azonosítását a HIV-hez 3-4 héten belül a fertőzés után, és bizonyos módszerek kombinációi, az úgynevezett tesztstratégiák csökkentik az "ablak" időszakot legfeljebb 2 -3 hetes, azaz.

lehetőség van az antitestek azonosítására a HIV-hez, amint elkezdenek keletkezni a testben.

A negatív eredmény azt jelenti, hogy a felmérés vérében a HIV elleni antitesteket találták.

Ezt az állapotot seroneGativitásnak és eszközöknek nevezik, mivel általában nem fertőzött.

A negatív eredmény nem ad garanciát a jövőre. Csak az államot állítja be a vizsgálat idején. Kisebb esély van arra, hogy a vizsgálatot az "ablak" alatt végezték. Ezért, ha egy korábban a fertőzött HIV-t kockáztatta, és negatív vizsgálati eredményt kapott, szükség van a kockázatos esemény után legalább 6 hónappal a tesztelésre.

A pozitív eredmény azt jelenti, hogy a HIV elleni antitestek megtalálhatók a vizsgált vérben.

Ezt az állapotot seropozitivitásnak nevezik - egy személy fertőzött HIV. Fontos megérteni, hogy a pozitív eredmény csak a HIV-fertőzésről szól, és nem a betegség AIDS-ről.

Mindazonáltal rendkívül fontos, hogy pozitív eredményt érjen el az orvoshoz, és szükség esetén orvosi ellátást, amely hosszú ideig támogatja az életminőséget.

Bizonytalan eredmény. Ritka esetekben a HIV antitestekre vonatkozó elemzés eredménye nem tisztázott.

A laboratórium nem adhat válaszolási szeropozitív embert vagy szeronegatívát. Ilyen körülmények között konzultálni kell az orvossal, és ismét átadja a tesztelést.

A HIV-fertőzés időszerű diagnosztizálása rendkívül fontos intézkedéssé válik, hiszen korábban a kezelés kezdete nagymértékben előre meghatározhatja a betegség további fejlődését és kiterjesztheti a beteg életét. Az elmúlt években jelentős előrelépés figyelhető meg a szörnyű betegség azonosításában: fejlettebb, a felmérési módszerek a régi tesztrendszerek helyettesítésére kerülnek, és pontosságuk jelentősen növekszik.

Ebben a cikkben elmondjuk a HIV-fertőzés diagnosztizálásának modern módszereit, amely hasznos a probléma időben történő kezeléséhez és a betegség normális életminőségének fenntartásához.

HIV diagnosztikai technikák

Oroszországban szabványos eljárást végeznek a HIV-fertőzés diagnosztizálására, amely két szintet tartalmaz:

  • ELISA tesztrendszer (szűrési elemzés);
  • immunrendszer (Ib).

Más technikák alkalmazhatók a diagnosztikára is:

  • expressz tesztek.

IFA tesztrendszer

A diagnosztika első szakaszában egy szűrővizsgálatot (ELISA) alkalmazzák a HIV-fertőzés kimutatására, amely a laboratóriumokban létrehozott HIV-fehérjékre épül, amely a testben keletkező specifikus antitesteket rögzíti a fertőzésre válaszul. A reagensek (enzimek) kölcsönhatása után a vizsgálati rendszer megváltoztatja az indikátor színét. Ezután ezeket a színváltozást speciális hardveren dolgozzák fel, amely meghatározza az elvégzett elemzés eredményét.

Az ilyen IFA tesztek a HIV-fertőzés bevezetése után néhány héttel később megmutathatják az eredményt. Ez az elemzés nem határozza meg a vírus jelenlétét, de feltárja az antitestek termelését. Néha az emberi testben a HIV antitestek előállítása 2 hét után kezdődik a fertőzés területén, de a legtöbb ember későbbi határidőkben, 3-6 hét után készül.

Az IFA tesztek négy generációja különböző érzékenységgel rendelkezik. Az utóbbi években a III és IV generációk vizsgálati rendszereit gyakran használják, amelyek szintetikus peptideken vagy rekombináns fehérjéken alapulnak, és nagyobb specifitással és pontossággal rendelkeznek. Felhasználhatók a HIV-fertőzés diagnosztizálására, a HIV-prevalencia és a biztonság ellenőrzésére, ha ellenőrzik a donor vért. Az IFA tesztrendszerei III és IV generáció pontossága 93-99% (a nyugati országokban termelt érzékeny tesztek - 99%).

Az IFA teszt végrehajtásához 5 ml vért veszünk a beteg vénájából. Az utolsó étkezés és az analízis között legalább 8 órát kell elvégeznie (szabályként, azt egy üres gyomorban kell elvégezni). Ez a vizsgálat nem ajánlott az állítólagos fertőzés után 3 héttel az állítólagos fertőzés után (például a nem védett szexuális közösülés után új szexuális partnerrel).

Az IFA tesztek eredményeit 2-10 nap után kapjuk meg:

  • negatív eredmény: jelzi a HIV-fertőzés hiányát, és nem igényel hozzáférést egy szakemberhez;
  • hamis negatív eredmény: a fertőzés (legfeljebb 3 hétig) megfigyelhető (legfeljebb 3 hét), az AIDS későbbi szakaszaiban, a mentességről és helytelenül végzett vérkészítéssel rendelkező támogatások későbbi szakaszaiban;
  • hamis-pozitív eredmény: bizonyos betegségekben megfigyelhető és helytelenül elvégzett vérkészítéssel;
  • pozitív eredmény: A HIV-fertőzés fertőzését jelzi, megköveteli az IB és a páciens forgalmát az AIDS-központ szakemberéhez.

Miért ad egy IFA teszt hamis pozitív eredményeket?

Az IFA-tesztek hamis-pozitív eredményei a HIV-ről a helytelen vérfeldolgozással vagy az ilyen körülmények között és betegségekben szenvedő betegeknél megfigyelhetők:

  • myeloma multiplex;
  • az Epstein-Barr vírus által kiváltott fertőző betegségek;
  • állapot után;
  • autoimmun betegség;
  • a terhesség hátterében;
  • a vakcinázás után.

A fentiekben ismertetett vér, a nemspecifikus térhálósító antitestek jelen lehetnek, amelyek előállítása nem vált ki a HIV-fertőzés.

Az utóbbi években, a frekvencia a hamis pozitív eredmények jelentősen csökkent használata miatt a generációs vizsgálati rendszerek III és IV, amelyek érzékenyebbek peptid és rekombináns fehérjék (szintetizáljuk őket in vitro génsebészeti). Az ilyen IFA tesztek használatának megkezdése után a hamis pozitív eredmények gyakorisága jelentősen csökkent, és körülbelül 0,02-0,5%.

A hamis pozitív eredmény azonosítása nem jelenti azt, hogy egy személy HIV-vel fertőzött. Ilyen esetekben, akik egy másik IFA tesztet javasolnak (szükséges IV generáció).

A páciens véreit a referencia vagy a választottbírósági laboratóriumba küldi egy "ismétlés" megjegyzéssel, és az IFA tesztrendszer IV generációjára vizsgálták. Ha egy új elemzés eredménye negatív, akkor az első eredményt hibás (hamis pozitív), és az IB-t nem hajtják végre. A második vizsgálat során pozitív vagy kétes eredmény esetén a páciens szükségszerűen hozzárendeli az IB-t 4-6 hét után, hogy megerősítse vagy megjavítsa a HIV-fertőzést.

Immunbloting

A HIV-fertőzés végső diagnózisa csak az immunblot (Ib) pozitív eredményének (IB) pozitív eredményét követően telepíthető. Nitrocellulóz-szalagot használ, amelyen vírusfehérjéket alkalmaznak.

Az IB vérkeresztezését vénákból végezzük. Ezután a speciális feldolgozásnak van kitéve, és a szérumban lévő fehérjék különálló gélben vannak elválasztva töltésük és molekulatömege szerint (manipulációt végezzünk speciális berendezésen az elektromos mező hatása alatt). Nitrocellulóz szalagot vetünk fel egy vérszérum gélre és blokkolásra ("károsodás") egy speciális kamrában. A szalagot feldolgozzák, és ha vannak antitestek a HIV-hez az alkalmazott anyagokban, akkor az IB antigén csíkokhoz kapcsolódnak, és vonalakként manifesztálják magukat.

Az IB pozitívnak tekinthető, ha:

  • az amerikai CDC kritériumok szerint - két vagy három vonal GP41, P24, GP120 / GP160;
  • az amerikai FDA kritériumai szerint - a szalagon két, P24, P31 és egy GR41 vagy GR120 / GR160 vonal van.

Az esetek 99,9% -ában az IB pozitív eredménye HIV-fertőzést jelez.

A vonalak hiányában - IB negatív.

A GR160, GR120 és GR41- IB vonalak azonosításakor kétséges. Ez az eredmény kimutatható:

  • onkológiai betegségek;
  • terhesség;
  • gyakori vér transzfuszok.

Ilyen esetekben ajánlott újbóli tanulmányt végrehajtani egy másik cég halmazával. Ha további IB után az eredmény továbbra is kétséges, akkor hat hónapig kell megfigyelni (az IB-t 3 havonta tartják).

Polimeráz láncreakció

A PCR tesztje meghatározhatja a vírus RNS-jét. Az érzékenysége elég magas, és lehetővé teszi a HIV-fertőzés azonosítását 10 nap elteltével a fertőzés után. Bizonyos esetekben a PCR hamis pozitív eredményeket adhat, mivel nagy érzékenysége reagálhat az antitestekre más fertőzésekre.

Ez a diagnosztikai technika drága, speciális felszerelést és magas szakembereket igényel. Ezek az okok nem teszik lehetővé, hogy a lakosság tömeges tesztelésével végezzük.

A PCR ilyen esetekben érvényes:

  • a HIV-fertőzött anyáktól származó újszülöttek HIV azonosítása;
  • a HIV azonosítása az "ablakidőszakban" vagy kétes IB-vel;
  • a HIV koncentrációjának szabályozása a vérben;
  • a donor vérkutatáshoz.

Csak a PCR-teszten, a HIV nem készült, de további diagnosztikai módszerként történik ellentmondásos helyzetek megoldására.


Expressz módszerek

Expressz tesztek, amelyek eredményeit 10-15 perc elteltével értékelhetjük a HIV diagnosztizálásának egyik innovációja. A leghatékonyabb és pontos eredményeket a kapilláris áramlás elvén alapuló immunkromatográfiás vizsgálatok alkalmazásával állítjuk elő. Különleges csíkok, amelyeken a vért alkalmazzák vagy más vizsgált folyadékot (nyál, vizelet). Ha HIV-hez van antitestek, 10-15 perccel később, egy színes és vezérlőcsík jelenik meg a teszten - pozitív eredmény. Negatív eredménnyel - csak a vezérlőcsík jelenik meg.

Az IFA tesztek után az expressz tesztek eredményeit az IB analízissel meg kell erősíteni. Csak ezt követően diagnosztizálható HIV-fertőzéssel.

Vannak kifejezett készlet az otthoni teszteléshez. Teszt Orasure Technologies1 (USA) jóváhagyott FDA, eladott vény nélkül, és felhasználható HIV azonosítására. A tesztelés után pozitív eredmény esetén a beteg ajánlott egy speciális középpontban felmérésben, hogy megerősítse a diagnózist.

A fennmaradó hazai teszteket még nem hagyták jóvá az FDA, és eredményük nagyon kétes lehet.

Annak ellenére, hogy az expressz tesztek alacsonyabbak az IV generációk IFA tesztjeinél, széles körben használják a további népességvizsgálathoz.

A HIV-fertőzés azonosítása bármely poliklinika, CRH vagy szakosodott AIDS-központokban. Oroszországban teljesen bizalmasak vagy névtelenül vannak. Minden beteg számíthat az orvosi vagy pszichológiai tanácsadás megszerzésére analízis előtt vagy után. Csak a kereskedelmi orvosi intézményekben fizetnie kell a HIV-teszteket, és teljesülnek a nyilvános klinikákban és a kórházakban.

Arról, hogy milyen módon fertőzhet fertőzött HIV-fertőzéssel, és mely mítoszok léteznek a fertőzött lehetőségekről, olvashatók

Cikkek a témában