AIDSの診断のための実験方法。 HIV診断：研究方法、テストのタイミング
ヒト免疫不全ウイルス感染- HIV、ウイルス性疾患です。 それは徐々に特定の白血球を破壊し、後天性免疫不全症候群-AIDSを引き起こす可能性があります。
ヒト免疫不全ウイルス（HIV）はレトロウイルスの一種です。 
- レトロウイルスとは何ですか？
- HIVの実験室診断
- 無症候期
- AIDSの発症段階
- HIV診断方法
- PCR（ポリメラーゼ反応）
- エクスプレステスト
- HIV診断の条件と費用
レトロウイルスとは何ですか？
これはゲノムDNAであり、遺伝情報をDNA（他のほとんどの生物はDNAのみを使用）としてだけでなく、RNA（リボ核酸）としても保存します。
今日、HIV感染の次の方法を共有するのが通例です。
- 保護具を使用しない性交
- 周産期の感染経路（子供で観察）
- 輸血中（輸血）
- 汚染された注射器を使用する場合（注射薬中毒者でより頻繁に）
HIVがヒトの細胞に入ると、リボ核酸を放出し、逆転写酵素と呼ばれる酵素を使用してHIV RNAからDNAを複製（コピー）します。
得られたDNAは感染細胞のDNAに組み込まれます。 人間の細胞がRNAとDNAの複製に関与しているため、このプロセスは逆になります。
レトロウイルスとは異なり、ポリオウイルス、インフルエンザウイルス、はしかウイルスなど、RNAの他のウイルス（感染症）は、細胞に入った後にDNAを複製しません。 これらのウイルスは、元のRNAのリボ核酸レプリカを生成します。
HIV感染細胞では、細胞分裂が起こるたびに、細胞自身のDNAに加えて、統合されたHIVのDNAも複製されます。
HIV DNA複製は、次のいずれかの状態にあります。
- 非アクティブ（非表示）状態： ウイルスは存在しますが、人体に悪影響を及ぼしません
- アクティベーションステータス： ウイルスは感染した細胞の機能を支配し、体内の他の細胞に感染する多数の新しいHIV複製を生成し、持続的な後天性免疫不全の状態を引き起こします
治療効果の重要な側面は、病気の正確でタイムリーな診断です。
HIV病理学の最初の実験室研究は、35年以上前に実施されました。
最新の診断には、ウイルス性病原体を検出するための免疫学的、血液学的、および分子的方法の使用が含まれます。 前世紀に使用されたテストシステムは、機能がかなり制限されており、I型レトロウイルスを決定しました。
彼らの技術的能力は免疫グロブリンGの定義を超えていませんでした。
実験室診断の開発と研究方法の改善により、両方のタイプのウイルスを検出することが可能になりました。 
第3世代のテストシステムの出現により、診断機能が大幅に拡張されました。
現在、ウイルスタイプ1-2の検出は、感染から数週間後にすでに可能です。 この最新の診断により、抗レトロウイルス治療の迅速な処方が可能になります。
ウイルスのより深刻な段階であるAIDSを発症するリスクを数十倍低減します。 最新の発明には、第4世代の試験システムが含まれます。 それらは組み合わされた研究方法です。
このシステムは、両方のタイプのHIVに対する抗体を検出し、同時にp24抗原（レトロウイルスヌクレオシドエステル壁タンパク質）を検出するために使用されます。 第4世代のテストシステムのこのような機能により、血清学的ウィンドウが少なくとも1週間短縮されます。 （これは、HIVが抗体の出現なしに体内に存在する期間です）。
HIVの実験室診断
臨床検査は、HIV疾患を診断し、適切な治療法を処方する主な側面です。 さらに、診断は治療の質と患者の健康状態を監視しています。
定期的な実験室試験により、次のことが可能になります。
- 感染過程の経過を制御する
- 治療計画を調整する
- 薬を服用することによる副作用を監視する
標準的なHIVテストでは、患者の血液を検査します。
主な生物学的物質は、朝、食事の前に採取される静脈血です。 
患者からの予備的な特別な準備は必要ありません。
主な準備は、数日間アルコールを飲まないようにすることです。 可能であれば、分析の5〜7日前に抗生物質と抗ウイルス剤の服用を中止してください。
臨床的および免疫学的検査は、州のポリクリニックで実施することができます。 ただし、この場合、一般開業医またはかかりつけ医からの紹介が必要になります。
今日、HIV、AIDS、およびSTDの診断は、匿名でテストに合格することが可能な独立した研究所センターでますます実践されています。 
診断中、患者には彼と施設のスタッフだけが知っている特別な番号が割り当てられます。 ただし、この場合、一定のデメリットがあります。
その後の患者の入院のために、検査結果を診療所に転送することはできません。 婦人科医/静脈科医/感染症専門医には提供されておらず、感染症の登録簿（ORUIB）に入力することはできません。
病気のクリニック：レトロウイルスはどのように現れるのか
HIV疾患の主な伝播様式：
- 性的接触
- 母から子へ（経胎盤、産道、乳汁）
- 輸血、臓器移植の過程で
- 非滅菌注射器で静脈内薬物を注射する場合
言い換えれば、血液や体液との接触がない限り、日常生活でHIVに感染する可能性はほとんどありません。
唾液や涙などの分泌液に含まれるウイルスの量は非常に少ないです。 ウイルスが分泌物に含まれていても、共有バスまたはタオルを使用した場合、これまでのところ感染は報告されていません。
HIVはかなり「壊れやすい」ウイルスであり、体から外部環境に入るとすぐに不活化されます。 病理学的プロセスの臨床症状は、感染の病期によって異なります。
感染の初期段階（急性期）
感染の最初の症状は、感染後2〜3週間で観察されます。
この期間中、HIVの症状は次のとおりです。発熱、喉の痛み、筋肉の痛み、発疹、リンパ節腫脹、頭痛、疲労など。インフルエンザまたは喉の痛み（通常は単球型）の症状が現れます。
病気の初期の兆候は、患者に数日から1か月以上かかることがあり、多くの場合、自然に消えます。 
この期間中に病気を診断することは、患者にとって最も有益であると考えられています。 感染の初期段階での抗レトロウイルス薬による治療は、最も肯定的な結果を示しています。
重要！ 性的に感染した感染症（梅毒、性腺炎、HPV、クラミディアなど）のある患者は、HIVの検査を受けることをお勧めします。 レトロウイルスの患者では、STDの並行コースがしばしば検出されます。
無症候期
感染後の免疫反応（CTL誘導または抗体産生）によりピークに達する血中のウイルス量は、6〜8ヶ月後に一定のレベルまで減少し、無症候期になります。 このフェーズは数年間続く可能性があります。
その後、それは悪化の期間によって置き換えられます：インフルエンザの症状、病気、リンパ節の腫れ。 この期間中、患者は他の感染症（STD、肝炎、ヘルペス、結核）に対してこれまで以上に脆弱になります。
AIDSの発症段階
感染後の抗HIV療法がないと、感染が進行し、CD4陽性T細胞が急速に減少します。 CD4の細胞数が200 / mm 3以下の場合、肺炎、結核などの日和見感染症が90％の確率で発症します。
さらに、CD4リンパ球数が50 / mm 3未満の場合、サイトメガロウイルス感染、非定型マイコバクテリア症（93％の症例）、原発性CNSリンパ腫、および悪性腫瘍を発症する可能性が高くなります。 患者は、食欲の急激な低下、食欲不振までの体重減少、下痢、脱力感などが優勢な絶え間ない排便障害を持っています。
病因、病因、疫学：HIVは、免疫系の細胞に影響を及ぼし、AIDS、日和見感染、および腫瘍学の発症を引き起こす、RNA含有病原体のファミリーに由来するウイルスです。 2011年に提供された統計によると、HIVの6,200万人の患者が世界で登録されています。
患者が抗レトロウイルス療法に頼っている限り、ウイルス負荷を大幅に抑制することができます。 
しかし、残念ながら、体からウイルスを完全に排除することは不可能です。 したがって、できるだけ早く病気を診断し、適切な治療を開始することが非常に重要です。
HIV診断方法
HIV感染を特定するための診断手段には、次の2つの段階があります。
- 感染の事実の特定（体内のレトロウイルスの存在）
- プロセスの段階を決定する（感染が発生したのはどのくらい前で、免疫系の細胞がどれほどひどく影響を受けたか）
診断結果は、治療の戦術を決定し、病気のさらなる経過を予測するのに役立ちます。
感染性、ウイルス性、細菌性の病状を検出するためのさまざまな血清学的方法があります。 HIVを診断する場合、通常、以下の血清学的検査が使用されます。
ELISA（酵素免疫測定法）
体内のレトロウイルスの存在を確認/拒否する必要がある場合に最も頻繁に処方される分析です。
分析は、病原体が人体に侵入する間に形成されるウイルスに対する抗体の測定に基づいています。 診断方法の有益な価値は96％に達します。
ただし、抗体がまだ存在しない段階で試験を実施すると、偽陽性の結果が得られる可能性があります。 この場合、2〜3か月で繰り返しELISAテストが処方されます。 
しかし、可能な限り早い日に感染を検出できるPCR分析を実施する方がはるかに便利です。
患者が以下の場合、偽陽性の結果を得る可能性もあります。
- 自己免疫性の病状
- 慢性的な形で発生する感染症
- 腫瘍性疾患
そうでなければ、この結果は妊娠初期の存在下で得ることができます。
免疫ブロッティング（ウエスタンブロット）
分析の特異性は、HIV感染のタンパク質を特定することを目的としています。
通常、診断は確認テストとして行われます。 結果が陽性であれば、「ヒト免疫不全ウイルス」の最終診断が可能になります。
標準的なウエスタンブロッティングでは、結果に3つのバリエーションがあります。ポジティブ、ネガティブ、疑わしいです。 最初の2つのケースでは、デコードは単純です-HIVは存在しない/存在します。
疑わしいオプションは、原則として、体内にHIVが存在することを意味します。 しかし、感染があったのは3か月前で、体が抗体の全範囲を開発する時間がなかったときです。
また、疑わしい結果を得るのは、血液輸血の操作を繰り返し受けた結核、悪性病変の患者に典型的です。
PCR（ポリメラーゼ反応）
この方法の本質は、ウイルスのDNAとそのRNAを決定することです。 これは、病原体を検出するための最も有益で正確な方法です。
レトロウイルスに対する抗体が形成される前でも、感染の初期段階でHIVを検出できます。 PCRの感度は99％であり、誤った結果を得るのはほぼ不可能です。
ポリメラーゼ反応は、以下の目的で患者に処方されます。
- 他の実験室試験中に得られた疑わしい結果の場合、人体におけるHIVウイルスの存在または不在を示します
- レトロウイルス（HIV-1、HIV-2）の種類の特定、およびウイルスによって引き起こされる身体への負荷の確立
- 病気の母親から生まれた子供の地位を確立する
- 後で輸血に使用される血液中の病原体の検出
PCRは、摂取後7〜10日でレトロウイルスを検出できる最も正確なテストです。 
この場合、この期間の結果の精度は98〜99％になります。
ただし、PCRにはいくつかの特性があるため、数回処方することができます。 感度が高いため、このアッセイはレトロウイルスだけでなく応答することもできます。 しかし、体内で発生する最も重要でない感染プロセスについても同様です。 したがって、1回のポリメラーゼ反応後の最終診断は行われません。
PCRの次の機能は、最新の高価な機器の必要性です。 したがって、分析は政府の診療所では実施されません。 テストは現代の研究所で行われ、分析のコストは1000ルーブルから始まります。
エクスプレステスト
緊急の手術が必要な緊急時に処方されます。
研究のための生物学的材料は尿です。 一部の専門家によると、エクスプレステストの精度は最大96％ですが、それでも追加のテストです。 この研究の結果に基づいて、診断は行われません。
必須の場合、ELISAまたはPCRが実行されます。
HIV診断の条件と費用
既成の分析を取得するのにどのくらい時間がかかりますか？
分析結果についての研究所センターからの回答は、施設の作業負荷に応じて、数日後に受け取ることができます。
また、多くのセンターには、数時間後に結果を得ることができる追加のサービス「緊急テスト」があります。
価格設定ポリシーに関しては、コストは選択した研究所と研究方法によって異なります。 
したがって、コストは500ルーブルから始まり、10,000〜15,000に達する可能性があります。
Western Blotの価格は2500ルーブルから始まり、3000〜4000に達する可能性があります。 2〜5日後に完成した結果を得ることができます。
両方のタイプのレトロウイルス、およびそれらのRNAとDNAを測定してリアルタイムPCRを実行すると、コストは5,000ルーブル以上に達する可能性があります。 診断期間は5日から10日です。
ロシア連邦の現行法によれば、政府機関で実施される免疫学的研究は無料で提供されます。 妊娠中の患者、術前の患者、臓器または組織の一部の提供者には、HIV検査が義務付けられています。
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最悪 ベスト
HIV感染の検査は以下の対象となります。
2.診断が疑われる、または確認された人：13歳未満の小児における細菌感染、複数回および再発。 食道、気管、気管支または肺のカンジダ症; 頸部浸潤癌; 播種性または肺外コクシジウム菌症; 肺外クリプトコッカス症; 1ヶ月以上下痢を伴うクリプトスポリジウム症; 1ヶ月以上の患者の肝臓、脾臓、リンパ節を除く他の臓器のサイトメガロウイルス病変; 視力喪失を伴うサイトメガロウイルス網膜炎; 1ヶ月以内に治癒しない多発性潰瘍、または気管支炎、肺炎、食道炎を引き起こすヘルペス感染; 播種性または肺外組織形質症; 1ヶ月以上下痢を伴う等胞子症; 結核の蔓延または肺外; 13歳以上の成人または青年における肺結核; 肺外結核; 播種性または肺外のM.tuberculosis以外のマイコバクテリアによって引き起こされる他の疾患; 肺嚢胞によって引き起こされる肺炎; 進行性多発性白質脳症; サルモネラ（Salmonella typhiを除く）敗血症、再発; トキソイラーゼ-1ヶ月以上の子供の脳のモザイク; カポシの肉腫; 13歳未満の小児におけるリンパ性間質性肺炎; バーキットリンパ腫; 免疫芽球性リンパ腫; 原発性脳リンパ腫; 消耗症候群、B型肝炎、HBsAg保菌; 感染性単核球症; 60歳以上の人々の再発性ヘルペス帯状疱疹; 性的に伝染する病気。
高度に専門化された研究所は以下を実行します。
a）血中を循環している抗体、抗原および免疫複合体の測定; ウイルスの培養、そのゲノム物質および酵素の同定;
b）免疫系の細胞リンクの機能の評価。 主な役割は、抗体、ならびに血液および体の他の体液中の病原体の抗原を決定することを目的とした血清学的診断の方法に属する。
HIV抗体検査は、次の目的で実行されます。
a）輸血および移植の安全性;
b）監視、HIV感染の有病率を監視し、特定の集団におけるその有病率のダイナミクスを研究するためのテスト。
c）HIV感染の診断、すなわち、HIV感染またはAIDSと同様のさまざまな臨床的兆候および症状を有する実質的に健康な人々または患者の血清の自発的検査。
HIV感染の実験室診断システムは、3段階の原則に基づいています。 最初の段階はスクリーニングであり、HIVタンパク質に対する抗体の存在について一次血液検査を行うように設計されています。 第2段階は参照段階です。これにより、特別な方法論的手法を使用して、スクリーニング段階で得られた主要な陽性結果を明確化（確認）することができます。 3番目のエタン-専門家は、実験室診断の前の段階で特定されたHIV感染のマーカーの存在と特異性の最終的な検証を目的としています。 実験室診断のいくつかの段階の必要性は、主に経済的考慮によるものです。
実際には、十分な信頼性でHIV感染を特定することを可能にするいくつかのテストが使用されます。
最初のレベルのELISA（ELISA）テスト（酵素結合免疫吸着アッセイ）検出は、以下よりも特異性は低いものの、高感度を特徴としています。
免疫ブロット（ウエスタンブロット）、HIV-1とHIV-2を区別するための非常に特異的で最も使用されるテスト。
感染の初期段階で有効なP25抗原血症検査。
ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）。
血液サンプルの大量スクリーニングの場合、各サンプルの最終希釈率が1：100を超えないように編集された、被験者のグループからの血清の混合物をテストすることをお勧めします。 血清電流混合物が陽性の場合、各血清陽性混合物が試験されます。 この方法では、ELISAとイムノブロットの両方で感度が低下することはありませんが、人件費と初期検査の費用が60〜80％削減されます。
HIV感染の一次血清診断中に、総抗体はスクリーニングスクリーニングテスト（ELISAおよび凝集反応）を使用して決定されます。 2番目の（調停）段階では、より複雑なテストが使用されます。これは、最初の結論を確認または拒否するだけでなく、個々のウイルスタンパク質に対する抗体を決定するレベルでこれを行うことを可能にするイムノブロットです。
リンクされた免疫吸着アッセイ （ELISA）は、HIVに対する抗体を測定するための主要で最も広く使用されている方法です。 しかし、HIV感染の血清診断にELISAを使用することの不利な点には、頻繁な偽陽性の結果が含まれます。 この点で、ELISAの結果は、被験者のHIV血清陽性についての結論の根拠にはなりません。 これは、バラストタンパク質からの免疫吸着剤の精製が不十分なためです。 免疫吸着剤が占めていない領域が十分に遮断されていないか、完全に特殊な中性タンパク質によって遮断されていない場合、血清抗体のプラスチックへの自発的結合。 多発性硬化症、SLE、結核などの特定の、より頻繁には自己免疫性の病理学的プロセスを有する個人の血液中に存在する様々なタンパク質の免疫吸着剤のHIVタンパク質との相互作用; 頻繁な寄付、感染症および腫瘍性疾患、火傷、妊娠、繰り返しの血液輸血、臓器および組織の移植、ならびに血液透析を受けている人々。 血中にリウマチ因子が存在し、HIV偽陽性反応を引き起こすことがよくあります。 検査を受けた人々の血中のHIVgagタンパク質に対する抗体、そしてまず第一に、p24タンパク質に対する抗体の存在（明らかに、外因性または内因性の、まだ同定されていないレトロウイルスに対する抗体が形成されます）。 抗p24は、HIV血清変換の初期段階で確実に合成されるため、HIV gagタンパク質に対する抗体を持つ人のさらなる免疫学的観察、および寄付からの削除が行われます。
酵素結合免疫吸着アッセイの感度と特異性は絶えず増加しています。 その結果、第4世代ELISAは、免疫ブロッティングよりも診断能力が劣らず、スクリーニングだけでなく、HIV感染の診断の確認段階でも使用できます[Smolskaya T. T.、1997]。
イムノブロッティング は血清学的診断の最終的な方法であり、被験者のHIV陽性または陰性について最終的な結論を出すことを可能にします
イムノブロットとELISAの血清の研究結果の間には明確な相関関係があります-異なるテストシステムを使用したELISAでは2回陽性であり、97〜98％の症例の血清がイムノブロッティングでHIV陽性であることが判明しました。 使用した2つのテストシステムの1つでのみELISAで血清が陽性であった場合、イムノブロットでは4％の症例でのみ陽性でした。 症例の5％で、陽性データのある人で確認研究を行うと、ELISA-免疫ブロットは「不確定」な結果をもたらす可能性があり、そのうち約20％の症例では、「不確定」な結果がHIV-1 gagタンパク質に対する抗体を引き起こします（p55、p25、p18 ）。 HIV-1のgagタンパク質のみに対する抗体の存在は、HIV-2感染について血清をさらに検査する理由です。
イムノブロッティングの結果の評価は、テストシステムに添付されている指示に従って厳密に実行されます。 指示の結果の解釈に関する指示がない場合は、WHO基準を使用する必要があります。
HIV感染の実験室診断の基準段階での研究の陽性結果と免疫ブロッティング法による研究の陰性結果を受け取った後、最初の検査の6ヶ月後に強制的な反復専門家診断が実施されます。
最初のサンプルの研究から12か月後のイムノブロッティングの結果が陰性または不確実なままである場合、リスク要因、臨床症状、またはHIV感染に関連するその他の要因がない場合、対象は診療所の観察から除外されます。
血清学的方法の中で、結果が不確かな場合、免疫ブロットが専門家の診断として使用されます 放射性免疫沈降 （RIP）。 これは、放射性ヨウ素で標識されたウイルスタンパク質の使用に基づいており、沈殿物はベータカウンターを使用して検出されます。 この方法の不利な点は、設備の高コスト、これらの目的のための設備の必要性、特別な部屋を含む。
HIV感染症と診断された人は、6か月ごとに強制的な臨床検査を伴う絶え間ない動的観察の対象となります。
ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）は、特定の病原体のゲノムに特異的な事前に増殖したヌクレオチド配列を明らかにします。 増幅と呼ばれる遺伝子またはそのフラグメントの単離された増殖、PCRは酵素熱安定性DNAポリメラーゼを使用してinvitroで実行することを可能にします。 PCRを使用すると、2〜3時間で、ウイルスの特定の領域の何百万ものコピーを取得できます。 HIV感染症では、ウイルスのRNAを含む細胞RNAから、細胞内で複製されているか、ゲノムに組み込まれている場合、逆転写と、分析用の標識オリゴヌクレオチド「プローブ」とのハイブリダイゼーションによって十分な量のプロウイルスDNAが得られ、検出および定量化されます。 、およびHIVゲノムに属することに関連して、プローブの放射性または他のラベルによって、DNAおよびウイルス特異的アミノ酸配列の相同性を確立します。 PCR感度は、5000個に1個の細胞でウイルス遺伝子を検出することです。
定量的を含むPCRは、患者の薬物治療の開始または抗レトロウイルス薬の変更の問題を解決するために、血漿へのウイルス負荷を決定するためにのみ使用できます。 PCRは、HIV感染の診断には推奨できません。これは、そのステートメントと試薬の最新の方法でさえ、特定のレベル（50コピー/ ml）以上のウイルス負荷を決定できるためです。 また、PCRの複雑さとその高コスト（約200ドル）は、HIV感染の毎日の実験室診断の方法としての大規模な使用を否定します。 したがって、PCRは、患者の治療の問題を解決するために、HIV感染の診断がすでに確立されている患者の血漿へのウイルス負荷を評価するためにのみ不可欠なままです。
HIV感染の検査室診断の段階を図1に模式的に示します。 1.1。
図： 1.HIV感染の実験室診断の段階
HIV感染の間、HIVに対する抗体の量がテストシステムの感度に対して不十分である「暗い実験室ウィンドウ」の期間があります。 この期間は、テストシステムの感度レベルに応じて、HIV感染の瞬間から1週間から3か月の範囲です。 この現象を考えると、前述のHIV感染期間にある人から寄贈された血液を調べるときに困難が生じます。 したがって、世界のほとんどの国では、血液を使用するシステムは、これらの用量の血液とその成分のドナーのHIV感染の強制的な再検査を実施するために、3〜6か月間保管された後にのみ導入されています。
一次症状の段階は、複製プロセスの活動によって特徴付けられます。 新たなウイルス血症と抗原血症は、IgMクラスの特異的抗体の形成を引き起こします：抗p24、抗gp41、抗gp120。 一部の感染者のp24抗原は、感染の2週間後にELISAによって血中で検出され、最大8週間まで測定されます。 さらに、HIV感染の臨床過程では、血液中のp24タンパク質含有量が2回目に上昇します。これは、AIDS段階の形成中に発生します。
HIV gp41、p24、gpl20の構造タンパク質に対する高レベルの特異的IgG抗体が末梢血に記録された場合の完全な血清変換の出現は、HIV感染の診断を大いに促進します。 ほとんどの市販のキットは、まさにそのような抗体を表示するために設計されています。
血液中の利用可能な特定の抗体がウイルス粒子の結合に費やされ、複製プロセスが新しい抗ウイルス抗体の産生を上回っている場合、HIV感染患者の抗体を検出する際の困難は、大量のウイルス血症および抗原血症の期間中に発生する可能性があります。
最初に免疫系が弱くなった個人では、ウイルス血症と抗原血症が早く現れ、病気の結果が出るまで高レベルのままです。 同時に、このような患者は、Bリンパ球による抗体の不十分な産生と抗体によるビリオンと可溶性HIVタンパク質の結合という2つの理由により、HIVに対する遊離抗体の含有量が低いため、感染を判断するには、感度を高めたテストシステムまたは分析方法の変更が必要です。 免疫複合体から抗体を放出するステップ。
HIV感染の特定のマーカーが豊富にあるにもかかわらず、最も頻繁に検出されるのは、HIVタンパク質に対する総抗体の存在です。 「合計」という用語は、2つのクラスの抗体（IgGおよびIgM）と、さまざまな、主に構造的なHIVタンパク質に対する幅広い抗体の存在を意味します。
CD4細胞の測定。 HIV感染の段階を診断するための主な臨床的および実験的指標である、日常生活における患者の免疫系の破壊の程度は、CD4 +リンパ球の含有量の決定でした。200細胞/ mm3未満のレベルの低下がAIDSを診断するための主な基準です。 CD4 +リンパ球数が200細胞/ mm3以下のすべてのHIV感染者は、抗ウイルス療法と肺嚢胞性肺炎の予防の両方が必要であると考えられています。 また、200細胞/ mm3未満のC04 +リンパ球の数で感染したHIVの1/3には臨床症状はありませんが、経験によれば、次の2か月で症状が現れるため、すべてAIDSの患者と見なされます。
1.血清学的方法 HIV感染の診断の標準であるHIVに対する抗体（抗体）の検出（合成ペプチドに基づくELISAテストシステムは、ほぼ100％の感度と特異性を持っています）。 ELISAを使用すると、HIV AHを検出できます。これは、初期感染の指標となる可能性があり、逆に、HIV感染の進行が遅い（p24 AH）
2.確認テスト -イムノブロッティング（IB）、間接免疫蛍光（NIF）および放射性免疫沈降（RIP）。
a）WHOは、血清が2つのエンベロープタンパク質およびHIVの内部タンパク質の1つに対する抗体を含む場合、陽性と見なすことを推奨しています。 ELISAは陽性であるが、IBの結果が不確かな患者は、臨床的に検査し、他の方法、医学的検査、免疫学的検査によって評価し、3〜6か月後に血清をHIVに対する抗体について検査する必要があります。
b）間接免疫蛍光（NIF）の方法-多くの実験室で確認試験として、またはスクリーニング試験として使用されます。
c）放射性免疫沈降は、放射性同位元素で標識されたアミノ酸の使用に基づく高感度で特異的な方法です。 この方法は、表面タンパク質に対する抗体の検出に非常に感度が高く、したがって、ウイルスのこれらの成分が血清変換後にほとんどすべてのHIV感染患者に存在するため、非常に特異的です。
3.分子生物学的方法：核酸の分子ハイブリダイゼーションの方法、PCR
PCRが使用されます：
1）実験室診断の血清学的方法に関連して、体内のウイルスの存在を検出するための代替の追加の確認方法として。
2）特定の抗ウイルス抗体がまだ利用できない場合の初期HIV感染の診断における特定分析の最初の方法として。
3）HIVに感染した母親からの新生児のHIV感染の診断のため。
4）ウイルス負荷と特定の抗レトロウイルス療法の任命およびその実施の管理を決定すること。
5）血清学的結果が不明確な場合、および血清学的分析と文化的分析が一致しない場合の明確化方法として。
6）HIV感染者の性的パートナーを調べるとき。
7）HIV-1とHIV-2の鑑別診断の方法として。
4.ウイルス学的方法.
HIV感染症の治療：
1.抗レトロウイルス療法の原則：重大な免疫不全が発症する前に治療を開始する必要があります。 初期治療には、少なくとも3つの薬の組み合わせを含める必要があります。 治療法の変更は、少なくとも2つの新薬の交換または接続で構成する必要があります。 CD4 +細胞のレベルとウイルス負荷を測定することは非常に重要です。 感度の高い技術の検出限界を下回るレベルへのウイルス負荷の減少は、治療に対する最適な反応を反映しています。
2.最新の抗レトロウイルス薬には3つのグループがあります。
a）ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤（NRTI）：ジドブジン（アジドチミジン、レトロビル）; ジダノシン（ddI、videx）; ザルシタビン（ddC、hivid）; stavudine（zerit、d4T）; ラミブジン（3TC、エピビル）; アバカビル; アデフォビル; コンビビル（ジドブジン+アバカビル）; トリシビル（ジドブジン+ラミブジン+アバカビル）; アデフォビル（ヌクレオチド逆転写酵素阻害剤）。
b）非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤（NNRTI）：デラベルジン（記述子）; ネビラピン（ビラムネ）; efavirenz。
c）プロテアーゼ阻害剤（PI）：サキナビル; リトナビル（norvir）; インディナビル（クリキシバン）; ネルフィナビル（ビラセプト）; アンプレナビル（アゲンラーゼ）; ロピナビル（アルビラン）; カレトラ（ロピナビル+リトナビル）。
3.薬物による単剤療法では、HIV複製を十分に顕著かつ長期的に抑制することはできません。 さらに、単剤療法では、耐性株が出現し、同じグループの薬剤に対する交差耐性が発生するリスクが高まります。 唯一の例外は、周産期のHIV感染のリスクを減らすためにジドブジンを単独で使用することです。
4.治療の有効性に関する最も重要な基準は、ウイルス負荷のダイナミクスであり、これを決定する必要があります。治療なし-6〜12か月ごと、治療中-3〜6か月ごと、および抗ウイルス治療開始後4〜8週間。
抗レトロウイルス療法に加えて、二次疾患の治療が必要です。
34.3エイズ（臨床的変異、日和見疾患）。
日和見病 -免疫抑制の増加を背景に発症し、免疫系が正常に機能している人には発生しない重度の進行性疾患（AIDS指標疾患）。
a）最初のグループ 重度の免疫不全（CD4 +）にのみ特徴的な疾患です< 200 кл/мкл) и поэтому определяют клинический диагноз: 1. Кандидоз пищевода, трахеи, бронхов. 2. Внелегочный криптококкоз. 3. Криптоспоридиоз с диареей более 1 месяца. 4. Цитомегаловирусная инфекция с поражением различных органов, помимо печени, селезенки или лимфоузлов. 5. Инфекции, обусловленные вирусом простого герпеса, проявляющиеся язвами на коже и слизистых оболочках. 6. Саркома Капоши у лиц, моложе 60 лет. 7. Первичная лимфома мозга у лиц, моложе 60 лет. 8. Лимфоцитарная интерстициальная пневмония и/или легочная лимфоидная гиперплазия у детей в возрасте до 12 лет. 9. Диссеминированная инфекция, вызванная атипичными микобактериями с внелегочной локализацией. 10. Пневмоцистная пневмония. 11. Прогрессирующая многоочаговая лейкоэнцефалопатия. 12. Токсоплазмоз с поражением головного мозга, легких, глаз у больного старше 1 месяца.
b）2番目のグループ -重度の免疫不全を背景に、場合によってはそれなしで発症する可能性のある疾患：1。13歳未満の子供に併発または再発する細菌感染症（2年間の観察で2例以上）：敗血症、肺炎、髄膜炎、病変 骨または関節、ヘモフィルスインフルエンザによって引き起こされる膿瘍、連鎖球菌。 2.播種性コクシジウム菌症（肺外局在）。 3.HIV脳症4.肺外局在を伴う播種性組織形質症。 5.1か月以上持続する下痢を伴う等胞子症。 6.あらゆる年齢の人々におけるカポシの肉腫。 7. B細胞リンパ腫（ホジキン病を除く）または免疫表現型が不明なリンパ腫。 8.肺外結核。 9.サルモネラ敗血症、再発。 10.HIVジストロフィー。
肺嚢胞性肺炎、クリプトコッカス性髄膜脳炎、全身性サイトメガロウイルス感染症（脳炎、網膜炎、食道炎、肝炎、大腸炎）、混合病因の敗血症、全身性カポシ肉腫、肺結核が最も一般的です。
これらの病気はすべて、脳、肺、肝臓、胃腸管などの1つまたは複数の臓器やシステムに損傷を与えて発生し、重症で進行性です。 AIDS指標疾患はさまざまな組み合わせで現れ、適切な治療でさえ期待される効果をもたらさない。
AIDSの臨床的変異体：さまざまな診療所の普及率に応じて、感染性、神経性、癌性のAIDS。
1つ目は、HIVに感染しているすべての人を識別するように設計されており、2つ目は、HIVに感染していないが、スクリーニングテスト中に陽性反応を示した人を識別するように設計されています。 したがって、スクリーニングテストは非常に感度が高く、つまり、偽陰性の結果はほとんど得られず、確認テストは非常に特異的です。つまり、偽陽性の結果はほとんど得られません。 これらのテストを組み合わせると、汚染された血液製品を検出し、HIV感染を診断する正確で信頼性の高い結果が得られます。 ただし、これらのテストの精度を低下させる生物学的要因があります。 実験室のエラーも発生する可能性があります。 したがって、HIV抗体検査を実施するすべての研究所は、これらの検査のための非の打ちどころのない品質管理プログラムを備えている必要があります。 臨床検査の信頼性が100％になることは決してなく、その結果は常に臨床診断への追加と見なされるべきであることを忘れてはなりません。
感染の初期段階におけるウィンドウ期間とHIV感染の検出：
HIVに対する抗体は感染後すぐに発達し始めますが、それらの出現のタイミングは多くの要因、特に患者の免疫系の状態とウイルスの特性に依存します。 抗体は感染後の初期段階ですでに血中に存在している可能性があることに注意することが重要ですが、それらの濃度はいくつかの方法の検出限界（ウィンドウ期間）を下回っています。 最初のテストシステムでは、感染後6〜12週間でほぼすべてのHIV感染患者で抗体が検出されました。 第3世代トラップELISAを含む最新のテストシステムは、感染後3〜4週間で抗体を検出します。 感染からHIV感染の診断までの時間は、HIV抗原を検出する方法を使用すると数日、HIVRNAを検出する方法を使用するとさらに数日短縮できます。 説明されているすべての方法を使用すると、ほとんどの患者のHIV感染の診断は、感染後2〜3週間以内に確立できます。 HIVに対する抗体をスクリーニングするための市販の試験システムは、HIVに感染した大部分を検出するのに十分な、非常に高くほぼ同じ感度を持っています（いわゆる疫学的感度）。 ただし、テストシステムが異なれば、分析感度、つまり、血清変換が完了する前に発生する低レベルの抗体を検出する能力が異なります。
HIVに対するIgM抗体を検出するように設計されたテストシステムがありますが、IgM抗体は必ずしも感染後早期に生成されるとは限らないため、HIV感染の早期診断に広く適用されることはありません。 一部の第3世代テストシステムは、HIVに対するIgM抗体とIgG抗体を同時に検出し、分析感度が高くなっています。
参照：後悔のないHIV状態の開示、鼻中隔の湾曲、血管動脈瘤：健康への潜在的な脅威、出生前スクリーニング; 染色体異常、潜在的ストラビスムス（Strabismus潜在性、ヘテロフォリア）、潜在的リスク：女性と心臓病、潜在的梅毒（Syphilis latens）、リアルタイム逆転写ポリメラーゼ連鎖反応プロトコル（RT-PCR RT、リアルタイムRT-PCR）CDC for インフルエンザA（H1N1）ウイルスの検出と調査、歯ぎしり（bruxism）、注意：隠れたアレルゲン
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HIV感染の実験室診断
HIV感染を診断する場合、4つのグループの方法が使用されます。
1.患者またはHIV感染者からの材料中のウイルス、その抗原またはRNAのコピーの存在の決定
表面（gp120およびgp41）および内部（p18およびp24）HIVタンパク質に対する特異的抗体の検出に基づく血清学的診断。
3.HIV感染に対する免疫系の病的（特異的）変化の特定。
日和見感染症（AIDS関連疾患）の検査室診断。
1.ウイルス学的診断。 HIVを分離するための材料は、血液Tリンパ球、骨髄白血球、リンパ節、脳組織、唾液、精子、脳脊髄液、血漿です。
得られた材料に、Tリンパ球（H9）の連続培養を接種します。 細胞培養におけるHIVの表示は、CPE（シンプラストの形成）、および免疫蛍光法、電子顕微鏡法、逆転写酵素の発現活性によって行われます。
最新の研究方法では、1000細胞あたり1つの感染リンパ球を検出することが可能です。
感染したTリンパ球のウイルス抗原の検出は、モノクローナル抗体を使用して実行されます
近年、ポリメラーゼ連鎖反応（TTCR）法（いわゆるウイルス負荷）による血漿中のHIV RNAのコピー数の決定は、HIV感染の予後と重症度を決定するために決定的に重要になっています。
治療を受けていない患者で、ウイルス負荷が検出限界を下回っている場合（これは、1mlの血漿中のHIVRNAの5000コピー未満です）、これは進行がないか、進行が遅いことを示します。 感染性の程度は最小限です。 CO4リンパ球数が1μlで300未満の患者の高いウイルス負荷（1 mlの血漿に10,000コピーを超えるRNA）は、常に疾患の進行を示します。
血清学的診断。 現在、それは最大の分布を受けています。
研究用材料：5ml。 ヘパリン化された血液。冷蔵保存できますが、実験室に送る前に6〜8時間凍結することはできません。
AIDSの血清学的診断の目的で、標準的な酵素結合免疫吸着システム（ELISA）を使用した酵素結合免疫吸着アッセイ法が主に使用されます。
これはスクリーニング方法です。 操作の原理は、直接ELISAの古典的な原理に基づいています。 免疫吸着剤は、HIVからまたは合成的に得られた不活化ウイルス特異的抗原が固定化されたポリスチレンプレートです。
次に、試験血清を希釈して加える。 インキュベーションは、抗原を含むウェルで行われます。 AGとATの結合後、結合していないタンパク質を3回洗浄した後、酵素標識を使用したヒト免疫グロブリンに対する抗体のコンジュゲートをウェルに導入します。
特定の複合体AG + ATの形成は、酵素の基質（オルトフェニレンジアミンと過酸化水素の溶液）を加えることによって検出されます。
その結果、培地の色は抗体の量に比例して変化します。 研究の結果は、分光光度計で考慮されます。
ELISAデータによるとウイルス特異的抗体を有する血液血清は、免疫ブロッティングによってさらに調査されるべきである。
免疫ブロッティングは、さまざまなHIVタンパク質に対する抗体を検出するための確認テストです。
これは、ポリアクリルアミドゲルでの電気泳動によるHIVタンパク質の予備的な分子量分画（分離）と、それに続くニトロセルロース膜への抗原の移動に基づいています。 次に、試験血清を膜に適用します。 この場合、特定の抗体は特定のAGと複合体を形成します（gp.120、gp.41、p.24、p.18）。 研究の最終段階は、さまざまなHIVタンパク質に対する抗体の同定です。
このために、酵素または放射性同位元素で標識されたヒトタンパク質に対する抗体がシステムに追加されます。
したがって、患者の血清では、HIV抗原のすべてまたはほとんどに対するウイルス特異的抗体が検出されます（または検出されません）。
3.免疫状態の研究。 識別を目的：
1）CD4 / CD8細胞の比率の減少（N 2以上、AIDS-0.5および<);
2）CD4細胞の含有量の減少（<200 клеток/мл.);
3）貧血、白血病、血栓症、リンパ球減少症を含む実験的兆候の1つの存在;
4）血清中のIgAおよびIgGの濃度を増加させる。
5）マイトジェンへのリンパ球芽球形質転換の反応を減らす。
6）いくつかの抗原に対するGTZの皮膚反応の欠如;
7）循環免疫複合体のレベルを上げる。
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HIV1 / 2に対する抗体 -血漿の成分、タンパク質の性質。HIV感染の増殖を防ぎ、悪影響を完全に中和します。
HIV 1/2抗体検査（スクリーニング）とは
HIV 1,2に対する抗体のスクリーニング検査は、免疫不全ウイルスに感染した個人を特定できる検査システムです。 これらに加えて、いわゆる確認（補助）テストがあります。そのタスクは、ウイルスに感染していないが、スクリーニング中にウイルスに対して陽性反応を示した人を特定することです。
HIV感染のスクリーニング研究の本質は、免疫不全ウイルスに対する抗体の測定です。
その特徴的な機能は、感度の向上です-99.5％以上。 テストの特異性は、患者の体に自己抗体が含まれている場合、スクリーニングによって偽陽性の結果が得られる可能性があることです。
患者の肝疾患、インフルエンザワクチン接種、または急性ウイルス性疾患の存在の場合にも、同じ結果を検出できます。 これに基づいて、正確な結果を得るために、スクリーニングとともに、通常、上記の確認試験を行うのが通例である。
分析のための適応
医療行為では、スクリーニング検査の適応症はかなり広範囲に及びます。
以下の場合、患者は研究室に連絡することができます。
- 感染の疑いの出現（HIV感染の保因者との密接な接触があった場合）;
- 体重減少、発熱を伴う;
- 従来の治療法に反応しない肺炎;
- 未知の理由で発生した慢性的な性質の疾患;
- 外科手術の準備中;
- 輸血;
- 妊娠と家族の計画;
- 炎症を起こしたリンパ節を伴う;
- カジュアルな性交。
特別な危険にさらされている人：麻薬中毒者と無差別な性生活をしている人。
HIV抗体スクリーニング1/2はどうですか
この手順は、いくつかの必要なルールへの準拠を意味します。
- 患者は空腹時にのみ血液を提供しなければなりません（水を飲むことは許可されています）。
- 最後の食事から少なくとも8時間が経過する必要があります。
- 医師は、患者がどのような薬を服用しているかを通知され、投与量を知っている必要があります（短期間の離脱の可能性さえない場合）。
- 患者が薬の使用を延期できる場合は、操作日の10〜15日前にこれを行うことをお勧めします。
- 試験開始の前日には、揚げ物や脂肪分の多い食品の摂取を拒否することをお勧めします。また、アルコール飲料の飲用、喫煙、および重い身体活動の制限も禁止されています。
免疫不全ウイルスの保因者である母親から生まれた子供における感染の存在についての実験室試験には、独自の詳細があることに注意する必要があります。
子供の人生の最初の数ヶ月で、HIVに対する母体の抗体が彼の血中に存在する可能性があるため、分析の結果に基づいて新生児の健康の客観的な画像を取得することは不可能であり、否定的な結果でさえ、ウイルスが胎盤関門を通過できなかったことを意味しません。
正確なデータを取得するには、赤ちゃんの誕生から36か月以内にテストを実行する必要があります。
「現代の診断」の方向へのサービス
「現代の診断」の方向へのクリニック
HIV抗体をテストまたはスクリーニングする前に、2つの広い、しかし非常に明確な目標があります。それは、症例発見と疫学的監視です。 症例が特定された場合、最初のステップは、適切な治療または適切な措置によるフォローアップのために、特定の各個人のHIV感染状態を明らかにすることです。
監視の目的は、HIVの有病率、感染の分布、およびグループまたは集団全体におけるそれらの傾向を評価することです。
HIVに対する抗体のテストの感度は、サンプル内のこれらの抗体を正確に検出する能力の尺度であり、テストの特異性は、抗体がサンプルに存在しない場合に抗体が存在しないことを正確に確認する能力の尺度です。
理想的には、テストの感度と特異性は100％に達する必要があります。 実際には、この要件を満たす生物学的試験は1つもありませんが、使用されるHIVに対する抗体の試験は、現在利用可能な最も感度が高く特異的な試験の1つです。
AIDSの実験室診断は、この病気の疑いのある病気の人からの材料のウイルス学的、血清学的、免疫学的研究を実施することにあります。
ウイルス学的研究では、単核血液細胞の初代培養を使用してウイルスを分離することができます。
ウイルスの分離と同定は方法論的に複雑であり、専門の研究所で行うことができます。 日常的な大量検査に現在使用されている最も効果的な診断方法は、ヒト免疫不全ウイルスに対する抗体の検出です。 HIVに対する抗体は、感染の最初の月の終わりまでに現れる可能性があります。 多くの著者によって提出されて、血清変換を開発するのに4-7週間から6ヶ月以上かかります。 抗体の存在は、AIDSにおいて診断的価値があるか、またはその発生のリスクを示します。
抗体はAIDSの血清学的マーカーであるだけではありません。 病気の前臨床段階で明らかになり、それらはその早期診断を可能にします。 それらの存在は、キャリアの検出にとって特に重要です。
抗体は何年にもわたって、事実上生涯にわたって検出されます。 研究者は、ウイルスとそれに対する抗体の検出に並列性を確立しました。つまり、免疫不全ウイルスに対する抗体の存在は、人がウイルスキャリアである可能性が高いことを示しています。
感染したリンパ球から放出されたビリオン、感染した細胞の崩壊中に血流に入るサブウイルス成分、および感染したリンパ球によって抗原性刺激が刺激されるため、インキュベーション期間に現れるHIV抗原に対する抗体は、疾患の発症とともに集中的に産生され続けます。
同時に、感染細胞のゲノムに埋め込まれたプロウイルスは、特定の抗体にアクセスできないままです。 これは、一見逆説的な事実を説明しています。血清中のヒト免疫不全ウイルスに対する抗体が多いほど、ウイルス自体を患者から分離するのが容易になります。
これは、ウイルス感染に応答して生成された抗体が中和せず、その結果、ウイルスに目立った影響を与えず、単にウイルスとともに体内に存在するために発生します。 AIDSウイルスに対する抗体（AT）を検出するために、十分に高いレベルの特異性と感度で研究を実施できるようにする多くのテストが開発されました。 これらは、固相放射免疫分析、放射免疫沈降、免疫蛍光、酵素免疫測定、および免疫ブロッティングの方法です。
酵素結合免疫吸着アッセイ（ELISA）の方法は、実際に最も幅広い用途が見出されており、高感度、反応の結果を定量的および視覚的に記録する能力が特徴であり、あらゆるレベルの実験室でこの方法を利用できます。
ELISAは国内外の試験システムを使用しています。
HIV感染とAIDSの臨床経過
感染した母親から生まれた子供には注意が必要です。 診療所がない場合、HIVに対するATが1年後も続く場合、子供は感染していると見なされます。 ELISAで陽性結果が得られた場合は、1回陽性の血清を3回試験し、独立したシステムで陽性結果を確認する必要があります-免疫ブロッティング
ELISA反応でのATの検出は、被験者の状態が言われていないため、十分な情報を提供しませんが、インキュベーション、病気、または無症候性感染の存在を示すだけです。
多くのHIV抗原に対するATの存在は重篤な疾患の特徴であるのに対し、免疫ブロッティングは多くの情報を提供しますが、1-2抗原との反応は、軽度の感染過程でより一般的です
モノコナル抗体を使用して決定された、リンパ球のT（ヘルパー）の数とT4とTe（サプレッサー）の比率を数えることは有益です。
病気の重要な基準は、免疫グロブリン、特にAとVの数の急激な増加である可能性があります。血液の一般的な臨床分析では、リンパ球減少症、白血球減少症、赤血球減少症、血小板減少症、好酸球増加症が病気を示している可能性があります。
疫学的監視に使用されるHIVテストは、臨床目的に必要なほど正確である必要はありません。
ただし、人口のHIV有病率が非常に低いため、すべての陽性サンプルを追加のテストで再テストする必要があります。
HIV抗体検査やスクリーニングのための採血は、被験者名の登録（名義採集）を伴う場合もあれば、氏名や個人識別情報を登録せずに実施する場合（匿名採集）（表）。
識別情報を考慮しない匿名スクリーニングの場合、以下の点が特徴的です。他の目的で収集された血液サンプルが使用されます。 識別データが収集されていないか、考慮されていないため、匿名性が保証されます。 調査対象者の同意を得る必要はありません。 カウンセリングやソーシャルサービスとの接触は必要ありません。 最後に、そして最も重要なことは、人口参加のレベルに応じた統計的推定の誤差が最小限に抑えられることです。
匿名のHIVテストからより正確なデータを取得できますが、この方法には次の欠点があります。潜在的な選択バイアスを排除できない。 高リスクの行動やその他の重要な変数に関するデータは入手できず、遡及的に収集することはできません。 HIVの影響を受けた人々に彼らの状態を知らせるために彼らとの接触を確立することは不可能です。 検査は、他の目的で採血された人々のグループでのみ実施できます。
HIVの有病率が非常に低いと考えられる地域では、保健システムの監視は主に、HIV行動のリスクが最も高い個人または集団に焦点を当てる必要があります。 性的パートナー
このリスクグループのHIV検査用の血液は、性感染症センターまたは同様の施設から最も簡単に入手できます。
静脈内薬物使用も一般的である場合、血液サンプルは専門機関の薬物使用者から採取する必要があります。
通常、リスクの高いグループが最も多い地域から、リスクのあるグループのほとんどで3か月または6か月に1回採血するだけで十分です。 例外は、静脈内薬物を実践する薬物中毒者などのリスクグループであり、より頻繁な検査が必要になる場合があります。
WHOは現在、臨床試験用の疾患分類（病期分類）システムを開発しています。これは、治療の試験にも使用でき、予測値もあります。
ただし、このようなシステムは、健康監視で使用されるAIDSの既存の定義を置き換えることを意図したものではありません。
現在、計画された（定期的な）HIV監視のシステムが至る所で開発されています。
これらのシステムは、既存の疫学的状況に適応させる必要があります。 したがって、ウイルスの有病率が非常に低い集団でのサンプリング方法は、有病率が中程度または高い場合に使用される方法とは必然的に異なるはずです。
このような監視には、明確でアクセス可能な集団の定期的な調査が含まれます。
まず第一に、感染のリスクが最も高いグループを含める必要があり、これらのグループのそれぞれで、一定の所定の人数を検査のために選択する必要があります。
近年、ヘルスケアシステムにおけるHIV疫学的監視の正確で費用効果の高い方法として、身元不明の集団における匿名のスクリーニングがますます普及している。
HIVの実験室診断方法
高度に専門化された研究所は以下を実行します。
a）血中を循環している抗体、抗原および免疫複合体の測定; ウイルスの培養、そのゲノム物質および酵素の同定;
b）免疫系の細胞リンクの機能の評価。
主な役割は、抗体、ならびに血液および体の他の体液中の病原体の抗原を決定することを目的とした血清学的診断の方法に属する。
HIV抗体検査は、次の目的で実行されます。
a）輸血および移植の安全性;
b）監視、HIV感染の有病率を監視し、特定の集団におけるその有病率のダイナミクスを研究するためのテスト。
c）HIV感染の診断、すなわち
e。実際に健康な人またはHIV感染またはAIDSに類似したさまざまな臨床的兆候および症状を有する患者の血清の自発的検査。
HIV感染の実験室診断システムは、3段階の原則に基づいて構築されています。
最初の段階はスクリーニングであり、HIVタンパク質に対する抗体の存在について一次血液検査を行うように設計されています。 第2段階は参照段階です。これにより、特別な方法論的手法を使用して、スクリーニング段階で得られた主要な陽性結果を明確化（確認）することができます。 3番目のエタン-専門家は、実験室診断の前の段階で特定されたHIV感染マーカーの存在と特異性の最終検証を目的としています。
実験室診断のいくつかの段階の必要性は、主に経済的考慮によるものです。
実際には、十分な信頼性でHIV感染を特定することを可能にするいくつかのテストが使用されます。
最初のレベルのELISA（ELISA）テスト（酵素結合免疫吸着アッセイ）検出は、以下よりも特異性は低いものの、高感度を特徴としています。
免疫ブロット（ウエスタンブロット）、HIV-1とHIV-2を区別するための非常に特異的で最も使用されるテスト。
感染の初期段階で有効なP25抗原血症検査。
ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）。
血液サンプルの大量スクリーニングの場合、各サンプルの最終希釈率が1：100を超えないように編集された、被験者のグループからの血清の混合物をテストすることをお勧めします。
血清混合物が陽性の場合、陽性混合物中の各血清が試験されます。 この方法では、ELISAとイムノブロットの両方で感度が低下することはありませんが、人件費と初期検査の費用が60〜80％削減されます。
免疫学的方法
tヘルパーの数、
2.T4とT8の比率、
3.過敏症の状態、
4.Tセルシステムの代償機能。
それは免疫グロブリンの過剰産生によって明らかになり、それらは親和性が低く、体の物質はさらに多く消費されます。
短所：遅れて現れる、いくつかの免疫学的指標は他の感染症にあるかもしれません。
臨床方法-m。 他の病気と同様に、最も典型的な症状は後期に記録されるため、臨床診断はあまり効果的ではありません
主な方法である血清学的方法は、次の2つの段階で実装されます。
1-スクリーニング検査-免疫分析のすべてのタンパク質に対する総抗体のサンプリング。
この段階では、95％の真の結果と5％の偽陽性が得られます。
2-確認方法-すべてのサンプルは確認方法を使用して検査されます。 この手法により、ウイルスタンパク質に対する抗体を検出できます。
結果が1または2に疑わしく、追加の検査が必要な場合、少なくとも3つのウイルスタンパク質に対する抗体が検出されたときに陽性の結果。
HIV感染の一次血清診断では、総抗体はスクリーニングスクリーニングテスト（ELISAおよび凝集反応）を使用して決定されます。
2番目の（調停）段階では、より複雑なテストが使用されます。これは、最初の結論を確認または拒否するだけでなく、個々のウイルスタンパク質に対する抗体を決定するレベルでこれを行うことを可能にするイムノブロットです。
HIV抗体検査結果の解釈
かなりの数の異なる要因がHIVに対する抗体の分析結果に影響を及ぼし、その中でも感染の可能性があった後の分析の時間が重要です。
ほとんどの場合、HIV抗体は感染後6〜12週間で検出できます。
ウイルスが体内に侵入してから検出可能な量の抗体が出現するまでのこの期間は、陽性の血清変換の期間または「ウィンドウ」期間と呼ばれます。 感染後6ヶ月で抗体が出現することはまれであり、1年後に抗体が検出されたという報告はありません。 現在、診断サービスでは、感染後3〜4週間でHIVに対する抗体を検出できる新世代のELISAメソッドを使用しており、これらのメソッドの特定の組み合わせ、いわゆるテスト戦略により、ウィンドウ期間が2〜3週間に短縮されます。 ..。
体内で生成され始めるとすぐにHIVに対する抗体を検出できるようにします。
否定的な結果は、HIVに対する抗体が被験者の血液中に見つからなかったことを意味します。
この状態は血清陰性と呼ばれ、通常、その人が感染していないことを意味します。
否定的な結果は、将来の保証を提供するものではありません。 彼は試験時の状態のみを述べています。 調査期間中に調査が実施された可能性はわずかです。 したがって、以前にHIVに感染するリスクがあり、テスト結果が陰性であった場合は、リスクイベントの少なくとも6か月後に再テストする必要があります。
陽性の結果は、HIVに対する抗体が患者の血液中に発見されたことを意味します。
この状態は血清陽性と呼ばれ、人はHIVに感染しています。 肯定的な結果はHIV感染のみを示し、AIDSは示さないことを理解することが重要です。
とはいえ、良い結果が得られた後は、医師に相談し、必要に応じて医療援助を行うことは非常に重要です。これにより、長期にわたって良好な生活の質を維持することができます。
結果は不確定です。 まれに、HIV抗体検査の結果が不明確な場合があります。
研究室は、その人が血清陽性であるか血清陰性であるかについて答えることができません。 このような状況では、医師に相談して再度検査を受ける必要があります。
治療の早期開始は、疾患のさらなる発症を大部分事前に決定し、患者の寿命を延ばすことができるため、HIV感染のタイムリーな診断は非常に重要な手段になりつつあります。 近年、この恐ろしい病気の検出に大きな進歩がありました。古いテストシステムがより高度なものに置き換えられ、検査方法がより利用しやすくなり、その精度が大幅に向上しています。
この記事では、HIV感染を診断する最新の方法について説明します。これは、この問題をタイムリーに治療し、病気の人の通常の生活の質を維持するために役立つものです。
HIV診断技術
ロシアでは、HIV感染の診断のために、2つのレベルを含む標準的な手順が実行されます。
- ELISAテストシステム（スクリーニング分析）;
- 免疫ブロッティング（IB）。
また、他の方法を診断に使用できます。
- エクスプレステスト。
ELISAテストシステム
診断の最初の段階では、スクリーニングテスト（ELISA）を使用してHIV感染を検出します。これは、感染に応答して体内で生成された特定の抗体をトラップする実験室で作成されたHIVタンパク質に基づいています。 テストシステムの試薬（酵素）と相互作用した後、インジケーターの色が変わります。 さらに、これらの色の変化は、実行された分析の結果を決定する特別な装置で処理されます。
このようなELISAテストは、HIV感染の導入後数週間以内に結果を示すことができます。 この分析はウイルスの存在を決定しませんが、それに対する抗体の生成を検出します。 人体では、HIVに対する抗体の産生は、感染後2週間後に始まることがありますが、ほとんどの場合、後日、3〜6週間後に発現します。
感度が異なる4世代のELISAテストがあります。 近年、合成ペプチドまたは組換えタンパク質に基づいており、より特異的で正確なIIIおよびIV世代の試験システムがより頻繁に使用されています。 これらは、HIV感染の診断、HIVの蔓延の監視、および提供された血液のスクリーニング時の安全性の確保に使用できます。 III世代およびIV世代のELISAテストシステムの精度は93〜99％です（西ヨーロッパで作成されたより感度の高いテストは99％です）。
ELISAテストを行うために、患者の静脈から5mlの血液を採取します。 最後の食事からテストまで少なくとも8時間経過する必要があります（通常は朝、空腹時に行われます）。 感染の疑いから3週間以内にこのような検査を受けることをお勧めします（たとえば、新しい性的パートナーとの無防備な性交の後）。
ELISAテストの結果は2-10日で得られます：
- 否定的な結果：HIV感染がなく、専門家への紹介を必要としないことを示します。
- 偽陰性の結果：感染の初期段階（最大3週間）、AIDSの後期段階で、免疫の顕著な抑制と不適切な血液の準備で観察できます。
- 偽陽性の結果：いくつかの病気や不適切に行われた血液の準備で観察される可能性があります。
- 肯定的な結果：HIV感染を示し、IBとAIDSセンターの専門家への患者の紹介が必要です。
ELISAテストで偽陽性の結果が得られるのはなぜですか？
HIVのELISAテストの偽陽性の結果は、不適切な血液処理で、または次の状態や病気の患者で観察できます。
- 多発性骨髄腫;
- エプスタインバーウイルスによって引き起こされる感染症;
- 後の状態;
- 自己免疫疾患;
- 妊娠を背景に;
- ワクチン接種後の状態。
上記の理由により、非特異的な交差反応性抗体が血中に存在する可能性があり、その産生はHIV感染によって引き起こされませんでした。
近年、より感度の高いペプチドと組換えタンパク質を含む第3世代および第4世代のテストシステムの使用により、偽陽性の結果の頻度が大幅に減少しています（これらはinvitroで遺伝子工学を使用して合成されます）。 このようなELISAテストの使用開始後、偽陽性の結果の頻度は大幅に減少し、約0.02〜0.5％です。
偽陽性を見つけたからといって、HIVに感染しているわけではありません。 このような場合、WHOは別のELISAテスト（必須のIV生成）を推奨します。
患者の血液は、「リピート」とマークされた参照または調停研究所に送られ、IV世代ELISAテストシステムでテストされます。 新しい分析の結果が陰性の場合、最初の結果は誤った（偽陽性）と認識され、IBは実行されません。 2回目のテストで陽性または疑わしい結果が出た場合、HIV感染を確認または反論するために、患者は4〜6週間でIBを割り当てられる必要があります。
免疫ブロッティング
HIV感染の確定診断は、免疫ブロッティング（IB）の結果が陽性の場合にのみ行うことができます。 その実装には、ウイルスタンパク質が適用されるニトロセルロースストリップが使用されます。
IBの採血は静脈から行います。 その後、特殊な加工を施し、血清に含まれるタンパク質を電荷と分子量に応じて特殊なゲルで分離します（電界の影響下で特殊な装置で操作を行います）。 ニトロセルロースストリップが血清ゲルに適用され、ブロッティング（「ブロッティング」）が特別なチャンバーで実行されます。 ストリップが処理され、使用される材料にHIVに対する抗体がある場合、それらはIBの抗原バンドに結合し、線として表示されます。
次の場合、IBはポジティブと見なされます。
- アメリカのCDC基準によると、ストリップにはgp41、p24、gp120 / gp160の2行または3行があります。
- アメリカのFDAの基準によると、ストリップには2本の線p24、p31と1本の線gp41またはgp120 / gp160があります。
症例の99.9％で、陽性のIB結果はHIV感染を示しています。
線がない場合-IBは負です。
gp160、gp120、およびgp41-IBの行を識別する際に疑わしいです。 このような結果は、次の場合に検出できます。
- 腫瘍性疾患;
- 妊娠;
- 頻繁な血液輸血。
このような場合は、他社のキットを使用して再検査を行うことをお勧めします。 追加のIBの後、結果が疑わしいままである場合は、6か月間観察する必要があります（IBは3か月ごとに実行されます）。
ポリメラーゼ連鎖反応
PCRテストはウイルスのRNAを検出することができます。 その感度は非常に高く、感染後10日でHIV感染を検出できます。 場合によっては、PCRは高感度で他の感染症に対する抗体にも反応する可能性があるため、偽陽性の結果をもたらす可能性があります。
この診断技術は高価であり、特別な機器と高度な資格を持つ専門家が必要です。 これらの理由は、人口の集団試験中にそれを実行することを可能にしません。
PCRは、次のような場合に使用されます。
- hIVに感染した母親から生まれた新生児のHIVを検出する。
- 「ウィンドウ期間」または疑わしいIBの場合にHIVを検出するため。
- 血中のHIVの濃度を制御するため。
- ドナーの血液の研究のため。
PCRテストによってのみ、HIVは診断されませんが、物議を醸す状況を解決するための追加の診断方法として実行されます。
エクスプレスメソッド
HIV診断の革新の1つは迅速なテストになり、その結果は10〜15分以内に評価できます。 最も効果的で正確な結果は、キャピラリーフローの原理に基づく免疫クロマトグラフィーテストで得られます。 それらは、血液または他の調査された液体（唾液、尿）が適用される特別なストリップです。 HIVに対する抗体の存在下で、10〜15分後、色付きのコントロールストリップがテストに表示されます-陽性の結果です。 結果が負の場合、コントロールストリップのみが表示されます。
ELISAテスト後と同様に、迅速なテストの結果はIB分析によって確認する必要があります。 そうして初めて、HIV感染の診断を下すことができます。
ホームテスト用のエクスプレスキットがあります。 OraSure Technologies1テスト（USA）はFDA承認済みで、処方箋なしで販売されており、HIVの検出に使用できます。 試験後、陽性の場合は専門センターで診察を受け、診断を確定することをお勧めします。
家庭用の残りのテストはまだFDAによって承認されておらず、非常に疑わしい可能性があります。
迅速なテストはIV生成ELISAテストよりも精度が劣るという事実にもかかわらず、人口の追加テストに広く使用されています。
クリニック、中央地区病院、または専門のAIDSセンターで、HIV感染を検出するためのテストを受けることができます。 ロシアの領土では、彼らは絶対に秘密裏に、または匿名で保持されています。 各患者は、検査の前後に医学的または心理的アドバイスを受けることを期待できます。 HIV検査の費用は商業病院でのみ支払う必要があり、政府の診療所や病院では無料で実施されます。
HIVに感染する可能性のある方法と、感染する可能性についてどのような神話が存在するかについて読んでください。
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