Tiešā Kumbsa testa iezīmes un iegūto rezultātu interpretācija. Kumbsa tests: tiešs un netiešs Kumbsa tests ir pozitīvs, kas nozīmē

Apstiprināts ar Roszdravnadzor rīkojumu

par reaģentu komplekta izmantošanu cilvēka asiņu Rh sistēmas antigēnu un antivielu noteikšanai
(AGS Kumbsa testam)

TU 9398-102-51203590-2012

RU Nr. RZN 2013/1255, datēts ar 11.10.2013

I. IEVADS

Kumbsa testa standarta serums satur specifiskas heteroimūnas antivielas pret cilvēka asins olbaltumvielām un ir paredzēts lietošanai divos reakcijas variantos - tiešā un netiešā Kumbsa testā.

Tiešais Kumbsa tests To lieto eritrocītu sensibilizācijas noteikšanai in vivo jaundzimušo hemolītiskajā slimībā un pacientiem ar hroniskas hemolītiskās anēmijas autoimūno formu, kā arī dažos citos apstākļos. Tiešais Kumbsa tests slēpjas faktā, ka pētāmajiem eritrocītiem, kas iepriekš tika mazgāti no pašu plazmas olbaltumvielām, pievieno Kumbsa testa serumu. Ja eritrocīti ir sensibilizēti in vivo, tad reakcijas rezultātā notiek to aglutinācija.

Netiešais Kumbsa tests to lieto kā testu ķermeņa sensibilizācijas stāvokļa noteikšanai, kas ļauj pārbaudītās personas asins serumā atklāt antivielas, kas atrodas brīvā stāvoklī; kā pārlietu asiņu saderības pārbaude, kad tiek pētīta recipienta seruma ietekme uz paredzētā donora eritrocītiem; un kā testu dažādu grupu antigēnu noteikšanai eritrocītos, iepriekš pakļaujot standarta serumiem, kas satur zināmas specifikas antivielas. Netiešā Kumbsa tests (visi varianti) ražots divos posmos, no kuriem pirmais ir testa (vai standarta) seruma inkubācija ar standarta (vai testa) eritrocītiem, t.i., eritrocītu sensibilizācija in vitro. Otrais posms ir faktiskā reakcija ar serumu Kumbsa testam, kas tiek ražots tāpat kā tiešais Kumbsa tests.

Reakcijas gala rezultāts gan tiešā, gan netiešā Kumbsa testā rodas, pateicoties Kumbsa testa standarta seruma mijiedarbībai ar antivielām (cilvēka asins olbaltumvielām), kas fiksētas uz eritrocītiem. Šis rezultāts izpaužas eritrocītu aglutinācijas formā. Lai novērotu aglutināciju, jāizmanto balts porcelāns vai jebkura balta plāksne ar samitrinātu virsmu, lai tam uzliktie pilieni būtu labi sajaukti un neizkliedētos pa plāksnes virsmu. Jauktie pilieni viegli jāiesmērē uz šķīvja apmēram 2 kapeiku monētas lielumā.
II. REAKCIJAS SASTĀVDAĻU SAGATAVOŠANA

Pārbaudes serumu antivielu klātbūtnes un specifiskuma noteikšanai tajā iegūst no pārbaudāmās personas asinīm, nepievienojot konservantu. Uzglabāt temperatūrā + 4–8 0 С ne ilgāk kā 2 dienas vai sasaldētā stāvoklī - 1 mēnesi.

Serumu saderības pārbaudei iegūst tādā pašā veidā, bet to lieto ar derīguma termiņu ne ilgāku par 2 dienām.

Eritrocīti, kas paredzēti noteiktu izoantigēnu noteikšanai tajos, tiek ievākti ar kāda veida konservantiem no personas, kuras asinis tiek pārbaudītas. Varat arī izmantot sarkano asins šūnu nogulsnes no asinīm, kas ņemtas bez konservanta.

Pārbaudot savietojamību, tiek izmantotas donora asinis, kas tiek izvadītas caur adatu no flakona, kas sagatavots pārliešanai.

Visos gadījumos eritrocītus mēģenēs mazgā 3-4 reizes no plazmas, pievienojot 8-10 tilpumus izotoniskā nātrija hlorīda šķīduma vienam tilpumam eritrocītu, pēc tam sajaucot un centrifugējot ar ātrumu 1500-2000 apgr./min. 5-10 minūtes (līdz pilnīga eritrocītu sedimentācija). Pēc katras centrifugēšanas supernatants tiek nosūkts.
III. REAKCIJU VEIKŠANAS TEHNIKA

Pārbaudāmos eritrocītus sagatavo 5% suspensijas veidā, kam vienu pilienu četru mazgātu eritrocītu mēģenē sajauc ar 19 pilieniem izotoniskā nātrija hlorīda šķīduma.

Vienu pilienu (0,05 ml) 5% eritrocītu suspensijas pārnes uz baltas plāksnes un iesmērē. Plati sakrata un 3 minūšu laikā novēro, vai ir notikusi eritrocītu aglutinācija. Ja aglutinācija nenotiek, tad šeit pievieno 1-2 pilienus Kumbsa testa standarta seruma, pilienus rūpīgi sajauc, pēc tam plāksni nedaudz sakrata, pēc tam vienu vai divas minūtes atstāj vienu un atkal krata. Tajā pašā laikā rezultāts tiek novērots 10 minūtes, kas tiek izteikts aglutinācijas klātbūtnē vai bez tās.
Tiešā Kumbsa testa rezultātu interpretācija.

Aglutinācijas trūkums - negatīva izlase

Aglutinācijas klātbūtne - pozitīvs tests, kas norāda uz pētīto eritrocītu sensibilizāciju, t.i., antivielu absorbciju uz tiem, kas in vivo notika cilvēka ķermenī (jaundzimušais, pacients). Ja pētāmo eritrocītu aglutinācija nāca pirms pievienošanas serumu Kumbsa testam, tiešā parauga rezultāts netiek ņemts vērā.
2. Netiešais Kumbsa tests

Paredzēts izoantivielu noteikšanai pārbaudāmās personas asins serumā

To lieto gadījumos, kad ir nepieciešams noskaidrot, vai pacienta, grūtnieces, donora utt. Asinīs ir nepilnīgas izoimūnas antivielas, un noskaidrot to specifiku. Reakcijai tiek izmantots pārbaudītās personas asins serums un zināmas specifikas standarta eritrocīti. Starp šiem 8-10 vai vairākiem sarkano asins šūnu paraugiem jābūt atšķirīgiem citu sistēmu faktoros, un ir ļoti svarīgi, lai katrs no šiem faktoriem būtu vismaz vienā sarkano asins šūnu paraugā. Panelis ietver arī Rh-negatīvo eritrocītu paraugus ar dažādām antigēnu kombinācijām no citām sistēmām, lai starp tiem būtu Duffy-pozitīvs un Duffy-negatīvs, kas, savukārt, tiktu sadalīts Kell-pozitīvajā un Kell-negatīvajā, Kidd-pozitīvs un Kidd-negatīvs uc Kā negatīva kontrole reakcijā, ja iespējams, iekļauj tās personas eritrocītus, kuras serumu pārbauda.

Reakcijas tehnika

Vairākas centrifūgas vai citas mēģenes ar tilpumu 3-10 ml ievieto statīvā atbilstoši reakcijā iekļauto eritrocītu paraugu skaitam. Caurules ir marķētas, un tām saskaņā ar marķējumu pievieno 1 nelielu pilienu (0,01 ml) mazgātu standarta eritrocītu. Trīs pilienus testa seruma ielej katrā mēģenē, mēģenes intensīvi sakrata, lai eritrocītus sajauktu ar serumu, un 45 minūtes ievieto termostatā 37 ° C temperatūrā. Pēc inkubācijas mēģenes izņem no termostata un eritrocītus nomazgā, caurules augšdaļai pievienojot izotonisku nātrija hlorīda šķīdumu, maisot un pēc tam centrifugējot. Mazgāšanu atkārto 3-4 reizes, katru reizi uzmanīgi nosūcot nadstoju, pēc tam mazgātiem eritrocītiem pievieno 2 pilienus izotoniskā nātrija hlorīda šķīduma, lai iegūtu aptuveni 5% suspensiju (lietojot centrifūgas mēģenes, jūs varat aprobežoties ar mazgāšanu divreiz). .

1 pilienu 5% eritrocītu suspensijas no katras mēģenes pārnes uz baltas plāksnes, tur pievieno 1-2 pilienus standarta seruma Kumbsa testam un serumu rūpīgi sajauc ar eritrocītiem. Plati nedaudz sakrata, pēc tam atstāj vienu pašu 1-2 minūtes un atkal periodiski krata, 20 minūtes novērojot reakcijas rezultātu.

Rezultātu interpretācija

Nav aglutinācijas pazīmju (negatīvs rezultāts) visos paraugos nozīmē, ka pārbaudītais serums nesatur nepilnīgas antivielas pret grupas antigēniem, kas atrodas pētījumā iekļautajos standarta eritrocītos.

Ja dažos vai vairumā pilienu, izņemot kontroli, novērotā aglutinācija , tas nozīmē, ka pētītais serums satur nepilnīgas antivielas pret eritrocītu antigēniem. Jautājums par šo antivielu specifiskumu tiek izlemts, salīdzinot pozitīvas un negatīvas reakcijas ar reakcijā iekļauto eritrocītu antigēno struktūru. Jautājums par šo antivielu aktivitāti tiek izlemts ar titrēšanu.

1. piemērs. Aglutinācija notika ar visiem eritrocītu paraugiem, kas satur faktoru Rh 0 (D), neatkarīgi no citu šīs sistēmas un citu sistēmu faktoru klātbūtnes un neesamības, savukārt ar visiem Rh 0 (D) - negatīvajiem paraugiem aglutinācija netika novērota (tātad neatkarīgi no citu faktoru klātbūtnes vai neesamības) - tas nozīmē, ka pētītais serums satur nepilnīgas antirezusa antivielas - Rh 0 (D).

2. piemērs... Aglutinācija notika ar visiem eritrocītu paraugiem, kas satur Duffy faktoru, neatkarīgi no Rh sistēmas un citu sistēmu antigēnu klātbūtnes vai neesamības, savukārt aglutinācija netika novērota ar visiem Duffy-negatīvajiem paraugiem, kas nozīmē, ka pētītais serums satur nepilnīgas antivielas pret - Dafijs.

Papildinājums. Ja iestādei nav pilnīga standarta eritrocītu paneļa, bet ir nepieciešams pētīt serumu antivielu klātbūtnei, ieteicams veikt pētījumu ar 25-30 nejauši ņemtiem eritrocītu paraugiem no veseliem 0 grupas indivīdiem ( I) vai tāda paša nosaukuma serumu ar testa serumu. Tas ļaus atrisināt jautājumu par antivielu klātbūtni vai trūkumu pret lielāko daļu Rh-Hr sistēmas antigēnu Duffy, Kell, Kidd.

Ja tiek iegūts pozitīvs rezultāts, turpmāku secinājumu par identificēto antivielu specifiskumu var izlemt, veicot īpašu pētījumu ar pilnu standarta eritrocītu paneli.

3. Netiešā Kumbsa testa veikšanas paņēmiens kā pārlietu asiņu saderības tests

Lai novērstu nesaderību asins pārliešanas laikā, pirms pārliešanas jāveic šādi saderības testi:

1. 
   ABO asins grupu saderības tests, kas tiek veikts plaknē istabas temperatūrā.
2. 
   Rh faktora un citu izoantigēnu savietojamības testi.

Rh faktora un dažu citu izoantigēnu nesaderība var būt atkarīga gan no pilnīgu antivielu klātbūtnes (noteiktas fizioloģiskā vidē 37 ° C mēģenēs), gan visbiežāk no nepilnīgām antivielām, kurām jāveic netiešais Kumbsa tests. visjūtīgākais.

Vienu mazu (0,01 ml) izmazgātu donoru eritrocītu pilienu, kas pa adatu izņemts no asins pārliešanai paredzētās asins pudeles, pārnes uz centrifūgas vai citas caurules ar 3-4 ml tilpumu dibenu un pievieno 3 pilienus pacienta seruma. to. Testa mēģeni sakrata, lai eritrocītus sajauktu ar serumu, un pēc tam 45 minūtes ievieto termostatā 37 ° C temperatūrā. Pēc inkubācijas caurules augšpusē pievieno izotonisku nātrija hlorīda šķīdumu, mēģenes saturu sajauc un centrifugē 5-10 minūtes. Šo eritrocītu mazgāšanu atkārto 3 reizes, katru reizi uzmanīgi noņemot nadstoju. Izmantojot centrifūgas mēģenes, jūs varat aprobežoties ar mazgāšanu divreiz. Nomazgātajiem eritrocītiem pievieno 2 pilienus izotoniskā nātrija hlorīda šķīduma, lai iegūtu apmēram 5% suspensiju.

1 pilienu 5% eritrocītu suspensijas pārnes uz baltas plāksnes, tur pievieno 1-2 pilienus standarta seruma Kumbsa testam un serumu rūpīgi sajauc ar eritrocītiem. Tad plāksni nedaudz sakrata, atstāj vienu pašu 1-2 minūtes un atkal periodiski krata, novērojot rezultātu 20 minūtes.

Piezīme: Ar Rh nesaderību aglutinācija parasti notiek pirmās minūtes laikā, bet ar zemu Rh antivielu (vai citu antivielu) titru aglutinācija var notikt vēlāk, dažreiz līdz divdesmitajai minūtei.
Rezultāta interpretācija:

Ir redzami aglutināti gabaliņu veidā uz apgaismota vai pilnīgi krāsas fona - tas nozīmē, ka donora asinis nesaderīgs ar saņēmēja asinīm, un to nevar pārliet.

Trūkums aglutinācijas pazīmes nozīmē, ka pacienta asinis nesatur nepilnīgas antivielas pret donora eritrocītiem attiecībā pret Rh faktoru un citiem izoantigēniem, pret kuriem varēja veidoties nepilnīgas antivielas.

Netiešais Kumbsa tests ir jutīgs tikai pret nepilnīgām antivielām.
4. Netiešā Kumbsa tests, lai noteiktu eritrocītu antigēnu struktūru

Šo testu izmanto, lai noteiktu jebkura grupas eritrocītu antigēna klātbūtni vai trūkumu, izmantojot standarta serumu, kas satur atbilstošās antivielas nepilnīgā formā.

Visbiežāk netiešo Kumbsa testu izmanto Kell (K), Duffy (Fy), Kidd (Jk) antigēnu noteikšanai, kā arī vāja Rh antigēna (Du) noteikšanai.

Pirms turpināt noteikt antigēnus, pārbaudāmie eritrocīti jāpārbauda tiešā Kumbsa testā. Ja tieša testa rezultāts ir pozitīvs, antigēnu noteikšanu ar netiešo Kumbsa testu nevar veikt, un šim nolūkam jāizmanto citas reakcijas.

Reakcijai izmanto centrifūgas vai citas mēģenes ar tilpumu 3-4 ml trīs daudzumos: vienu eritrocītu testa paraugam un divas pirmās mēģenes apakšai, pievieno 1 mazu (0,01 ml) pilienu. no trīs reizes mazgātiem testa eritrocītiem, otrajā - kontroles eritrocīti, kas satur vēlamo antigēnu (piemēram, Duffy pozitīvs), un trešajā mēģenē - negatīvu kontroli (Duffy - negatīvs). Visām mēģenēm pievieno 2-3 pilienus standarta seruma (šajā piemērā - anti-Duffy). Caurules sakrata, lai sajauktu saturu, un 45 minūtes ievieto termostatā 37 ° C temperatūrā. Pēc šādas inkubācijas caurules izņem no termostata, augšpusē pievieno izotonisko nātrija hlorīda šķīdumu, saturu rūpīgi sajauc un 5-10 minūtes centrifugē ar ātrumu 1500-2000 apgr./min. Pēc centrifugēšanas nadstoju uzmanīgi aspirē un šo eritrocītu mazgāšanu atkārto 4 reizes. (Lietojot centrifūgas mēģenes, jūs varat aprobežoties ar mazgāšanu divreiz).

Nomazgātajiem eritrocītiem pievieno 2 pilienus izotoniskā nātrija hlorīda šķīduma, lai iegūtu apmēram 5% suspensiju. 1 pilienu 5% eritrocītu suspensijas no katras mēģenes pārnes uz baltas plāksnes, katram pilienam eritrocītu pievieno 1-2 pilienus standarta seruma Kumbsa testam un sajauc. Plati nedaudz krata, pēc tam atstāj vienu pašu 1-2 minūtes un atkal periodiski krata, 20 minūtes novērojot reakcijas gaitu.
Rezultātu interpretācija

Aglutinācijas klātbūtne sarkanās asins šūnas (pozitīvas) nozīmē, ka asinis satur vēlamo antigēnu (šajā piemērā Dafija asinis ir pozitīvas).

Aglutinācijas trūkums (negatīvs) nozīmē, ka pārbaudāmās asinis nesatur vēlamo antigēnu (Duffy negatīvs).

Rezultāts tiek uzskatīts par patiesu pēc kontrolparaugu pārbaudes, tas ir, piemērā ar pozitīvu rezultātu ar Duffy pozitīvu paraugu un negatīvu ar Duffy negatīvu paraugu.

5. Atbrīvošanas forma

Reaģents tiek ražots šķidrā veidā 5 vai 10 ml flakonos (1 ml satur 10 devas). Nātrija azīdu izmanto kā konservantu galīgajā koncentrācijā 0,1%.

6. Uzglabāšana

Derīguma termiņš ir divi gadi ledusskapī 2-8 ° C temperatūrā. Atvērtā pudele ir piemērota lietošanai, ja to visu derīguma laiku uzglabā ledusskapī hermētiski noslēgtā veidā.

Sūdzības pamatojums ir šāds: aktivitātes trūkums, nespecifiskums, flakona integritātes pārkāpums, pārslu klātbūtne, reaģenta derīguma termiņa beigām. Iesniedzot sūdzību, lūdzu, norādiet saņemšanas datumu, piegādātāju (ja preces saņēmāt nevis no ražotāja), partijas numuru, iemeslus, kāpēc reaģents tika atzīts par nepiemērotu. Lūdzu, pievienojiet protokolu ar reaģenta pārbaudes rezultātiem un 2-3 neatvērtus reaģenta flakonus
Sūdzības jānosūta ražotājam MEDIKLON LLC: 127276

Vai izšķīdina plazmā.

Sinonīmi: antiglobulīna tests, Kumbsa tests, AGT, netiešais / tiešais antiglobulīna tests, IAT, NAT, DAT, netiešais / tiešais Kumbsa tests

Kumbsa tests ir

analīze, kas nosaka imunizāciju un antivielas pret eritrocītiem.

Kumbsa testa veidi

• tiešais Kumbsa tests- atklāj antivielas, kas fiksētas uz eritrocītu virsmas. To veic, ja ir aizdomas par autoimūno hemolītisko anēmiju, hemolīzi autoimūnās slimībās, pēc zāļu (metildopa, penicilīna, hinīna) lietošanas, pēc asins pārliešanas un jaundzimušo hemolītiskās slimības.

Eritrocīti tika sensibilizēti in vivo - tiem jau ir stingri piestiprinātas antivielas, un, pievienojot antiglobulīna serumu (anti-IgG), sensibilizētās šūnas salīp kopā, ko var redzēt ar neapbruņotu aci.

• netiešais Kumbsa tests- atklāj anti-eritrocītu antivielas asins plazmā, kas veiktas pirms asins pārliešanas un grūtniecības laikā.

Anti-eritrocītu antivielas ir autoantivielu veids, t.i. antivielas pret viņu pašu audiem. Autoantiviela rodas, ja imūnsistēma ir patoloģiski reaģējusi uz dažām zālēm, piemēram, lielām penicilīna devām.

Eritrocīti uz to virsmas satur dažādas ķīmiskās struktūras (glikolipīdus, saharīdus, glikoproteīnus un olbaltumvielas), medicīnā antigēni... Persona no vecākiem manto noteiktu antigēnu karti uz katras sarkanās asins šūnas.

Antigēni tiek apvienoti grupās, un blakus tam asinis tiek sadalītas vairākās grupās - pēc AB0 sistēma, Rēzuss, Kells, Luiss, Kids, Dafijs... Slavenākie un nozīmīgākie ārsta darbā ir AB0 un Rh faktors (Rh).

AB0 sistēma

Rēzus piederība cilvēku nosaka tieši šo antigēnu klātbūtne. Īpaši svarīgs eritrocītu antigēns ir antigēns D. Ja tas ir klāt, tad saka par Rh pozitīvām asinīm RhD, un, ja tās nav - par Rh negatīvām Rhd.

Ja attiecīgā antiviela ir pievienota eritrocītu antigēniem, eritrocīts tiek iznīcināts - hemolīzes.

Indikācijas tiešs antiglobulīna tests

• primārā autoimūna hemolītiskā anēmija
• hemolītiskā anēmija ar autoimūnu, audzēju, infekcijas slimības
• zāļu autoimūna hemolītiskā anēmija
• hemolītiskā anēmija pēc transfūzijas (dienas - mēneši)
• jaundzimušā hemolītiskā slimība (nesaderība vienā no asins grupām)

Indikācijas netiešais antiglobulīna tests

• pirms asins pārliešanas
• kad esat stāvoklī ar Rh negatīvu sievieti

Autoimūna hemolītiskā anēmija

Autoimūna hemolītiskā anēmija (primārā)- klasiska autoimūna slimība, kuras cēloņi nav zināmi. Viņi norāda uz pārkāpumu mijiedarbības procesā imūnsistēmas līmenī, kas noved pie paša eritrocītu kā svešu cilvēku uztveres. Šūnas ražo IgG klases antivielas (reaģē 37 ° C temperatūrā) un / vai IgM (40 ° C temperatūrā), piestiprinoties pie eritrocīta virsmas, tās iedarbina vairākus enzīmus (komplementa sistēmu) un "perforē" eritrocītu siena, kas noved pie tā iznīcināšanas - hemolīze.

Hemolītiskās anēmijas simptomi

• nogurums, vispārējs nespēks, aizkaitināmība
• aizdusa
• sāpes vēderā, slikta dūša
• tumšs urīns
• muguras sāpes
• ādas un gļotādu ikteriska krāsošana
• aknu, liesas palielināšanās
• sarkano asins šūnu un hemoglobīna skaita samazināšanās vispārējā asins analīzē

Pozitīvs rezultāts taisni Kumbsa testi 100% apstiprina autoimūnas hemolītiskās anēmijas diagnozi, pierādot tās autoimūno izcelsmi. Tajā pašā laikā negatīvs rezultāts neļauj noņemt diagnozi.

Sekundārā autoimūna hemolītiskā anēmija un pozitīvs Kumbsa tests var būt ar šādām slimībām:

• sistēmiskā sarkanā vilkēde
• Evansa sindroms
• Valdenstrēma makroglobulinēmija
• paroksizmāla auksta hemoglobinūrija
• hroniska limfoleikoze
• limfomas
• Infekciozā mononukleoze
• Mikoplazmas pneimonijas infekcija
• sifiliss

Šo slimību antiglobulīna testa pozitīvums nekalpo kā diagnostikas kritērijs, bet ir viens no slimības simptomiem.

Jaundzimušā hemolītiskā slimība

Cēlonis jaundzimušā hemolītiskā slimība - asins grupu nesaderība mātei un auglim, vairumā gadījumu pēc Rh sistēmas, atsevišķos gadījumos - pēc AB0 sistēmas, kazuistiski - pēc citiem antigēniem.

Rh konflikts attīstās, ja Rh negatīvā sievietei auglis ir mantojis Rh pozitīvas asinis no tēva.

Jaundzimušā slimība attīstās tikai tad, ja mātei jau ir izveidojušās antivielas pret attiecīgajiem antigēniem, kas notiek pēc iepriekšējām grūtniecībām, dzemdībām, abortiem, nesaderīgu asiņu pārliešanas. Lielākā daļa izplatīts iemesls sākot antivielu sintēzi pret eritrocītu membrānas antigēniem - dzemdības (augļa-mātes asiņošana). Pirmās dzemdības parasti notiek bez komplikācijām, bet nākamās pirmajās dienās pēc piedzimšanas ir pilnas ar jaundzimušo hemolītisko slimību.

Jaundzimušā hemolītiskās slimības simptomi

• ādas dzeltenums
• anēmija
• ādas un gļotādu bālums
• aknu un liesas palielināšanās
• elpošanas traucējumi
• visa ķermeņa pietūkums
• uzbudinājums un pakāpeniska centrālās nervu sistēmas nomākšana

Anēmija pēc asins pārliešanas

Netiešais Kumbsa tests- veikta pirms asins pārliešanas, lai novērtētu savietojamību, un - tiešais Kumbsa tests- pēc tā, ja ir aizdomas par hemolīzi pēc transfūzijas, t.i. ja Jums ir tādi simptomi kā drudzis, drebuļi, laistīšana (lasiet zemāk). Analīzes mērķis ir identificēt antivielas pret pārlietiem eritrocītiem, kuri ir sazinājušies ar asins saņēmēja eritrocītiem un ir pēctransfūzijas hemolīzes cēlonis, kā arī priekšlaicīga donora eritrocītu izņemšana no saņēmēja aprites ( kurš saņēma asinis).

Hemolītiskās reakcijas simptomi pēc asins pārliešanas

• paaugstināta ķermeņa temperatūra
• ādas izsitumi
• muguras sāpes
• sarkana urīna krāsa
• slikta dūša
• reibonis

Kumbsa testa atšifrēšana

Ir vērts atgādināt, ka tiešo un netiešo antiglobulīna testu dekodēšanas pamatnoteikumi ir vienādi. Vienīgā atšķirība ir antivielu atrašanās vieta - asinīs vai jau uz sarkanajām asins šūnām - uz eritrocīta.

• ja tiešais Kumbsa tests ir negatīvs- tas nozīmē, ka antiviela "nesēž" uz eritrocītiem, un simptomu cēlonis ir jāmeklē tālāk un jāveic netiešs Kumbsa tests.
• ja pēc asins pārliešanas, infekcijām, zālēm tiek atklāts pozitīvs Kumbsa testa rezultāts - pozitivitāte var ilgt līdz 3 mēnešiem (eritrocītu mūžs ir 120 dienas - 3 mēneši)
• pozitīvs autoimūnas slimības antiglobulīna tests var ilgt mēnešus vai pat gadus

Kumbsa testa likmes

• tiešais Kumbsa tests- negatīvs
• netiešais Kumbsa tests- negatīvs

Kvalitatīvi pozitīvu rezultātu mēra plusu skaitā no viena līdz četriem (+, ++, +++, ++++) un kvantitatīvi digitālā formā - 1:16, 1: 256 utt.

4 fakti par Kumbsa testu

• pirmo reizi tika ierosināts Kembridžā 1945. gadā
• jutības slieksnis - vismaz 300 fiksētu antivielu molekulu uz viena eritrocīta
• antivielu skaits, kas izraisa hemolīzi - katram cilvēkam atsevišķi (no 16-30 līdz 300)
• citu hemolītiskās anēmijas laboratorisko parametru (hemoglobīna, bilirubīna, retikulocītu) dinamika var normalizēties, un Kumbsa tests paliks tajā pašā līmenī

Antiglobulīna testa trūkumi

• nav iespējams noteikt antigēna saistīšanās stiprumu ar antivielām
• nezināms daudzums saistīto antivielu
• nenosaka antivielu veidu
• pozitīvs Kumbsa tests nepalīdzēs noteikt tā cēloni
• 0,5% veseliem cilvēkiem ir pozitīvs Kumbsa tests bez hemolītiskās anēmijas pazīmēm
• nav piemērots ārstēšanas panākumu uzraudzībai, jo tas neliecina par eritrocītu hemolīzes aktivitāti

Kumbsa tests- analīze, lai noteiktu antivielas, kas pievienotas virsmai vai izšķīdušas plazmā. Ar tās palīdzību tiek atklāta imunizācija un antivielas pret eritrocītiem. Otrais nosaukums ir antiglobulīna tests. Tas var būt tiešs un netiešs.

Kad tiešs antiglobulīna tests nosaka antivielas, kas fiksētas uz sarkano asins šūnu virsmas. Tas tiek veikts ar aizdomām par citām autoimūnām slimībām pēc zāļu (metildopa, penicilīna, hinīna) utt.

Eritrocīti tika sensibilizēti in vivo - tiem jau ir stingri piestiprinātas antivielas, un, pievienojot antiglobulīna serumu (anti-IgG), sensibilizētās šūnas salīp kopā, ko var redzēt ar neapbruņotu aci.

Netiešais Kumbsa tests atklāj anti-eritrocītu antivielas asins plazmā, to veic pirms asins pārliešanas un kad.

Anti-eritrocītu antivielas ir autoantivielu veids, t.i. antivielas pret viņu pašu audiem. Autoantiviela rodas, ja imūnsistēma ir patoloģiski reaģējusi uz dažām zālēm, piemēram, lielām penicilīna devām.

Eritrocīti uz to virsmas satur dažādas ķīmiskās struktūras (glikolipīdus, saharīdus, glikoproteīnus un olbaltumvielas), kuras medicīnā sauc par antigēniem. Persona no vecākiem manto noteiktu antigēnu karti uz katras sarkanās asins šūnas.

Antigēni tiek apvienoti grupās, un pēc tam asinis tiek sadalītas vairākās grupās - saskaņā ar AB0 sistēmu, Rēzus, Kell, Lūiss, Kids, Dafijs. Slavenākie un nozīmīgākie ārsta darbā ir AB0 un Rh faktors (Rh).

AB0 sistēma

Cilvēka Rh piederību nosaka šo antigēnu klātbūtne. Īpaši svarīgs eritrocītu antigēns ir antigēns D. Ja tas ir klāt, tad viņi runā Rh pozitīvas asinis RhD, un, ja tā nav - ak Rh negatīvs Rhd.

Ja attiecīgā antiviela ir pievienota eritrocītu antigēniem, tad eritrocīts tiek iznīcināts - tas notiks hemolīze.

Indikācijas

Galvenā norāde uz tiešsantiglobulīna tests- aizdomas par hemolītisko anēmiju. Visbiežāk to veic primārās autoimūnas hemolītiskās anēmijas gadījumā, hemolīzi reimatisko, audzēju, infekcijas slimību, zāļu izraisītas hemolīzes gadījumā.

Ja anēmija parādās vairākas dienas vai mēnešus pēc asins pārliešanas vai ar ilgstošu dzelti jaundzimušajam, tiek veikts arī tiešs Kumbsa tests.

Netiešstiek veikts antiglobulīna tests pirms asins pārliešanas un Rh negatīvas sievietes grūtniecības laikā.

Autoimūna hemolītiskā anēmija

Autoimūna hemolītiskā anēmija (primārā)- klasiska autoimūna slimība, kuras cēloņi nav zināmi. Imūnsistēmas iekšējā mijiedarbība ir traucēta, kā rezultātā tiek uztverti savi eritrocīti kā svešinieki. Limfmezglos tiek sintezētas IgG antivielas (reaģē 37 ° C temperatūrā) un / vai IgM (40 ° C temperatūrā), kas, piestiprinoties pie eritrocīta virsmas, iedarbina vairākus enzīmus (komplementa sistēmu) un "perforē". "eritrocītu siena, kas noved pie tā iznīcināšanas - hemolīzes.

Pirmie simptomi rodas gan sarkano asins šūnu iznīcināšanas, gan hemoglobīna līmeņa pazemināšanās dēļ. Starp viņiem:

• nogurums, vispārējs nespēks, aizkaitināmība
• aizdusa
• sāpes vēderā un krūtīs, slikta dūša
• tumšs urīns
• muguras sāpes
• ādas un gļotādu ikteriska krāsošana
• sarkano asins šūnu un asinīs samazināšanās

Pozitīvs tiešais rezultāts Kumbsa testi 100% apstiprina autoimūnas hemolītiskās anēmijas diagnozi, pierādot tās autoimūno izcelsmi. Tajā pašā laikā negatīvs rezultāts neļauj noņemt diagnozi.

Sekundārā hemolītiskā anēmija

Sekundārā autoimūna hemolītiskā anēmija un pozitīvs Kumbsa tests var būt ar šādām slimībām:

• Evansa sindroms
• pneimonijas infekcija

Pozitīvs antiglobulīna tests šīm slimībām ir viens no simptomiem, nevis diagnostikas kritērijs.

Jaundzimušā hemolītiskā slimība

Cēlonis jaundzimušā hemolītiskā slimība - asins grupas nesavienojamība mātei un auglim, vairumā gadījumu pēc Rh sistēmas, atsevišķos gadījumos - pēc AB0 sistēmas, kazuistiski - pēc citiem antigēniem.

Rh konflikts attīstās, ja Rh negatīvā sievietei auglis ir mantojis Rh pozitīvas asinis no tēva.

Jaundzimušā slimība attīstās tikai tad, ja mātei jau ir izveidojušās antivielas pret attiecīgajiem antigēniem, kas notiek pēc iepriekšējām grūtniecībām, abortiem, nesaderīgu asiņu pārliešanas. Visbiežākais iemesls antivielu sintēzes sākšanai pret sarkano asins šūnu membrānas antigēniem ir dzemdības (asiņošana no augļa un mātes puses). Pirmās dzemdības parasti norit bez komplikācijām, bet nākamās pirmajās dienās pēc piedzimšanas ir pilnas ar jaundzimušo hemolītisko slimību.

Jaundzimušā hemolītiskās slimības simptomi:

• ādas dzeltenums
• , un gļotādas
• aknu un liesas palielināšanās
• elpošanas traucējumi
• visa ķermeņa pietūkums
• uzbudinājums un pakāpeniska centrālās nervu sistēmas nomākšana

Anēmija pēc asins pārliešanas

Netiešais Kumbsa tests pirms asins pārliešanas, lai novērtētu savietojamību, un tiešs Kumbsa tests - pēc tā, ja ir aizdomas par hemolīzi pēc transfūzijas, t.i. ja Jums ir tādi simptomi kā drudzis, laistīšana (lasiet zemāk). Analīzes mērķis ir identificēt antivielas pret pārlietiem eritrocītiem, kuri ir sazinājušies ar asins saņēmēja eritrocītiem un ir pēctransfūzijas hemolīzes cēlonis, kā arī priekšlaicīga donora eritrocītu izņemšana no saņēmēja aprites ( kurš saņēma asinis).

Simptomi:

• paaugstināta ķermeņa temperatūra
• ādas izsitumi
• muguras sāpes
• sarkans
• slikta dūša
• reibonis

Atkodēšana

Ir vērts atgādināt, ka tiešo un netiešo antiglobulīna testu dekodēšanas pamatnoteikumi ir vienādi. Vienīgā atšķirība ir antivielu atrašanās vieta - asinīs vai jau uz eritrocīta.

• ja tiešais Kumbsa tests ir negatīvs- tas nozīmē, ka antiviela "nesēž" uz eritrocītiem, un simptomu cēlonis ir jāmeklē tālāk un jāveic netiešs Kumbsa tests.
• ja pēc asins pārliešanas, infekcijām, narkotikām tiek atklāts pozitīvs Kumbsa testa rezultāts - pozitivitāte ilgst līdz 3 mēnešiem (eritrocītu mūžs ir 120 dienas - 3 mēneši)
• pozitīvs autoimūnas slimības antiglobulīna tests ilgst mēnešus vai pat gadus

Norm

• tiešais Kumbsa tests - negatīvs
• netiešais Kumbsa tests - negatīvs

Kvalitatīvi pozitīvu rezultātu mēra plusu skaitā no viena līdz četriem (+, ++, +++, ++++) un kvantitatīvi digitālā formā - 1:16, 1: 256 utt.

Jā. Jūsu ārstam jāzina, ka esat saņēmis asins pārliešanu, jo tas ietekmē testa rezultātu interpretācijas pareizību tagad. Saņemot kāda cita (lai arī daudzas reizes pārbaudītas) asinis, vienmēr pastāv iespēja, ka jūsu ķermenis izveidos antivielas pret pārlietām asinīm. Tieši šīm antivielām būs negatīva ietekme uz veselību. Ar turpmākajām asins pārliešanām ārstam jāapzinās, ka jūs jau esat saņēmis pārliešanu, kas nozīmē, ka bija laiks antivielu sintēzei. Grūtniecēm šī informācija ir vēl aktuālāka.

3. Ja Rh faktors neatbilst mātei un bērnam, vai visi bērni būs slimi?

Atkarīgs no bērna Rh pozitīvā vai RhD negatīvā. I, II, III un IV asins grupas nesēji var būt gan Rh pozitīvi, gan negatīvi. Situācijā, kad mātei ir Rh-negatīvs, bet bērnam Rh-pozitīvs, antivielas tiks ražotas jau ar pirmo grūtniecību, bet tikai pēc pirmās dzimšanas (vai grūtniecības pārtraukšanas) starp māti būs tiešs asins kontakts un mazulis. Antivielu hemolītiskā efekta īstenošana notiks tikai otrajā un nākamajās dzemdībās, kas novedīs pie jaundzimušā hemolītiskās slimības.

Katra sieviete ar negatīvu Rh faktoru grūtniecības laikā ir rūpīgi jāpārbauda un pēc dzemdībām jāveic profilaktiska ārstēšana lai novērstu antivielu parādīšanos un turpmākas komplikācijas.

4. Vai grūtniecības laikā pirms Kumbsa testa veikšanas jums jāzina sava vīra asins grupa?

Grūtniecības laikā ir nepieciešams ne tikai zināt, bet arī pārbaudīt bērna bioloģiskā tēva asins grupu.

Fakti

• pirmo reizi tika ierosināts Kembridžā 1945. gadā
• jutības slieksnis - vismaz 300 fiksētu antivielu molekulu uz viena eritrocīta
• antivielu skaits, kas izraisa hemolīzi - katram cilvēkam atsevišķi (no 16-30 līdz 300)
• citu hemolītiskās anēmijas laboratorisko parametru (hemoglobīna, bilirubīna, retikulocītu) dinamika var normalizēties, un Kumbsa tests paliks tajā pašā līmenī

Kumbsa tests pēdējoreiz tika modificēts: 2018. gada 16. martā Marija Bodyana

- pētījums, kas palīdz noteikt nepilnīgu anti-eritrocītu antivielu saturu asinīs. Šis antiglobulīna tests var noteikt antivielas pret grūtniecēm.

Turklāt tas ļauj sākotnējie posmi diagnosticēt jaundzimušo hemolītisko anēmiju ar Rh konfliktu. Tas palīdz novērst sarkano asins šūnu iznīcināšanu, kas ir būtiska normālai asins veidošanai. Šo testu 1945. gadā izveidoja Roberts Kombs, tāpēc tas ieguva savu nosaukumu.

Kumbsa tests ir daudzpusīgs pētījums, kas ļauj savlaicīgi diagnosticēt hematopoēzes traucējumus gan pieaugušajiem, gan bērniem.

Pastāv šāda veida testi:

1. Tiešais Kumbsa tests- ļauj noteikt antivielas, kas atrodas uz eritrocītu virsmas. Parasti šāds pētījums tiek nozīmēts aizdomām par hemolīzi, autoimūno hemolītisko anēmiju un citām autoimūnām slimībām. Turklāt to veic pēc zāļu terapijas ar zālēm, kuru pamatā ir hinīns, penicilīns vai metildopa, vai pēc asins pārliešanas. Lai iegūtu precīzākus rezultātus, pirms pētījuma jums pilnībā jāpārtrauc zāļu lietošana vismaz 1 nedēļu iepriekš.
2. Netiešais Kumbsa tests- tests, ar kura palīdzību plazmā var noteikt anti-eritrocītu antivielas. Parasti to veic grūtniecības laikā un pirms asins pārliešanas. Anti-eritrocītu antivielas cilvēka asinīs parādās imūnsistēmas reaktīvā darba laikā vai kā reakcija uz dažām zāles... Lai iegūtu precīzāku pētījumu, vienlaikus tiek veikti vairāki žogi ar 2 stundu intervālu.

Indikācijas

Kumbsa tests tiek veikts tikai tad, ja ir nopietnas norādes. Šis ir dārgs un laikietilpīgs pētījums, un tas ir īpašs tests.

Parasti norādes par tā ieviešanu tiek uzskatītas par šādām situācijām:

1. Ar asins pārliešanu... Pārbaude ļauj noteikt, vai saņēmēja asinis iesakņojas cilvēka ķermenī, kā arī to, vai ir iespējama ziedošana. Šajā gadījumā ir jāpārbauda gan donora, gan saņēmēja materiāls. Ir svarīgi noteikt antivielu raksturu, jo to nesaderības gadījumā organismā uz Rh konflikta fona tas tiek iznīcināts imūnsistēma... Tas noved pie attīstības nopietnas slimības, un retos gadījumos pat nāve.
2. Pirms ķirurģiskas iejaukšanās kad pastāv asins zuduma risks... Tas tiek darīts, lai ārsts varētu uzreiz injicēt piemērotas asinis ķermeņa atjaunošanai.
3. Lai identificētu Rh sensibilizāciju. Rēzus ir specifisks antigēns, kas grūtniecības laikā rodas katras sievietes ķermenī. Ja mātei ir pozitīvs Rh, un tēvs ir negatīvs, vai otrādi, bērnam nav atkarības, viņš var mantot ikvienu. Ja bērns saņem pretēju mātes rēzu, sensibilizācijas risks ir augsts. Šo parādību raksturo mātes un bērna asiņu sajaukšana. Tas var notikt gan grūtniecības laikā, gan dzemdību laikā.

Ja grūtnieces ķermenī rodas Rh konflikts, tad mātes imunitāte sāk uztvert tā augli kā svešķermenis... Tāpēc pastāv liels risks, ka viņš sāks viņam uzbrukt.

Šādu darbību rezultātā mazulis var attīstīties nopietnas patoloģijas... Visbiežāk notiek eritroblastoze - parādība, kurā bērna ķermenis nespēj radīt pietiekamu skaitu sarkano asins šūnu.

Turklāt Rh konflikta dēļ augļa nāve var notikt dzemdē vai tūlīt pēc piedzimšanas. Kad pareizā pieeja lai ārstētu šādus nopietnas sekas var viegli izvairīties.

Atkāpes no normas

Ja rezultāts ir pozitīvs Kumbsa reakcijai, ārsts secina, ka asins serumā ir antivielas pret sarkanajām asins šūnām. Tas liek domāt, ka donora asinis nevar būt saderīgas ar pacienta asinīm.

Ja grūtnieces organismā ar Rh negatīvām asinīm tiek diagnosticēts pozitīvs rezultāts, tad viņas ķermenī ir antivielas pret augļa asinīm.

Tas runā par Rh konfliktu, kas prasa ārkārtīgi rūpīgu pieeju grūtniecības pārvaldībai no ārsta puses, kā arī visu sievietes norādījumu un ieteikumu īstenošanu.

Ja bērna asinīs ir antivielas, tiek diagnosticēta jaundzimušā hemolītiskā slimība. Šajā gadījumā tiek veikts otrais pētījums, lai noteiktu, vai topošās mātes asinīs palielinās antivielu citrāts vai nē.

Iespējamās Kumbsa testa komplikācijas

Kumbsa tests ir diezgan drošs tests, kas ļauj sākotnējos posmos diagnosticēt vairākas autoimūnas slimības. Tas reti rada komplikācijas, parasti negatīvas sekas ir saistītas ar asins paraugu ņemšanu.

Tie sastāv no:

• Asiņošana vai asiņošana zem ādas
• Reibonis un ģībonis
• Infekciozs piesārņojums

7 295

Uz eritrocītu virsmas ir liels skaits antigēnu. Atkarībā no šo antigēnu veida tiek izdalītas asins grupas, visvairāk pētītās grupas ir ABO, Rh, Kell, Duffy un daudzas citas ...

Vidējā cena jūsu reģionā: 2645 no 2645 ... līdz 2645

1 laboratorija veic šo analīzi jūsu reģionā

Pētījuma apraksts

Sagatavošanās pētījumiem: Asinis tiek ņemtas no vēnas, un pēc tam serumu (asins plazmu bez fibrinogēna) iegūst, dabiski sarecējot vai izgulsnējot fibrinogēnu. Mācību materiāls: Asins ņemšana

Uz eritrocītu virsmas ir liels skaits antigēnu. Atkarībā no šo antigēnu veida tiek izdalītas asins grupas, visvairāk pētītās grupas ir ABO, Rh, Kell, Duffy un daudzas citas sistēmas. Parasti antivielas pret citas grupas antigēniem pastāv asinīs, bet asins pārliešanas, grūtniecības, autoimūno slimību utt. Laikā tiek atrastas antivielas pret to antigēniem.

Metode

Netiešā Kumbsa reakcija balstās uz eritrocītu aglutinācijas (pielipšanas) noteikšanu, kuru virsmā ir nepilnīgas antivielas, kas parādās, pievienojot antiglobulīna serumu.

Pirmajā posmā vienā mēģenē ievada donora eritrocītus (O (I) grupa, Rh +) un testa serumu. Ja pētītajā serumā ir nepilnīgas antivielas pret eritrocītiem, tad tās tiek fiksētas uz donoru eritrocītu virsmas.

Otrajā posmā uz stikla tiek uzklāti donoru eritrocīti ar antivielām (ja tādas ir) un standarta antiglobulīna serums ar antivielām pret cilvēka imūnglobulīniem. Ja pirmajā posmā antivielas pret eritrocītiem tiek fiksētas uz eritrocītu virsmas, tad, pievienojot standarta serumu, antivielu mijiedarbības dēļ eritrocīti salīp kopā.

Atskaites vērtības - norma
(Netieša Kumbsa reakcija (antiglobulīna tests, nepilnīgu anti-eritrocītu antivielu noteikšana), asinis)

Informācija par rādītāju atsauces vērtībām, kā arī analīzē iekļauto rādītāju sastāvu var nedaudz atšķirties atkarībā no laboratorijas!

Norm:

Parasti antivielām pret pašu eritrocītiem nevajadzētu būt; kad Kumbsa reakcija ir inscenēta, eritrocītu agregācija nenotiek.

Indikācijas

Humorālās specifiskās imunitātes izpēte, ja rodas aizdomas par autoimūnām reakcijām organismā, Rh konflikts starp māti un augli, donora un recipienta asiņu savietojamības noteikšana

Vērtību palielināšana (pozitīvs rezultāts)

Antivielas pret eritrocītiem tiek noteiktas, ja:

1. Autoimūnas hemolītiskās anēmijas

2. Hemolītiskā slimība jaundzimušais

3. Sistēmiskas saistaudu slimības

4. Hronisks aktīvs hepatīts utt.

Facebook

Twitter

Sazinoties ar

Klasesbiedriem

Google+